多因子联合诱导脂肪组织源性干细胞分化为神经元样细胞

背景:国内均可见有探讨脂肪干细胞向神经元诱导分化的相关研究报道,但运用差速贴壁法纯化脂肪组织源性干细胞,多因子联合诱导脂肪组织源性干细胞分化为神经元样细胞的研究鲜有报道。目的:观察多因子联合诱导和分步诱导方案诱导大鼠脂肪组织源性干细胞体外分化为神经元样细胞的可行性。方法:取SD雄性大鼠腹股沟和附睾脂肪垫脂肪组织,酶消化法分离、差速贴壁法纯化脂肪组织源性干细胞。免疫荧光细胞化学法鉴定脂肪组织源性干细胞(CD44,CD49d,CD106);"鸡尾酒"式神经元诱导培养基对脂肪组织源性干细胞进行诱导分化,并用免疫荧光细胞化学法鉴定(Nestin和NeuN)分化结果。结果与结论:大鼠腹股沟和附睾脂肪垫脂肪组织内分离、原代培养的脂肪组织源性干细胞形态均一,呈长梭形,细胞核椭圆形,核仁明显,细胞质染色浅,呈旋涡状克隆样生长;CD44和CD49d阳性表达而CD106阴性;诱导培养基内培养6h后脂肪组织源性干细胞呈锥体形或不规则,有短而细的指状突起;24h后多数细胞显示类神经元的形态学特征,且Nestin和NeuN阳性。提示肪组织源性干细胞在多因子"鸡尾酒"式培养基内可向神经元方向分化。

选择性臂丛损伤后脊髓降钙素基因相关肽mRNA的表达

目的探讨选择性臂丛损伤后脊髓前角、后角降钙素基因相关肽（CGRP）表达变化对脊髓运动神经元轴索再生的影响。方法 29只SD大鼠随机分为4组：撕脱组（A组,n=8）,撕脱＋切断组（B组,n=8）和撕脱＋半横断组（C组,n=8）和对照组（n=5）。术后2周取脊髓第7颈节的前角和后角,用SYBRGreen荧光定量RT-PCR方法检测脊髓前角、后角中CGRPmRNA的表达。结果对照组脊髓前、后角CGRPmRNA呈低表达,前角表达略高于后角。A、B、C三组前角CGRPmRNA表达上调,C组上调幅度最显著,A、B、C三组后角CGRPmRNA表达均下调。结论脊髓CGRP表达改变是臂丛损伤再生中的特异性蛋白的重组反应,尤其是前角CGRP高表达对运动神经元轴突再生可能具有重要作用。脊髓前、后角的CGRP的功能可能不同。