促红细胞生成素在低氧预适应中的神经保护作用

促红细胞生成素(EPO)是体内一种重要的糖蛋白激素,主要由胎肝和成人的肾脏产生。EPO的表达除受到转录因子的调控之外,还受到表观遗传学的调控。研究发现,EPO及其受体(EPOR)在中枢神经系统中广泛表达,提示其对中枢系统具有神经保护作用。低氧预适应是机体抗缺氧或缺血的一种内源性保护机制,它可以促进EPO表达,减轻低氧/缺血引起的神经元损伤。EPO主要通过激活一系列信号转导通路及多种可能的机制发挥神经保护作用。

低氧预适应对小鼠海马神经元中TSC1表达的影响

目的:在体视显微镜下分割ICR小鼠海马CA1区和CA3区,研究结节性硬化症因子1(TSC1)在小鼠海马低氧中的神经保护作用。方法:ICR小鼠分为对照组(control)、低氧对照组(hypoxia)及低氧预适应组(HPC),在体视显微镜下观察海马形态并分割CA1区和CA3区;采用real time RT-PCR和Western Blot的方法分别检测小鼠海马组织TSC1 mRNA和蛋白的表达;采用免疫荧光检测小鼠海马组织TSC1荧光强度。结果:大脑冠状切片清晰显示出海马CA1区、CA3区和DG区;CA1区TSC1 mRNA在低氧组降低而在低氧预适应组增高;Western Blot和组织免疫荧光显示:与对照组相比,低氧预适应组CA1区TSC1表达增加;而CA3区TSC1在低氧组和低氧预适应组均增加。结论:TSC1的差异性表达可能提示TSC1可能参与了低氧预适应对低氧敏感的CA1区神经细胞的保护。

低氧预适应血管内皮细胞增加神经细胞低氧耐受

目的:研究经低氧预适应处理的血管内皮细胞分泌的物质对神经细胞低氧耐受的影响。方法:分别将人微血管内皮细胞(HMEC-1)经过低氧预适应(HPC)处理及正常培养,分离其培养基并通过滤膜过滤。人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)细胞分为低氧预适应组(HPC组)、培养基对照组(Medium-C组)和空白对照组(SY5Y-C组),三组细胞分别加入经HPC的HMEC-1细胞的培养基、正常培养HMEC-1细胞的培养基和正常培养SH-SY5Y细胞的培养基。随后三个组细胞均给予低氧处理。使用MTS法检测神经细胞活力,Western Blot检测caspase-3蛋白表达水平。结果:SY5Y-C组、Medium-C组和HPC组的细胞活力分别是(0.9967±0.0033)、(1.0751±0.0447)和(1.4737±0.0325),HPC组细胞活力显著增加(P<0.05);三个组caspase-3蛋白表达的相对丰度分别是(0.9950±0.0050)、(0.9893±0.0787)、(0.8180±0.0361),HPC组细胞的caspase-3蛋白表达显著受到抑制(P<0.05)。结论:内皮细胞在经过低氧预适应处理后分泌的物质可以增加神经细胞的低氧耐受。

BDNF及其受体Trk B在低氧预适应小鼠中的表达变化和作用

目的探究BDNF、TrkB受体及BDNF/TrkB信号通路在急性低氧与低氧预适应小鼠中的表达变化及作用,进一步完善低氧预适应神经保护的分子机制,为低氧预适应的临床应用提供理论依据。方法以ICR小鼠为对象,分别构建急性低氧与低氧预适应小鼠模型,模型构建完成0～4 d后,通过Western blot、real-time PCR技术,检测小鼠海马脑区BDNF、TrkB受体在早期相和晚期相的表达及BDNF/TrkB信号通路活性的变化。结果研究发现随着小鼠低氧次数的增加,耐受时间明显增加(P<0. 05);较对照组,急性低氧和低氧预适应组BDNF及全长型TrkB受体表达有增加的趋势,在低氧预适应早期相BDNF蛋白水平表达显著增加(P<0. 05)。较对照组,截短型TrkB受体表达则有降低的趋势,在低氧预适应中、晚期相其mRNA表达显著降低(P<0. 05);较对照组,急性低氧组BDNF/TrkB信号通路活性被抑制,而低氧预适应组BDNF/TrkB信号通路活性有增加的趋势,且在晚期相差异有显著性(P<0. 05)。结论低氧预适应可能是通过上调BDNF表达并增加其与TrkB受体的结合,以及下调截短型TrkB受体表达,减少异二聚体形成,从而共同激活BDNF/TrkB信号通路,最终对小鼠产生神经保护作用。

