哈尔滨医科大学伍连德研究所

伍连德博士是国际著名医学家、公共卫生学家、微生物学家，是中国现代医学先驱、中华医学会和《中华医学杂志》创始人。1910年12月至1931年在哈尔滨期间，伍连德博士成功控制了哈尔滨鼠疫大流行，创立了“肺鼠疫”学说，证实了旱獭在鼠疫传播中的重要作用，被国际医学界赞誉为“鼠疫斗士（Plague Fighter）”，组织建立了中国东北地区防疫机构和中国第一个现代医学研究所，构建了中国最早的疫病防控体系，于1926年创建了滨江医学专门学校（哈尔滨医科大学前身）、

肺结核与肺癌相互影响的研究进展

肺结核与肺癌都严重危害着人类健康,结核病目前发病率和死亡率居高不下,而肺癌是全世界范围内最常见的死亡率较高的恶性肿瘤之一,两种疾病预后不同,但是二者从发病的原因上讲却是相互影响的,结核病慢性炎症刺激、结核分枝杆菌磷酸酶成分以及结核分枝杆菌感染引发的免疫反应都可导致肺癌的发生。肺癌发生后不恰当的治疗方式也会有利于结核分枝杆菌生长,导致肺结核的发生。面对这样全球性的重大公共卫生问题,我们将用近年来的流行病学调查和实验研究结果为两种疾病的共存阐明原因,也将为下一步结核病合并肺癌患者的治疗提供依据。

类风湿关节炎动物模型研究进展

类风湿关节炎是一种多发性自身免疫性疾病,多累及关节,最终会导致关节的畸形,在自然病程中,10年致残率可超过60%,严重影响生活质量。类风湿关节炎的动物模型在其发病机制、治疗方法、治疗靶点等方面的研究中发挥重要作用。本综述主要介绍几种常见类风湿关节炎动物模型的构建方法、发病机制及其应用,以便在今后的疾病研究中选择合适的动物模型。

肺外结核病微生物学诊断方法的研究和应用进展

肺外结核病指由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染所引起的发生在肺部以外器官和部位的结核病。近年来肺外结核的发病率逐渐升高,未能得到早期有效治疗的肺外结核病患者可能并发畸形、截瘫甚至死亡等严重后果。微生物学检测方法对从病原学角度诊断肺外结核病至关重要。基于此,总结了近年来肺外结核病细菌学检查方法、结核分枝杆菌的抗原检测与分子生物学检测等微生物学诊断方法的概况及应用进展,并对这些检测方法的优缺点及适用范围进行了分析、比较,以期为今后肺外结核病病原学诊断的研究提供相关信息。

Notch信号通路调控癌症的研究进展

Notch信号通路在调控细胞进程、调节细胞命运方面起至关重要的作用,该通路高度依赖于上下游分子的调控,在不同的细胞环境中功能大相径庭。因此Notch信号调控癌症相关通路具有极强的复杂性,但目前对该通路的具体机制及功能的研究仍然存在许多未知的领域。本文着重于整理近年来研究Notch信号通路及其相关的肿瘤的关系的最新进展,归纳Notch通路调控的癌症相关通路,对靶向Notch信号的肿瘤治疗策略的研究前景进行展望。

LED红光在临床疾病中的研究及应用

发光二极管(LED)是一种将电能转化为光能的半导体电子元件。随着LED技术的不断升级,其应用范围也从传统的照明领域延伸扩大。近年来,LED在临床应用及基础试验研究中越来越受到人们的重视,尤其是LED在皮肤病、关节炎、骨质疏松、伤口愈合与修复、抗感染和免疫调节等方面的研究。本文将主要对LED红光在多种临床疾病中的研究和应用进行综述。

CRISPR/Cas9基因编辑技术在致瘤病毒感染研究中的应用

成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9〔clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9),CRISPR/Cas9〕基因编辑技术的发现源于真细菌和古细菌中CRISPR/Cas系统介导的适应性免疫机制研究。该技术利用特异性向导RNA识别靶点基因,引导核酸内切酶Cas9对其切割,并通过同源重组或非同源末端连接完成对目的 DNA的编辑。某些病毒感染机体后,可将其基因组整合到宿主细胞基因组中或潜伏于组织中而无法被彻底清除,从而引起持续性感染。本文参考2013年以来CRISPR/Cas9基因组编辑技术的最新相关研究报道,重点综述其在人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)、人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)、乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)等致瘤病毒感染相关疾病研究中的应用,并概括其作用于这些病毒的有效靶点。

