降糖丸抑制TGF-β1改善糖尿病肾病小鼠肾损伤及纤维化

目的探讨降糖丸对糖尿病肾病小鼠的治疗作用,研究其改善糖尿病肾病肾损伤及纤维化的分子机制。方法C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、二甲双胍组和降糖丸组。造模小鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)合并高脂喂养诱导糖尿病肾病模型,持续8周。记录小鼠体质量、空腹血糖变化;检测尿蛋白、血肌酐评价肾功能;检测血清TC、TG评价脂代谢情况;HE、PAS、Masson染色观察肾脏病理变化;IHC检测小鼠肾组织纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)蛋白表达;RT-PCR检测FN、TGF-β1、CollagenⅣ的mRNA表达水平;Western blot检测小鼠肾脏中FN、Smad 3及p-Smad 3蛋白的表达。结果与正常组相比,模型组空腹血糖明显升高(P<0.01);24 h尿量、24 h尿蛋白含量、血肌酐值、血清TC、TG明显升高(P<0.01),糖原堆积、间质纤维化明显增加;小鼠肾组织中FN蛋白表达明显增多(P<0.01);FN、TGF-β1与CollagenⅣ的mRNA表达明显升高(P<0.01);小鼠肾脏中FN、Smad 3及p-Smad 3蛋白的表达量明显升高(P<0.01或P<0.05)。与模型组相比,降糖丸组能够明显逆转上述变化。结论降糖丸能够有效地改善STZ合并高脂饮食诱导的小鼠糖尿病肾病,其机制可能是通过抑制FN及TGF-β1的表达从而改善肾间质纤维化。

活血利湿降浊方调控尿酸转运体及炎症改善高尿酸血症肾病的研究

目的:本研究旨在探讨活血利湿降浊方对氧嗪酸钾和次黄嘌呤联合诱导的高尿酸血症肾病小鼠的药效作用和分子机制。方法:选取36只雄性BALB/c小鼠随机分为6组,每组6只,分别为:正常对照组、模型对照组、活血利湿降浊方3、6 g/kg组、别嘌呤醇0.015 g/kg组和苯溴马隆0.02 g/kg组。除正常对照组外,其余各组联合氧嗪酸钾和次黄嘌呤灌胃3 w诱导高尿酸血症肾病模型,造模同时灌胃相应药物,收集小鼠24 h尿液检测尿蛋白含量,检测肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活性,检测小鼠血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量的变化;苏木素-伊红(HE)和尿酸盐(Gomori)染色观察小鼠肾组织损伤和尿酸盐沉积情况;天狼猩红(Sirius Red)和马松三原色(Masson)染色观察小鼠肾组织胶原沉积情况;荧光定量PCR(q-PCR)检测肾组织白细胞介素1β(Il1b)、肿瘤坏死因子α(Tnf-α)、细胞粘附因子1(Icam1)、溶质载体家族22成员12(Slc22a12)、溶质载体家族2成员9(Slc2a9)、溶质载体家族2成员6(Slc2a6)和ATP结合盒亚家族G成员2(Abcg2)的mRNA表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠血清UA、Cr、BUN含量、肝脏XOD活性以及24 h尿蛋白含量、肾组织Il1b、Tnf-α、Icam1、Slc22a12、Slc2a9的mRNA表达显著升高(P<0.01),肾组织Slc2a6和Abcg2的mRNA表达显著降低(P<0.01);肾组织出现明显的尿酸盐和胶原沉积;与模型对照组相比,活血利湿降浊方3、6 g/kg组血清UA、Cr、BUN含量、肝脏XOD活性以及24 h尿蛋白含量、肾组织Il1b、Tnf-α、Icam1、Slc22a12、Slc2a9的mRNA表达明显降低(P<0.01或P<0.05),肾组织Slc2a6和Abcg2的mRNA表达明显升高(P<0.01或P<0.05)。结论:活血利湿降浊方通过调控肾脏尿酸转运体和炎症因子的表达,发挥降尿酸并改善肾损伤及纤维化的作用。