经方治疗重大疾病作用机理与疗效评价科研创新团队

经方治疗重大疾病作用机理与疗效评价科研创新团队以刘持年全国名老中医药专家传承工作室、山东省重点研发计划(产业关键技术)等科研项目为依托,以周凤梧经典名方学术流派传承团队为核心,集方剂学、中医内科学、康复医学、生物工程等多学科人才组建而成(图1)。团队长期致力于方剂临床应用与疗效客观化研究、方剂作用机理与药效物质基础研究,先后承担了国家重大新药创制重大专项、国家科技部“十一五”支撑计划重点项目课题。

芎麻汤有效部位防治肝阳上亢兼瘀血型偏头痛的作用机制

目的探究芎麻汤有效部位防治肝阳上亢兼瘀血型偏头痛的作用机制。方法70只雄性SD大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、阳性对照组(盐酸氟桂利嗪胶囊0.9 mg/kg)及芎麻汤有效部位低、高剂量组(乙酸乙酯提取物0.87、3.46 g/kg,正丁醇提取物1.80、7.20 g/kg)。除正常组外,其余各组大鼠灌胃附子汤(2 g/kg),每天1次,连续4周,复制肝阳上亢证模型;造模第15天,各给药组同时灌胃相应药物,每天1次,连续2周;造模第29天,电刺激大鼠三叉神经节复制肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型后,按前述方法再维持给药1次。观察大鼠宏观体征及行为表现;取大鼠三叉神经颈髓复合体(TCC),分别采用免疫组织化学法、RT-qPCR法、Western blot法检测瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、降钙素受体样受体(CRLR)、活性修饰蛋白受体1(RAMP1)的阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量。结果模型组大鼠出现肝阳上亢兼瘀血型偏头痛相关的宏观体征及行为表现。末次给药30 min后,芎麻汤有效部位各组大鼠以上情况均明显改善。与正常组相比,模型组大鼠TCC内TRPV1、CGRP、CRLR、RAMP1阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,芎麻汤有效部位各组大鼠TCC内上述指标大部分显著降低(P<0.05)。结论芎麻汤防治肝阳上亢兼瘀血型偏头痛的作用机制可能与抑制TCC内TRPV1-CGRP/CGRP受体信号通路的活性有关。

UHPLC-QTOF-MS联合网络药理学及分子对接探讨青阳参总苷治疗社会挫败的物质基础及作用机制

目的运用UHPLC-QTOF-MS和网络药理学-分子对接技术,探讨青阳参总苷治疗社会挫败的物质基础和潜在的作用机制。方法首先,采用UHPLC-QTOF-MS鉴定青阳参总苷化学成分。其次,运用Pubchem下载青阳参总苷化学成分2D结构后,利用Swiss Target Prediction数据库预测其靶点;从TTD、GeneCards、CTD数据库获取社会挫败相关治疗靶点;通过Venny平台获取两者的交集靶点;采用Cytoscape构建“药物-活性成分-靶点-疾病”网络;运用String数据库构建蛋白互作(PPI)网络后,结合Cytoscape分析得交集靶点排名;使用DAVID数据库对交集靶点进行基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。利用AutoDock vina软件进行分子对接验证。最后,构建社会挫败小鼠模型,采用ELISA法检测小鼠血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)含量,HE染色观察小鼠海马组织神经细胞病理变化。结果从青阳参总苷共鉴定152个化学成分。预测及筛选得到丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、单胺氧化酶A(MAOA)、多巴胺受体D3(DRD3)等26个青阳参总苷治疗社会挫败潜在作用靶点,对应85个青阳参总苷活性成分;富集分析得到45个GO注释条目(P<0.01)、11条KEGG信号通路。分子对接发现青阳参苷元、白桦脂酸、绿原酸等20个活性成分与AKT1、DRD4、DRD2、DRD3等10个核心靶蛋白均可自发结合。动物实验表明,与正常对照组相比,模型对照组小鼠血清中5-HT、DA含量均明显降低(P<0.05);小鼠海马组织神经细胞排列疏松,有明显的细胞丢失。与模型对照组相比,青阳参总苷各剂量组小鼠血清中5-HT、DA含量均显著升高(P<0.05,P<0.01);青阳参总苷中、高剂量组小鼠海马组织神经细胞间隙减小,且排列较为整齐。结论青阳参总苷对社会挫败具有治疗作用。主要药效物质为青阳参苷元、白桦脂酸、绿原酸等,可通过多靶点、多通路发挥抗社会挫败作用。