低氧预适应下DNA甲基化调控BDNF和TrkB受体的研究进展

低氧预适应(hypoxic preconditioning,HPC)是指机体在经历一次或多次短暂、非致死性低氧刺激后,获得的对更严重甚至致死性低氧/缺血刺激的耐受性,被认为是机体抗低氧/缺血的一种内源性保护现象[1]。虽然HPC可以明显减轻组织、器官尤其是神经系统的低氧/缺血损伤并产生保护作用[2-3],但其分子机制还不甚清楚。

低氧预适应下BDNF/TrkB和cAMP/PKA信号通路调控电压依赖性钙离子通道的研究进展

本文探析了低氧预适应对神经系统的保护作用尤其是改善学习记忆能力的相关机制,回顾了电压依赖性钙离子通道在神经系统中的作用以及与学习记忆之间的关系。重点总结了低氧预适应诱导下电压依赖性钙离子通道特性的变化情况,并深入归纳了BDNF/TrkB和cAMP/PKA信号通路对电压依赖性钙离子通道的调节机制以及低氧预适应与这些信号通路之间的关系。通过总结低氧预适应调控BDNF/TrkB和cAMP/PKA信号通路影响电压依赖性钙离子通道相关的最新研究进展,为将来阐明低氧预适应提升认知能力的可能机制奠定理论基础。

低氧适应对中枢神经系统损伤后运动功能恢复的作用

中枢神经系统损伤通常会导致明显的运动功能障碍,需要探索安全有效的手段,发展形式多样的康复治疗方案,以获得更佳的治疗效果。低氧适应对神经修复有重要作用,是一种潜在的康复手段,有研究发现其可通过神经再生及成熟、血管新生和神经网络重建,在神经系统损伤后促进运动功能恢复。该文从低氧适应促进运动功能恢复的机制、方案和效果等方面进行综述,探索其应用的适应证、方法和有效性。

低氧适应防治心脑疾病的研究进展

低氧适应是指在一定时间内1次或多次暴露于短暂、非致死性的低氧环境后,机体的内源性保护机制被激发,从而产生显著的预防及治疗效果,根据其应用的时机,分为预适应和后适应。心脑血管疾病是我国成人第一位致残、致死性疾病,大量研究表明,低氧适应通过对多种信号通路分子的调节,起到对心脏和脑的保护作用。此外,低氧适应对线粒体疾病脑损伤也有保护作用。本文综述了低氧适应对高血压、血脂异常以及糖尿病等心脑血管疾病危险因素的影响。低氧适应安全、无创且易操作,若能实现临床转化,可为缺血缺氧性疾病的防治提供新的选择。

肢体远隔缺血期适应联合后适应促进大鼠缺血性脑卒中模型神经发生的作用及机制

目的探讨肢体远隔缺血期适应(per-conditioning,PerC)联合后适应(post-conditioning,PostC)对缺血性脑卒中后神经再生的作用,并明确PerC联合PostC对脂肪酸β-氧化(fatty acidβ-oxidation,FAO)限速酶——肉毒碱棕榈酰转移酶(carnitine palmitoyl transferase 1A,CPT1A)的影响。方法对成年雄性SD大鼠进行大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)造模,MCAO模型后30 min进行肢体远隔缺血期适应治疗(PerC),再灌注24 h后重复进行肢体远隔缺血适应(PostC),1次/d,直到取材。再灌注14 d后对大鼠进行神经功能评分,通过免疫组织化学染色检测室管膜下区(subependymal ventricular zone,SVZ)神经再生情况,通过酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测CPT1A的表达。结果与MCAO组及PerC/PostC组比较,PerC+PostC组大鼠,身体不对称运动行为评分降低,神经干细胞的数量以及向梗死区迁移的细胞数量增加。Pearson相关性分析显示,神经干细胞的数量与神经功能呈负相关(r=-0.9179,P<0.0001)。然而,迁移到基底节区的神经干细胞的凋亡数量在各组之间差异无统计学意义。机制研究显示,PerC+PostC组CPT1A的蛋白水平显著增加。结论PerC联合PostC治疗能够通过增加神经干细胞的数量改善神经功能,神经干细胞的脂肪酸氧化可能是其促进神经干细胞迁移的机制之一。

低氧预适应及5-Aza-cdR处理对小鼠海马Notch1表达的影响

目的:观察Notch1在低氧预适应及DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-cdR注射小鼠海马中的表达变化,探究Notch1在低氧耐受神经保护作用中的可能机制。方法:ICR小鼠通过侧脑室注射5-Aza-cdR及建立低氧预适应模型,通过Western-blot、qRT-PCR及免疫荧光技术,检测小鼠海马Notch1以及DG区神经细胞增殖情况。结果:与未注射5-Aza-cdR组相比,5-Aza-cdR组中Notch1 mRNA表达明显升高(P<0.05);在未注射5-Aza-cdR组中,HPC组较对照组的Notch1的mRNA表达升高(P<0.05),5-Aza-cdR组中5-HPC组较5-C组的Nothc1 mRNA表达升高(P<0.05);相比未注射5-Aza-cdR组,注射5-Aza-cdR各组中Notch1蛋白表达升高(P<0.05),未注射5-Aza-cdR组中HPC组较C组的Notch1蛋白表达升高(P<0.05),5-Aza-cdR组中5-HPC组较5-C组的Notch1蛋白表达增加(P<0.05);相比未注射5-Aza-cdR组,5-Aza-cdR组中海马DG区BrdU阳性细胞数量增多。结论:5-Aza-cdR可以激活Notch1表达,并使海马DG区内神经细胞增殖。

