肾综合征出血热连续性肾脏替代治疗及肝素抗凝的应用研究

目的分析肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)患者连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)及CRRT中肝素抗凝的应用情况。方法对我中心2008年1月—2012年8月住院的346例HFRS患者的临床资料进行回顾性分析。结果轻、中型患者均未行CRRT。危重型患者CRRT治疗率和重叠期时初始CRRT治疗率明显高于重型,而间断性血液透析治疗率低于重型患者(P<0.01,P<0.05)。11例重型患者和48例危重型患者行CRRT,70次肝素抗凝中有16次考虑抗凝诱发加重机体出血,2次考虑抗凝后期出现管路凝血;33次无肝素化治疗中均未诱发加重机体出血,有4次在治疗后期出现管路凝血。结论 CRRT已广泛应用于危重型HFRS患者的救治,应结合疾病自身的临床特点,合理地选择肝素抗凝与无肝素化治疗策略。

人滋养层细胞内丙型肝炎病毒样颗粒的免疫电镜形态学研究

目的:应用免疫电镜技术观察体外培养的人胎盘滋养层细胞感染丙型肝炎病毒(HCV)情况。方法:采用胰蛋白酶消化法及Percoll密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞,以HCVRNA阳性血清对滋养层细胞进行体外感染实验,胶体金免疫电镜检测滋养层细胞内的HCV病毒颗粒,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定性检测滋养层细胞内HCVRNA。结果:体外培养的人胎盘滋养层细胞内可观察到胶体金颗粒吸附的病毒样颗粒,形态及直径符合HCV特点。RT-PCR定性检测结果阳性,进一步证实所观察到的病毒样颗粒为HCV。结论:HCV可感染体外培养的人胎盘滋养层细胞。

连续性肾脏替代治疗与间断性血液透析在重症肾综合征出血热治疗中的应用

目的回顾性观察连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)与间断性血液透析(intermittent hemodialysis,IHD)在重症肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)患者中的应用。方法依据临床分型标准,将2008年1月—2012年8月在我中心行血液净化治疗的147例重症HFRS患者分为重型组和危重型组;参照中华医学会ICU血液净化指南,对纳入患者行CRRT或IHD治疗,比较2组行CRRT或IHD治疗的病死率、并发症发生率和急性期的实验室指标。结果重型组患者均存活;危重型组患者行CRRT与IHD后的病死率比较差异无统计学意义(P=0.124);危重型组行CRRT的比例明显高于重型组(P<0.001)。病程中存在重叠期的重症患者,行CRRT初始治疗的例数明显多于行IHD的例数,但其生存率比较差异无统计学意义(P=1.000)。CRRT组患者病情较IHD组重,其疾病本身的肾外并发症也较IHD组常见。结论 CRRT可广泛应用于危重型HFRS患者的救治。CRRT可有效减轻水负荷,稳定机体的血流动力学状态,将有助于使危重患者平稳地渡过急性期。

加强危重型肾综合征出血热的救治研究进展

肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是由汉坦病毒(hantaan virus,HV)引起的以发热、出血及肾脏损害为特征的自然疫源性疾病,病程中易合并顽固性休克、急性肾衰竭、呼吸衰竭及多脏器功能障碍综合征,住院病死率高。本文针对HFRS患者特殊的病理生理学特点,借鉴重症医学发展带来的先进救治理论和技术,研究合理使用液体疗法、机械通气、肾脏替代治疗、血流动力学监测等诊疗手段救治危重型HFRS患者的经验。

危重型肾综合征出血热患者肾脏替代治疗的应用

目的观察危重型肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)患者肾脏替代治疗(renal replacement therapy,RRT)的疗效及在急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)不同时期开展RRT对机体预后的影响。方法对我中心2008年1月—2012年8月住院的77例危重型HFRS的临床资料进行回顾性分析。结果保守治疗组患者的住院病死率高于RRT组(P<0.05)。AKI早期组患者的住院病死率、难治性休克发生率、机械通气率和血管活性药物使用率均高于晚期组(P<0.05)。死亡患者急性期血清肌酐低于存活患者,白细胞计数和血浆乳酸水平高于存活患者,心力衰竭、ARDS、消化道出血和脑病发生率高于存活患者,AKI 3期发生率低于存活患者(P<0.05)。结论 RRT是救治危重型HFRS的重要支持手段,但不能单纯依靠AKI程度确定行RRT的最佳治疗时机,在行RRT前需对患者病情进行系统全面的评估。