广西天然沸石在畜牧养殖业中的应用试验

进行了不同动物的多次饲养试验，研究广西天然沸石在畜牧养殖业中的应用效果及其某些作用机理。结果表明，生长肥育猪、产蛋鸡、肉鸡和肉鸭实用饲粮中添加 3％～ 5％的沸石粉，饲用安全，无毒无害；在一定程度上可增进动物机体健康，调节动物生理机能，促进养分消化吸收和利用，改善动物饲养环境，提高动物生产性能，减少饲料消耗，节省常规饲料原料，降低饲养成本。

基于“病证结合”建立的肝阳上亢兼瘀血型偏头痛大鼠模型研究

目的利用附子汤灌胃与电刺激三叉神经节构建肝阳上亢兼瘀血型偏头痛大鼠模型,探讨该模型的特征。方法30只SD大鼠分为正常组、模型组、正天丸组(1.6 g·kg^(-1)),每组10只。模型组、正天丸组大鼠灌胃附子汤(2.00 g·kg^(-1)),每天1次,连续28天,建立肝阳上亢证;附子汤灌胃第15天,正天丸组大鼠同时给予正天丸药液,每天1次,共14天;第29天时,电刺激大鼠三叉神经节建立肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型。末次给药30 min后,观察大鼠宏观体征和行为表现,血液粘度仪检测血液流变学;免疫组化、RT-qPCR、Western blot法检测大鼠三叉神经颈髓复合体(TCC)中P物质(SP)阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量。结果与正常组相比,模型组具有双目红赤,易怒,同笼打斗,舌质暗或有瘀点等宏观体征;出现有规律地摆头、频繁理毛等行为变化;中央区路程增加(P<0.05);全血高切相对粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均明显升高(P<0.05),红细胞变型指数明显降低(P<0.05);TCC中SP阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05)。与模型组相比,正天丸组大鼠宏观体征及行为变化明显改善;中央区路程明显减少(P<0.05);全血高切相对粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数明显降低(P<0.05),红细胞变型指数明显升高(P<0.05);TCC中SP阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论SD大鼠附子汤灌胃4周结合电刺激三叉神经节可构建与临床表现基本相符的肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型。

花榈木的化学成分及药理作用研究进展

花榈木(Ormosia henryi Prain)是一味民间常用药材,其根及根皮、茎、叶皆可入药,常用于跌打损伤,产后瘀血腹痛等。现代药理研究发现,花榈木主要含黄酮类、生物碱类及挥发性成分等,具有抗抑郁、镇静、抗氧化、抗癌等作用。由于花榈木属于国家二级保护树种,其种植技术、病虫防治等方面研究多受关注,而其药用价值方面研究相对较少。为此,本文将对花榈木入药部位的化学成分及药理作用进行综述,为花榈木药用价值的开发及临床应用奠定理论基础。

UHPLC-QTOF-MS联合网络药理学-分子对接及动物实验探讨芎麻汤有效部位治疗偏头痛的作用机制

目的:运用UHPLC-QTOF-MS、网络药理学-分子对接技术及动物实验探讨芎麻汤有效部位治疗偏头痛的物质基础和作用机制。方法:采用UHPLC-QTOF-MS技术测定芎麻汤有效部位化学成分,并运用PubChem、Swiss Target Prediction数据库预测其靶点;从GeneCards数据库获取偏头痛相关靶点;通过Venny平台筛选交集靶点,Cytoscape构建“药物-活性成分-靶点-疾病”网络;运用String数据库构建蛋白互作网络后,结合Cytoscape筛选核心靶点;使用DAVID数据库对交集靶点进行GO功能、KEGG通路富集分析。利用AutoDock vina软件进行分子对接验证。观察偏头痛大鼠血清CGRP、NO含量及三叉神经髓鞘结构。结果:从芎麻汤有效部位中共鉴定107个化学成分,主要包含有机酸类、糖苷类、黄酮类等。得到TNF、AKT1、IL-1β等304个交集靶点,对应阿魏酸、天麻素、洋川芎内酯A等80个活性成分;315个GO注释条目、78条KEGG信号通路(P<0.01)。分子对接发现活性成分与核心靶点及CGRP、TRPV1均自发结合。动物实验表明芎麻汤有效部位可明显降低偏头痛大鼠血清CGRP、NO含量;三叉神经可见神经纤维,致密的髓鞘板层,胞质中线粒体呈大小不一的形态。结论:芎麻汤有效部位含有的阿魏酸、天麻素、洋川芎内酯A等药效物质,可通过影响神经信号传递通路、钙信号通路、cAMP信号通路等调节外周血CGRP、NO水平,治疗偏头痛。