Hamartin在低氧/缺血耐受中的作用

低氧/缺血是临床上常见的基本病理过程和基本死因,同时也是高原、航天、潜水等极端环境所面临的基本问题。作为细胞内源性保护分子,hamartin能够提高细胞在急性低氧/缺血时的耐受性,具有重要的研究意义。Hamartin在低氧/缺血中的作用已成为研究热点,阐明其在低氧/缺血中的保护作用及其DNA甲基化对低氧/缺血的影响,不仅有利于减轻低氧/缺血的损伤,还可以进一步探讨hamartin及其DNA甲基化在其他病理生理中的作用,为后续的临床研究提供理论指导。本文对hamartin的结构、信号传导机制以及在低氧/缺血中的研究进行综述。

低氧对BDNF和TrkB受体及其信号通路影响的研究进展

探析了急性低氧损伤与适度低氧或低氧预适应(HPC)神经保护作用的相关机制及其涉及的信号通路研究进展,回顾了脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)及BDNF/TrkB信号通路在神经生理及神经病理过程中的作用,并对急性低氧与低氧预适应分别影响BDNF、TrkB受体的表达和BDNF/TrkB信号通路的相关途径与机制进行了归纳。通过总结了解到低氧具有双重作用,既有严重缺氧导致损伤,又有适度低氧或低氧预适应对机体有益的保护作用,阐明其调节机制具有一定的参考价值。

低氧对脑N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基2B的表达影响

N-甲基-D天冬氨酸（N—methyl-D-aspartate，NMDA）受体广泛存在于神经细胞的突触后膜上，有较高的钙离子通透性，是与学习记忆及精神性疾病密切相关的一类谷氨酸门控离子通道受体。该受体是由7种类型的亚基NR1，NR2A-D，NR3A、B组成的四聚体或五聚体，其中NR1与NR2、NR3之间不具有明显的同源关系。

透明细胞肾细胞癌的表观遗传学研究进展

肾脏肿瘤的发病率在人类泌尿系统肿瘤中排名第3，约占恶性肿瘤的3%，发病年龄主要在50~70岁，每年导致90000多例患者死亡，且呈递增趋势［1］。肾癌的具体发病机制不详，除遗传因素外，吸烟、肥胖、污染和辐射等也是重要因素。大多数透明细胞肾细胞癌（clearcellrenalcellcarcinoma，ccRCC）患者在早期无任何症状，20%~30%患者在诊断时已发展或转移［2］，故预后较差；患者出现诸如血尿和腰痛等典型症状时，已失去最佳的治疗机会。目前，ccRCC发生机理和机制尚未完全清楚。近年来对ccRCC病因及发病机制的深入研究发现，许多表观遗传学的改变，尤其是DNA甲基化（DNAmethylation）异常、组蛋白修饰及非编码RNA调节可能是ccRCC发生发展的重要分子机制，主要涉及DNA、蛋白质和RNA等水平调控基因的表达。这些都为ccRCC的病因研究及诊断、治疗和预后提供了新的理念与途径。

当归芍药散活血利水不同配伍对缺血性脑卒中小鼠神经再生的影响

目的:观察当归芍药散(DSS)活血利水不同配伍对缺血性脑卒中雄性小鼠神经再生的影响,并探讨其对神经再生相关因子—脑源性神经营养因子(BDNF)及趋化因子受体4(CXCR4)的影响。方法:成年C57雄性小鼠,制造大脑中动脉远端梗阻模型(dMCAO模型),随机分为7组,对小鼠进行神经功能评分;通过免疫组化检测SVZ区神经再生,通过Western blot检测对相关指标的影响。结果:与对照组及原方配伍组相比,活血倍量组显著改善了神经功能(P<0.05),增加了DCX阳性细胞数及DCX/BrdU双阳性细胞数。进一步分子机制研究发现,活血倍量配伍显著增加了神经再生相关因子—成熟型BDNF成熟片段的水平及CXCR4的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:DSS的活血倍量配伍对缺血性脑损伤小鼠神经再生的贡献度最大。

