茶黄素通过抑制细胞过度自噬减轻新生大鼠缺氧缺血性脑损伤

目的基于沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/叉头盒蛋白O1(FoxO1)信号通路探讨茶黄素(Theaflavins,TFs)在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的作用及机制。方法将7日龄Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(HIBD组)、茶黄素组(TFs+HIBD组)、SIRT1抑制剂组(TFs+HIBD+Ex-527组),每组40只。假手术组仅游离右侧颈总动脉,不进行缺血缺氧处理;模型组采用改良Rice-Vannucci法,游离并结扎右侧颈总动脉后缺氧制成HIBD模型;茶黄素组和SIRT1抑制剂组在建立HIBD模型前,给予茶黄素灌胃,SIRT1抑制剂组给予Ex-527侧脑室注射。各组于术后6,12,24,48,72 h对新生大鼠进行Longa评分、一般状态、行为学检测及脑组织称重;苏木素-伊红染色(HE)染色观察脑组织病理学改变;蛋白质印迹法(Western blotting)检测SIRT1、FoxO1、Ac-FoxO1、Beclin1、LC3-Ⅱ/Ⅰ在蛋白质水平的表达。结果与sham组比较,HIBD组新生大鼠精神不振,神经功能缺损评分显著升高(P<0.05),体质量增长迟缓(P<0.01),翻正反射时间明显延长(P<0.05),右侧脑组织质量增大(P<0.05),HE染色可见大脑皮层区神经元数目减少,SIRT1、FoxO1蛋白表达明显降低(P<0.01),Ac-FoxO1及自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ的表达量升高(P<0.01)。与HIBD组比较,TFs+HIBD组新生大鼠精神状态好转,神经功能缺损评分下降(P<0.05),体质量增长较快(P<0.01),翻正反射时间缩短(P<0.05),右侧脑组织质量减轻(P<0.05),HE染色可见脑组织神经元数目增多,SIRT1、FoxO1蛋白表达升高(P<0.01),Ac-FoxO1及自噬相关蛋白的表达量降低(P<0.01)。与TFs+HIBD组比较,TFs+HIBD+Ex-527组新生大鼠神经功能缺损评分升高(P<0.05),体质量增长迟缓(P<0.01),翻正反射时间延长(P<0.05),右侧脑组织质量增大(P<0.05),HE染色可见脑组织神经元细胞减少,SIRT1、FoxO1蛋白表达降低(P<0.01),Ac-FoxO1及自噬相关蛋白的表达量升高(P<0.01)。结论TFs可通过激活SIRT1/FoxO1信号转导通路抑制HIBD引起的过度细胞自噬,从而减轻神经元细胞的损伤。

灵芝孢子粉干预对癫痫大鼠脑组织病理改变、Cu^(2+)、Zn^(2+)变化的影响

目的探讨灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑组织病理变化、Cu2+、Zn2+含量的影响。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和用药组。癫痫模型建成后用常规HE染色检测脑组织病理变化,原子吸收分光光度计检测脑组织Cu2+、Zn2+含量。结果模型组神经细胞有不同程度的变性、坏死,胞核固缩、深染、水肿;脑组织Cu2+含量明显降低,而Zn2+含量却明显升高(P<0.05)。结论灵芝孢子粉能减轻神经细胞的变性、坏死,调节微量元素含量,发挥了其保护神经元的作用。

松花江佳木斯江段氨氮污染状况分析

1991－1995年对松花江佳木斯江段各断面及不同水期氨氮含量进行连续监测．结果表明：氨氮含量均超过国家地面水氨氮含量标准。

不同温度及时间对保存血液有效期和质量的影响

目的 :研究不同温度对血液液状保存时保存损伤机制的影响 ,并探讨相应的防范措施。方法 :取 10名健康献血员静脉血 ,混合于CP2D A保存液中 ,均分为 2组 ,分别保存于 0℃和 4℃环境条件下 ,分别于设定的时间 (第2 1d和第 4 2d)以shafiq UR rehman法检测膜磷脂 ,同步法检测Na+ K+ ATP酶、纯化PDE法检测CaM、分光光度法检测LPO等指标。结果 :固定温度条件下随时间的延长血液过氧化反应增强 ,保存损伤作用增加 ;同一时期内保存损伤作用随温度的降低而减轻 ,以 4℃组血液老化明显。结论 :血液保存损伤作用随保存期的延长而增强 ,随保存温度的降低而改善 ,并指出血液液状保存所存在的问题与展望。