游离DNA检测技术及其在疾病诊疗中的应用和研究进展

游离DNA(cfDNA)是存在于人体细胞外液中的DNA片段,在生理或病理条件下(如妊娠、肿瘤等),cfDNA的含量变化和分子特征等使其成为疾病诊疗的生物标志物之一。随着cfDNA富集技术以及测序、质谱等检测技术的发展,cfDNA的检测已形成完整的检验流程。基于cfDNA检测的液体活检技术在临床肿瘤诊疗、产前检查中已得到广泛应用,并且在自身免疫病诊疗中展现出较大的潜力。本综述描述了cfDNA检测技术的发展和液体活检在临床方面的应用,以及cfDNA在疾病诊断和治疗中的研究进展。

人核糖核酸酶A超家族抗微生物活性及其作用机制

人核糖核酸酶A(human RNase A)超家族包含13个具有不同生物活性的成员(RNase 1~RNase 13),其蛋白质结构除具有催化保守序列外,还具有显著多样性的序列,决定了人类核糖核酸酶A可发挥核糖核酸酶活性之外的生物学功能。人核糖核酸酶A超家族成员在多种免疫细胞例如嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞中表达,并可被分泌以发挥多种多样的生物学功能,包括抗微生物活性、促进宿主防御、参与血管生成及精子成熟等。其中,人核糖核酸酶A超家族部分成员,可通过水解病毒RNA、抑制病毒复制、破坏细菌细胞壁、促进微生物凝集、损伤寄生虫细胞膜和线粒体膜等直接作用,以及通过宿主天然免疫细胞介导的间接作用,发挥抗微生物及寄生虫活性,参与宿主防御。本文对人核糖核酸酶A的抗微生物(包括病毒、细菌、真菌)和抗寄生虫活性及其作用机制进行综述,并对人核糖核酸酶A作为抗微生物活性物质和天然免疫分子,用于治疗严重和耐药微生物感染的前景进行展望。

发光二极管630nm红光通过PI3K/AKT/mTOR通路抑制滑膜成纤维细胞炎症反应

发光二极管(Light Emitting Diode,LED)光照疗法是一种低能量光疗(Low-level Light Therapy,LLLT),在皮肤炎症治疗和术后疼痛缓解方面已被广泛研究,但其对类风湿性关节炎的作用及其机制尚不清楚。本研究采用LED 630 nm红光作为光源,以TNF-α刺激模拟炎症的类风湿关节炎患者组织中提取原代滑膜成纤维细胞(RA-FLS细胞)为模型。采用MTT和细胞划痕实验,检测不同剂量的LED 630 nm红光对炎症RA-FLS细胞的活力,及其增殖和迁移的影响。采用RT-qPCR和ELISA方法,检测IL-1β、IL-6和IL-8在细胞中mRNA表达及细胞上清中蛋白表达的变化。采用免疫印迹法,检测细胞中PI3K、AKT、mTOR和TRPV4蛋白表达和磷酸化的变化。结果证实,LED 630 nm红光可抑制RA-FLS细胞的增殖和迁移,降低细胞中IL-1β、IL-6和IL-8炎症因子的mRNA表达水平。光照剂量为39 J/cm^(2)的LED红光降低了RA-FLS细胞中PI3K、AKT、mTOR和TRPV4蛋白的表达和磷酸化水平。结果证实,LED 630 nm红光可以通过下调TRPV/PI3K/AKT/mTOR信号通路以及减少炎症因子的释放,抑制RA-FLS细胞的炎症反应及其增殖和迁移。

630 nm LED红光通过AKT/FOXO3a信号通路抑制人巨噬细胞炎症因子释放的研究

目的探讨630 nm发光二极管(light emitting diode,LED)红光照射对人外周血单核细胞系THP-1来源巨噬细胞炎症反应的作用,寻找其可能发挥作用的信号通路与分子机制。方法人外周血单核细胞THP-1,经佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)诱导为THP-1来源巨噬细胞,并用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理制备巨噬细胞炎症模型;未经630 nm LED红光照射的细胞设为对照组,实验组各组细胞接受光照能量强度分别为14.4、28.8和43.2 J/cm^(2);对不同能量强度LED红光照射处理后的巨噬细胞进行实时荧光定量PCR(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的mRNA与蛋白表达,Western blot检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和叉头框蛋白O3a(forkhead box O3a,FOXO3a)蛋白及其磷酸化(p-AKT、p-FOXO3a)表达,并分析其分子通路。结果巨噬细胞经LPS诱导后,与对照组相比,实验组细胞中iNOS的mRNA表达显著升高,同时伴随炎症因子IL-1β、TNF-α的mNRA表达水平显著提升,差异有统计学意义(t值分别为-48.73、-80.96、-38.45,P值均<0.001)。M1巨噬细胞经630 nm LED红光照射处理后,细胞中炎症因子IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平明显降低,同时IL-1β、TNF-α的蛋白表达水平下降,p-AKT/AKT蛋白比值和p-FOXO3a/FOXO3a蛋白比值明显降低,差异有统计学意义(t值分别为60.18、25.30、14.79、17.31、23.64、87.50,P值均<0.05)。SC79干预后,M1巨噬细胞的p-AKT/AKT蛋白比值显著升高,IL-1β的mRNA、蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(t值分别为-18.08、-26.43、-18.06,P值均<0.05)。SC79激活M1巨噬细胞AKT磷酸化后,630 nm LED红光可以明显降低SC79干预后M1巨噬细胞中p-AKT/AKT蛋白比值,同时明显下调IL-1β、TNF-α的mRNA表达和IL-1β、TNF-α的蛋白表达,差异有统计学意义(t值分别为15.59、33.56、70.00、5.79、36.25,P值均<0.05)。然而与对照组相比,单独SC79干预后,M1巨噬细胞中TNF-α的mRNA与蛋白表达未显著改变(P>0.05)。结论630 nm LED红光主要通过下调AKT和FOXO3a蛋白磷酸化通路,抑制巨噬细胞中炎症因子释放。