人类免疫缺陷病毒-1B和C亚型Nef蛋白特异性CD8^+ T细胞交叉应答反应的研究

目的:探讨中国人群人类免疫缺陷病毒-1B(H IV-1B亚型)Nef蛋白特异性CD8+T细胞应答在B、C亚型间的交叉反应性。方法:选取51例H IV-1B亚型感染者,采取外周血单个核细胞(PBMC),用合成的54个H IV-1B、C亚型Nef全基因序列肽库作为抗原,酶联免疫斑点吸附试验(ELISpot)方法检测H IV-1B亚型Nef蛋白特异性CD8+T细胞对B、C亚型抗原的应答反应。结果:在产生特异性应答效应的个体中,82.9%(29/35)感染个体同时识别B和C亚型肽段。感染个体在对两个亚型肽段的识别数量及应答强度上无显著差异(P=0.529和P=0.754)。H IV-1B亚型特异性CD8+T细胞能针对70.4%无论B还是C亚型的Nef肽段产生应答反应。被特异性CD8+T细胞同时识别的B、C亚型Nef肽段间氨基酸序列的同源性显著高于仅能被识别的B亚型或C亚型肽段的氨基酸序列(P=0.01)。结论:H IV-1B亚型Nef蛋白特异性CD8+T细胞应答在B、C亚型间具有良好的交叉反应性,能产生交叉反应的氨基酸序列具有较高的亚型间同源性。

膦甲酸钠治疗乙型重型肝炎38例

目的观察膦甲酸钠对乙型重型肝炎的疗效。方法治疗组乙型重型肝炎患者38例,在一般保肝、支持及防治并发症基础上加用膦甲酸钠治疗4周,观察肝、肾脏功能,HBV DNA定量变化及病死率等。结果膦甲酸钠对急性、亚急性乙型重型肝炎患者肝功能有明显影响,SB由300.96±142.80μmol/L下降为57.72±22.15μmol/L,ALT由352.73±168.14u/L下降为36.00±4.10u/L,AST由433.22±169.11u/L下降为50.18±12.52u/L,PT由22.88±12.23(秒)下降为10.11±3.72(秒),CHOL由1.99±1.56mmol/L上升为3.60±2.18mmol/L;膦甲酸钠对慢性乙型重型肝炎患者肝功能亦有明显影响,SB由394.58±179.82mmol/L下降为78.44±23.72μmol/L,ALT由199.44±107.82u/L下降为42.52±27.01u/L,AST由210.00±170.32u/L下降为79.44±40.73u/L,PT由27.81±13.22(秒)下降为16.11±8.34(秒),CHL由0.99±1.68mmol/L上升为2.90±1.99mmol/L。乙型重型肝炎患者血清HBV DNA变化显示,治疗前为3072.58±742.36pg/ml,治疗后为400±80.70pg/ml;对照组则分别为2989.40±800.48pg/ml和2004.58±807.56pg/ml。在68例重型肝炎中,治疗组死亡8例(22%);对照组死亡14例(46%),两组差异显著(P<0.01)。结论膦甲酸钠可以安全有效地治疗乙型重型肝炎,明显降低病死率。

p16蛋白及其基因在原发性肝细胞癌中的表达缺失及意义

目的 :通过p1 6蛋白及其基因在原发性肝细胞癌中的表达缺失研究 ,探讨p1 6基因与肝癌的关系 .方法 :收集我院原发性肝癌 32例 ,用免疫组织化学SP法、聚合酶链式反应(PCR)方法分别检测肝癌及癌旁组织中p1 6蛋白的表达及其基因的缺失情况 .结果 :32例肝癌中 ,p1 6蛋白表达缺失率为6 2 .5 % (2 0 / 32 ) ,癌旁组织中p1 6蛋白表达缺失率为 3.1 3%(1 / 32 ) ,两者差异有显著意义 (P <0 .0 1 ) .p1 6蛋白的表达与肝癌分化程度关系密切 (P <0 .0 1 ) .p1 6基因在癌组织中的缺失率 2 5 % (8/ 32 ,均为p1 6蛋白表达缺失者 ) ,在癌旁组织为3.1 3% (1 / 32 ) ,相差显著 (P <0 .0 5 ) .结论 :p1 6基因缺失与肝癌发生关系密切 ,提示p1 6蛋白可能是预测患者预后的一个指标 。