氧气的适应性机制及低氧预适应研究进展

氧气是有氧代谢和能量产生的必要条件,对于大多数生物来说都是必不可少的。过多或过少的氧气都可能危害生命,因此研究生物快速响应变化的氧气水平的机制至关重要。当氧气需求超过氧气供应时,细胞就会变得低氧。介绍了氧气的特性以及生理、病理条件下低氧的适应机制,论述了低氧作为的积极方面——低氧预适应的历史和研究进展,展望了低氧预适应在高空、高原等极端环境中以及在卒中等相关临床疾病中的治疗前景。

透明细胞肾细胞癌组织中DNMT3B异构体表达及其整体甲基化的分析

目的检测透明细胞肾细胞癌组织中DNA甲基转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)异构体表达及其整体甲基化的变化,探讨这些变化与透明细胞肾细胞癌的关系。方法选取15例透明细胞肾细胞癌及其癌旁组织,应用Real-time PCR技术检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3B与DNMT3B六种主要异构体的mRNA表达,应用Western blot法检验DNMT3B4蛋白表达;应用联合亚硫酸氢钠的限制性内切酶分析法(COBRA)分析重复序列Alu和LINE-1的甲基化水平。结果透明细胞肾细胞癌组织中DNMT3B4 mRNA和蛋白表达水平比癌旁组织高;重复序列Alu和LINE-1的甲基化水平在透明细胞肾细胞癌组织中比癌旁组织低。结论 DNMT3B4表达增加可能与整体甲基化降低及透明细胞肾细胞癌的发生有密切关系。

DNA甲基转移酶3B异构体研究进展

DNA甲基化是表观遗传修饰的重要组成部分,它是在DNA甲基转移酶(DNMTs)的作用下将甲基加到二核苷酸CpG岛中胞嘧啶的第五位碳原子上。DNMT3B是真核生物细胞中一种非常重要的转移酶,有近40种异构体,本文主要对DNMT3B的异构体的构成、表达及在疾病中的作用等进行综述。

急性缺血性卒中取栓治疗延误的影响因素分析

目的探讨急性缺血性卒中大动脉闭塞患者机械取栓治疗院内延误的影响因素。方法前瞻性连续纳入2018年6月至2019年7月首都医科大学宣武医院急诊收治,经临床头部CT或MRI检查确诊为急性缺血性卒中大动脉闭塞且无脑出血症状患者182例,患者全部接受机械取栓治疗(包括桥接治疗或直接取栓治疗)。根据患者到达医院至股动脉置鞘成功时间(DTP),分为延误组(DTP>90 min)和非延误组(DTP≤90 min)。记录两组患者基线资料(如性别、年龄、血管危险因素、吸烟史、饮酒史、既往卒中史、手术史等)及临床资料[如发病时间、入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、静脉溶栓、多模影像检查等]以及急诊取栓流程时间(如发病至入院时间、入院至CT检查时间、入院至获得影像结果时间、获得影像结果至获取知情同意时间、入院至开始静脉溶栓时间、获得知情同意至入导管室时间、入院至股动脉置鞘成功时间等)并进行组间单因素分析,采用多因素Logistics回归分析方法分析机械取栓院内延误的影响因素。结果182例患者中,延误组患者133例,非延误组患者49例。(1)延误组多模影像检查患者比例明显高于非延误组[82.7%(110/133)比53.1%(26/49)],差异有统计学意义(χ2=16.663,P<0.01)。(2)延误组入院至获得检查报告时间[43(25,62)min比27(20,39)min,Z=-3.914,P<0.01]、获得检查结果至获取知情同意时间[25(13,45)min比10(5,24)min,Z=-5.204,P<0.01]、获取知情同意至入导管室时间[32(20,50)min比24(17,30)min,Z=-3.453,P=0.001]、入院至开始静脉溶栓治疗时间[(24±7)min比(19±9)min,t=2.251,P=0.029]、入院至股动脉置鞘成功时间[(140±60)min比(75±12)min,t=11.728,P<0.01]均多于非延误组。(3)多因素Logistic回归分析结果显示,入院至获得检查报告时间(OR=1.280,95%CI:1.135~1.442,P<0.01)、获得检查结果至获取知情同意时间(OR=1.310,95%CI:1.159~1.480,P<0.01)、获取知情同意至入导管室时间(OR=1.264,95%CI:1.113~1.436,P<0.01)、入院至开始静脉溶栓治疗时间(OR=1.360,95%CI:1.132~1.634,P<0.01)是机械取栓院内延误的影响因素。结论急性缺血性卒中机械取栓治疗流程院内延误受入院至获得检查报告时间、获得检查结果至获取知情同意时间、获取知情同意至入导管室时间、入院至开始静脉溶栓治疗时间影响,治疗流程急需优化。

缺血性卒中后的神经可塑性改变及其药理学调控因子研究进展

有研究报道,卒中发病率为0.24%~0.60%,年病死率近20%,缺血性卒中占脑血管病的60%~80%。静脉应用组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）进行溶栓治疗是提高急性缺血性卒中患者疗效的最有效方法。