小RNA对胞内菌生长、毒力及铁水平的调节作用

细菌小RNA（small RNA,sRNA）是一类长度为50-500个碱基,具有调控转录、翻译和mRNA稳定性的非编码调节性RNA。随着越来越多的sRNA被鉴定,部分细菌的sRNA功能已逐步阐明,主要参与调控细菌的基因表达、增殖、毒力及对环境的应激反应等生物学过程。本文就胞内菌（如沙门菌、李斯特菌、嗜肺军团菌等）sRNA对其自身在宿主细胞内的生长、毒力和铁水平的调控作用进行综述。

柯萨奇病毒B3型3D蛋白抗体的制备

肠道病毒3D蛋白是其RNA聚合酶。柯萨奇病毒B3型(coxsackievirus B3,CVB3)主要感染心脏,其3D蛋白在心肌表达中的时序和分布尚不清楚。本研究将通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的CVB 3D片段插入pET28a(+)的表达框,获得pET28a(+)-3D重组质粒。异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导pET28a(+)-3D表达3D-His蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后,切胶,获得3D-His蛋白。3D-His蛋白加佐剂免疫新西兰大白兔制备3D蛋白多克隆抗体,蛋白免疫印迹法检测抗体效价及特异性。结果显示,本研究获得了高效价且特异性好的抗CVB3 3D蛋白抗体,可用于CVB3 3D蛋白功能的后续研究。

630nm LED照射促进TRPV1表达诱导成纤维样滑膜细胞凋亡

类风湿关节炎(RA)是一类以滑膜增生、滑膜关节损害、活动功能不全为主要特点的慢性全身性自我免疫炎症性病变。目前,对于RA的治疗包括药物治疗、外科手术治疗和物理疗法。物理疗法中光疗法由于其无侵袭力、无痛等优势,被用作辅助治疗手段普遍应用于临床。为此,本研究通过630 nm LED红光探讨了光生物调节法通过促进成纤维样滑膜细胞凋亡,从而治愈类风湿性关节炎的机理。JC-1染色试验表明,630 nm LED光照后线粒体膜电位去极化增强,膜电位降低;使用CASP3活性检测试剂盒和CASP9活性检测试剂盒进行试验,证明630 nm LED可以促进MH7A细胞中CASP3和CASP9酶的活性;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)试验显示,630 nm LED可以促进瞬时受体电位香草素1(TRPV1)的表达;蛋白质免疫印迹试验(Western blot)证明,经过630 nm LED红光照射可以促进MH7A细胞TRPV1蛋白的表达;CCK-8试验表明,630 nm LED可以显著性抑制MH7A细胞活力,但不能降低TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞活性;TUNEL试验证实,630 nm LED照射诱导MH7A细胞凋亡,但不能诱导TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞凋亡。综上所述,630 nm LED红光在类风湿性关节炎中通过调控TRPV1促进TNF-α诱导的MH7A细胞凋亡,这对辅助缓解RA滑膜炎症有一定作用。