HMGB-1在肾综合征出血热早期预警及预后评估中的价值

目的：探讨高迁移率族蛋白1（HMGB-1）在肾综合征出血热（HFRS）疾病早期预警及预后评估中的应用价值．方法：随机纳入105例2011-10／2012．12在我中心住院的HFRS患者．结合临床分型标准，将其分为轻型、中型、重型和危重型组．随机抽取上述患者急性期血浆标本93份，恢复期标本78份，28份健康志愿者血浆标本作对照，应用ELISA检测HMGB-1的表达．比较各型HFRS患者急性期与恢复期HMGB-1的表达变化，分析HMGB-1与预后的相关性，进一步应用ROC曲线分析HMGB．1预测预后的价值．结果：纳人的患者中，轻型19例，中型25例，重型27例，危重型34例．危重型患者中12例死亡，住院病死率为11．42％．各型患者在年龄及姓别分布差异无统计学意义．各型患者急性期及恢复期采血病日比较无统计学意义．急性期各型患者HMGB-1水平均高于健康对照（P〈0．001），且随着病情加重，急性期HMGB-1水平表达逐渐增高．恢复期除轻型患者外，HMGB-1水平均高于健康对照（P〈0．05），且危重型HMGB-1表达高于轻、中型（P〈0．05）．Spearman分析显示HMGB-1与HFRS预后有相关性（r=0．275，P〈0．001），ROC曲线分析显示HMGB-1在预后评估中有统计学意义（AUC=0．800，95％CI：0．645—0．955，P〈0．001）．结论：HMGB-1可作为HFRS疾病早期预警及预后评估中的一个重要生物标记物．

人DC的获取与DC特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素的表达

目的:证实体外诱导分化的人树突状细胞(DC)表面高效表达树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-SIGN),为进一步研究其在丙型肝炎病毒传播中的作用奠定基础。方法:F icoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),黏附2 h后接种于完全培养液中,并加入rhGM-CSF、rhIL-4刺激分化,共培养7天,光镜及扫描电镜观察细胞形态,以DC表面特异性标志DC-SIGN的特异性抗体进行荧光染色,检测DC-SIGN的表达。结果:经诱导产生的细胞具有典型的DC形态特征,高表达DC特异性标志物DC-SIGN。结论:GM-CSF与IL-4联合刺激PBMC可分化为DC,且高表达DC-SIGN,为后续研究DC-SIGN奠定了基础。

p16蛋白及其基因在原发性肝细胞癌中的表达缺失性研究

目的通过p16蛋白及其基因在原发性肝细胞癌中的表达缺失研究,探讨p16基因与肝癌的关系。方法收集我院原发性肝癌32例,用免疫组织化学SP法、聚合酶链式反应(PCR)方法分别检测肝癌及癌旁组织中p16蛋白的表达及其基因的缺失情况。结果32例肝癌中,p16蛋白阴性表达率为62.5%(20/32),癌旁组织中p16蛋白阴性表达率为3.13%(1/32),两者差异有显著意义(P<0.01)。p16蛋白的表达与肝癌分化程度关系密切(P<0.05),而与癌灶体积、甲胎球蛋白(AFP)值的差异无显著意义(P>0.05)。p16基因在癌组织中的缺失率25%(8/32),在癌旁组织为3.13%(1/32),相差显著(P<0.05)。p16基因缺失与肝癌分化程度、癌灶体积、AFP值无关(P>0.05)。结论p16基因缺失与肝癌发生关系密切,提示p16蛋白可能是预测病人预后的一个指标,但仍需进一步确证。

