新疆伊犁地区不同马场马腺疫病原菌的分离及鉴定

本文通过对新疆伊犁地区3个马场中疑似马腺疫病例进行病料采集、培养、生化实验及同源性分析,进一步确定伊犁地区不同马场马腺疫病原菌的种属差异。根据患病马匹临床症状对疑似马腺疫病例进行实验室细菌学检查及血常规检查。结果表明,采集的40份样品中检测出7株疑似马链球菌,通过fneB基因扩增后发现其中6株菌的核苷酸同源性达90%~99%,确诊为马链球菌马亚种;而另1株菌其氨基酸同源性为76%~85%,推测可能为马链球菌兽疫亚种。血常规结果表明,患病马白细胞总数极显著升高(P<0.01),粒细胞数和淋巴细胞数显著升高(P<0.05)。本研究结果提示,新疆伊犁地区马场可能有兽疫亚种与马亚种混合感染的病例,为今后临床防控马腺疫疾病提供参考依据。

马腺疫链球菌fneB基因LAMP检测方法的建立及应用

为了建立快速简便的fneB-LAMP检测法用于马腺疫病原马链球菌马亚种(S.equi)的检测,本试验采用恒温水浴进行LAMP扩增,建立可视化fneB-LAMP检测方法。结果显示:对大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球、蜡状芽孢杆菌和克雷伯杆菌5种菌与标准S.equi菌株检测,只能够检测出标准阳性菌株;对新疆昭苏县3个马场临床检查疑似马腺疫的鼻拭子和脓汁共40份样品进行fneB-LAMP检测,其中有7株分离菌呈阳性;与普通PCR检测方法相比,LAMP检测方法灵敏度为8×10^(-6)μg/μL,较普通PCR方法高;该方法在粗提模板的情况下只需简单的恒温仪器反应1 h可得到可视化的检测结果。本试验成功建立了马腺疫病原靶向fneB基因LAMP检测的方法,能够快速准确的检测出S.equi,为今后快速诊断马腺疫疾病提供参考。