630 nm LED照射阻滞STAT1核转位抑制M1型巨噬细胞极化

M1型巨噬细胞为经典活化型巨噬细胞,可分泌多种促炎因子和趋化因子促进炎症的发展。我们前期研究已经证明,630 nm发光二极管(LED)照射能抑制巨噬细胞释放炎症因子,然而,630 nm LED对巨噬细胞极化的调控作用及其分子机制尚不清楚。在本研究中,我们评估了630 nm LED照射对单核细胞(THP-1)来源的M1型巨噬细胞极化的影响,探讨了其对M1型巨噬细胞极化的作用机制。体外培养THP-1细胞,用佛波酯(PMA)将其诱导成巨噬细胞。用脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)处理巨噬细胞,使其极化成M1型巨噬细胞,极化的同时用波长为630 nm、功率密度为40.02 mW/cm^(2)的LED对其进行照射。采用噻唑蓝(MTT)法、细胞计数试剂盒(CCK-8)法和乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒检测细胞活力,用实时定量PCR法检测M1型巨噬细胞相关因子mRNA的表达水平,采用免疫印迹和细胞免疫荧光检测M1型巨噬细胞中STAT1的核转位。结果显示,M1型巨噬细胞经630 nm LED照射后,其活性未受影响,但M1型巨噬细胞相关因子干扰素调节因子5(IRF5)、趋化因子配体9(CXCL9)、CXL10、CXCL11 mRNA的表达水平显著降低,并且阻滞转录因子STAT1向核内转移。综上所述,630 nm LED照射可通过阻滞STAT1核转位抑制M1型巨噬细胞极化,此研究可能对治疗巨噬细胞极化相关疾病提供新的思路。

TRIM21的抗病毒作用研究进展

TRIM(tripartite motif)家族因具有相似的N端结构又被称为RBCC家族,其成员在诸多与固有免疫相关的生物学过程中发挥重要作用.近年来的研究发现,TRIM家族参与宿主的胞内抗病毒作用,其中一些TRIM家族蛋白被认为是病毒的限制因子.最近,TRIM21作为E3泛素连接酶的抗病毒作用相继被报道,其可通过抗体依赖的细胞内抗病毒作用(antibody dependent intracellular neutralization,ADIN)及参与固有免疫通路发挥抗病毒作用,现就TRIM21的结构、表达分布、抗病毒作用及其机制的研究进展进行总结和综述.

结核分枝杆菌小RNA及其作用的研究进展

细菌小RNA是一类长度在50~500个核苷酸之间的不具有编码蛋白质功能,但具有转录后调控作用的RNA,在细菌中参与调控细菌多种生理和病理活动,如调节细菌代谢和毒力作用等过程。近年来,在结核分枝杆菌已经鉴定出近200种小RNA,并证明这些小RNA参与结核分枝杆菌的生理和病理过程。本文对结核分枝杆菌小RNA在细菌生长繁殖、毒力因子调控、细菌耐药和巨噬细胞内应激环境的适应等方面的作用进行综述。

细菌鸟氨酸脱羧酶作用的研究进展

多胺是生物体内广泛存在的一类具有多种生物活性的低分子化合物,其合成的关键限速酶是鸟氨酸脱羧酶,鸟氨酸脱羧酶和多胺共同参与生物生长发育等重要生理过程。细菌鸟氨酸脱羧酶在结构上和真核生物略有不同,但是功能类似,其能通过促进多胺的产生发挥对细菌的调节作用。研究发现,细菌鸟氨酸脱羧酶也参与细菌对其他物种的作用,但对人体的作用尚不明确。因此,本文综述了国内外关于细菌鸟氨酸脱羧酶在促进细菌生长、适应环境、抗生素抗性和生物膜形成等方面的作用及相关机制,希望能对细菌鸟氨酸脱羧酶及其作用的后续研究提供一些信息与参考。

肠道菌群与类风湿关节炎关系的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以滑膜增生和外周关节对称性、侵蚀性关节炎为主要特征的慢性炎症性自身免疫病.已有研究证实RA患者中肠道菌群结构和数量都发生了相应变化.其中益生菌的研究备受关注,益生菌可以调节免疫系统功能,调整菌群结构达到预防或者治疗RA的效果.现通过分析RA患者肠道菌群结构和数量变化来概述肠道菌群在RA发病机制中的作用以及应用益生菌的治疗策略.

长链非编码RNA与乙型肝炎病毒相关肝细胞癌的研究进展

许多人类肿瘤是由致瘤病毒引起的,除病毒编码蛋白外,大量证据表明,由致瘤病毒诱导宿主转录的非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)也是促进肿瘤产生的重要辅佐因子。在早期,由于ncRNA不能编码蛋白质,因而被研究者认为是无用的RNA,但随着科学技术的发展,人们逐渐了解其在多种生物学过程中的重要性。肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)在原发性肝癌中的占比大,其患者死亡率在所有癌症中排名第三,常见于亚洲、非洲和欧洲南部,乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的慢性持续性感染是其主要产生原因。大于200个核苷酸识别的ncRNA被称为长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)。目前人们对lncRNA在HBV相关HCC中的机制仍不清楚,但越来越多的证据表明lncRNA在HBV相关HCC过程中发挥了关键性作用,使得lncRNA成为HCC治疗的关键要素。本文主要就HBV感染导致的HCC与lncRNA之间的关系作一综述。