北京小汤山医院SARS病人早期临床特点及治疗分析

目的 总结北京小汤山医院SARS患者早期临床特点和诊断与治疗的体会。方法对2003年5月收治112例SARS患者．其中医护人员患者11例进行回顾性分析。结果北京小汤山医院接收的部分SARS患者具有明显的医院和家庭聚集的发病特点，有93．75％(105／112)的患者有SARS感染接触史，初期接触地点主要在医院，占79．46％(89／112)，在家中有接触史占9．82％(11／112)，有外出史占4．46％(5／112)，无明显接触史7例，占6．25(7／112)。初期应用糖皮质激素加利巴韦林抗病毒治疗及其他的综合治疗4～7天，均具有较好的治疗效果。除1例患者转中日友好医院外，其余的患者于6月20日前全部康复出院。结论SARS是一种急性自限性传染病，SARS在传播过程中存在着医院与家庭聚集性，主要为呼吸道飞沫传播和密切接触传播?，临床早期以发热为主，胸片表现为斑片状渗出性影，CT检查比胸片更敏感，胸部影像学异常是SARS诊断的必要指标，系列X线平片与CT即可随时观察SARS的病情变化，并可指导治疗，提示预后。约有1／3的患者出现白细胞减少，约1／2患者肝功异常?重型患者有明显的呼吸困难，需无创呼吸机支持。早期糖皮质激素治疗效果好，但用药剂量、时间要根据胸片情况而定。

胸腺肽α_1联合前列地尔治疗早中期慢性重症肝炎疗效观察

目的 :观察胸腺肽α1联合前列地尔治疗慢性重症肝炎的疗效。方法 :慢性重症肝炎 70例 ,分成治疗组 35例 ,对照组 35例。对照组用前列地尔待支持、保肝疗法 ;治疗组在此基础上加胸腺肽α1治疗 ,3m后检测血清胆红素、谷丙转氨酶、凝血酶原活动度等水平。结果 :治疗组总有效率为 80 0 % ,对照组总有效率为4 5 1% ,两组比较差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;治疗组与对照组治疗前各项生化指标比较无显著性意义 (P <0 0 5 ) ;治疗后两组的生化指标均有所下降 ,两组比较差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。结论 :胸腺肽α1联合前列地尔能显著减轻肝脏的损伤程度 ,而且患者耐受性好 。

结核分枝杆菌抗原融合蛋白Ag85B-ESAT6和Rv2031c-Rv2626c重组腺病毒的构建及鉴定

目的构建表达结核分枝杆菌多阶段抗原融合蛋白Ag85B-ESAT6(AE)和Rv2031c-Rv2626c(R2)的重组腺病毒,为其用于结核病新型疫苗的研究奠定基础。方法体外合成人延长因子1α(EF1α)启动子DNA序列,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建含有CMV、EF1α双启动子的腺病毒穿梭载体。PCR扩增课题组前期构建的AE、R2融合蛋白基因,并依次亚克隆至上述腺病毒穿梭载体的CMV和EF1启动子下游,阳性重组穿梭质粒命名为pAd-AE-R2。将pAd-AE-R2与骨架质粒共转染HEK293细胞,包装获得重组腺病毒,命名为Ad-AE-R2。RT-PCR法和间接免疫荧光法(IFA)对重组腺病毒表达的AE、R2融合蛋白的基因和蛋白表达水平进行鉴定。结果Ad-AE-R2瞬时转染的HEK293细胞中可转录表达AE、R2融合蛋白基因。IFA法采用Ag85B、ESAT-6、Rv2626c和Rv2031c 4种抗原的单克隆抗体可分别检测到Ad-AE-R2感染的巨噬细胞中具有特异性的绿色荧光,表明Ad-AE-R2能够在宿主细胞内表达AE、R2融合蛋白。结论成功构建并包装获得表达结核分枝杆菌多阶段抗原融合蛋白AE、R2的重组腺病毒,为其用于结核病新型疫苗研究奠定基础。

门静脉血栓形成的机制及诊治研究进展

门静脉血栓形成（poaal vein thrombosis，PVT）是发生在门静脉系统。包括门静脉主干及分支、肠系膜上下静脉和脾静脉的深部血管阻塞性疾病。近年来随临床诊断技术的发展以及认识的深入，PVT检出率明显提高，同时在其机制研究和诊疗方面取得了一定的进展。现综述如下。

高速泳动族蛋白B1和自噬在急性肺损伤致病中的作用机制

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是危重患者病程中出现的一种危及生命的临床综合征。鉴定早期诊断ALI的新型生物标志物和寻找更有效的治疗方法是当前研究的热点。高速泳动族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)是一种与脓毒症、恶性肿瘤和免疫性疾病密切相关的晚期炎症介质。HMGB1水平表达可反映机体炎症和组织损伤的严重程度,提示其在ALI患者预后生物标志物的潜在作用,以及作为阻断机体炎症通路的潜在靶点。多项研究表明,HMGB1可调节自噬。自噬或称Ⅱ型程序性细胞死亡,是维持细胞内环境稳定的重要生物学过程。研究显示,HMGB1和自噬参与包括ALI在内的多种肺部疾病的致病过程,具体机制仍需进一步明确。本文系统阐述HMGB1和自噬在ALI致病中的作用。

脓毒性心肌功能障碍

脓毒症是由感染引起的全身炎症反应综合征,证实有感染灶存在或有高度可疑的感染灶。脓毒症是ICU内重症患者的主要死亡原因,且发病率随着年龄的增长而逐渐增加。近十年来,虽然政府在救治脓毒症患者中投入了巨大的资金和技术支持,但源于脓毒症或脓毒性休克患者的病死率仍高达30%-60%。心血管系统在脓毒症与脓毒性休克的病理生理学中扮演着重要着色。过去的四五十年,开展了很多脓毒性心肌功能障碍方面的研究,也积累了不少循证医学证据。然而,心脏只是心血管系统的一部分。诸如脓毒症患者机体血流动力学的变化系脓毒症对心脏的直接效应,还是脓毒症引起心脏前、后负荷及神经体液因素的变化,继而引起心脏继发改变的研究,至今仍在继续。本文概述了近年来脓毒性心肌功能障碍的研究进展,使读者更全面地了解脓毒性心肌功能障碍的病理生理学改变,合理有效地指导脓毒症和脓毒性休克患者的临床救治。

埃博拉出血热的临床表现

埃博拉出血热(Ebola hemorrhagic fever)是由埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)感染引起的致死率极高的急性病毒性传染病。2014年西非暴发的埃博拉出血热疫情的防控工作远未结束。由于采取了更为严密的个人防护及消毒隔离措施,医护人员可以近距离对患者的病情变化进行动态观察,对埃博拉出血热患者的临床观察研究也将不断深入。目前认为,EBOV侵入机体后。

急性肺损伤的生物标记物

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和急性肺损伤(ALI)多由低氧性呼吸衰竭引起,导致高通透性肺水肿,临床上有较高的发病率与死亡率。近十年来,针对血浆和支气管肺泡灌洗液中相关生物标记物的研究为探索急性肺损伤的病理生理机制指明了新的方向。个别生物标记物已在一些大型、多中心ARDS试验中得到证实。但迄今仍没有一个或一组生物标记物常规应用于临床。随着人类对ALI发病机制理解的进一步深入,或许不久的将来,生物标记物会真正应用于评估疾病的严重程度和预后。本文将概述近年来ALI相关生物标记物的研究进展。

高迁移率族蛋白B1在脓毒症和创伤后炎症反应中的作用

高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)是一种多功能核蛋白,从细胞中释放出来时,作为一种典型的预警蛋白或损伤相关分子模式(damage-associated molecular pattern,DAMP)分子发挥着多种功能。HMGB1多种功能的发挥主要依赖于其在细胞中的定位,包括细胞核、细胞质以及通过主动分泌或被动释放到细胞外。在脓毒症和创伤等多种应激和疾病过程中,HMGB1在细胞中的定位发生动态变化,这一过程受翻译后修饰的调控,发挥着不同的作用。现就HMGB1的不同定位和相应功能在脓毒症和创伤所致炎症反应中的作用作一概述。