不同温度及时间对液状保存血液质量的影响

目的 :研究不同温度对血液液状保存时保存损害机制的影响 ,并探讨相应的防范措施。方法 :取 10名健康献血员静脉血 ,置于CP2D A保存液中 ,于 0℃和 4℃环境条件下 ,分别于设定的时间 (第 1周末、第 3周和第 6周末 )内取样检测GSH Px、LPO、TSH、红细胞膜收缩蛋白、膜脂流动性等指标。结果 :固定温度条件下随时间的延长血液过氧化反应增强 ,保存损害作用增加 ;同一时期内保存损害作用随温度的降低而减轻 ,以 4℃组血液老化明显。结论 :血液过氧化反应随保存期的延长而增加 ,随保存温度的降低而改善 ,0℃组保存血液的质量优于 4℃组。

阴道微生态亚失调状态的研究

目的 :提出阴道微生态亚失调状态的概念及其特征与机制。方法 :选取门诊及妇女健康普查患者 2 0 9例。健康妇女 10 2例为对照组 ;以临床主治外阴不适或偶有瘙痒 ,阴道分泌物增多 ,分泌物检查排除特异性微生物感染及细菌性阴道炎、严重宫颈炎的患者 10 7例为观察组 ;取阴道分泌物经倍比稀释接种于各培养基上进行需氧及厌氧培养 ,鉴定并检测微生物种类 ,活菌计数 ,检测菌种为乳酸杆菌、白色念珠菌、类杆菌、大肠埃希菌、链球菌 ,并同时测定阴道 p H值及清洁度。结果 :p H值无显著变化 (P>0 .0 5 ) ,清洁度观察组变化明显 ( °～ °) ;各菌种活菌计数观察组与对照组相比变化显著 (P>0 .0 5 )。结论 :阴道微生境在内外因素作用下存在一种过渡状态 ,该状态呈可逆性 ,在机体抵抗力增加或 /和去掉诱因后可自然恢复 ,如进一步发展可导致特异性或非特异性阴道炎、宫颈炎。作者由此提出“阴道微生态亚失调状态”概念。

灵芝孢子粉对戊四氮慢性点燃大鼠学习记忆及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的观察灵芝孢子粉对戊四氮点燃大鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝孢子粉对神经细胞保护的作用机制。方法将60只成年SD大鼠随机分为空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉用药高、中、低剂量组共5组。癫痫模型组和灵芝孢子粉用药各组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTA35 mg.kg-1.d-1,直至达到点燃标准。点燃后,用药组以灵芝孢子粉灌胃。采用Morris水迷宫测试大鼠空间记忆能力,制备海马10%组织匀浆,化学比色法检测其ChAT、AChE的活性。结果水迷宫逃避潜伏期,模型组明显高于用药高剂量组和对照组(均P<0.01);跨过原平台次数,模型组明显少于用药高剂量组(P<0.05)和对照组(P<0.01);与模型组相比,用药中、高剂量组呈剂量依赖性显著抑制海马AChE的活性、增强ChAT的活性(均为P<0.05)。结论灵芝孢子粉可通过抑制功能脑区AChE活性、增加ChAT的活性,以增强中枢胆碱能神经系统的功能,改善癫痫大鼠认知能力,从而对脑组织起保护作用。

柠檬百里香叶挥发油成分分析及对肝癌细胞毒性作用

目的:分析柠檬百里香叶挥发油的主要化学成分并研究其对肝癌细胞的毒性作用。方法:采用水蒸气蒸馏法从柠檬百里香叶中提取挥发油,利用GC-MS对其化学成分进行分析。共鉴定出其中32个组分,占总出峰面积的95.44%,主要成分有冰片(28.82%)、百里香酚(14.43%)、3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇(8.26%)、1-甲基-4-(α-羟基-异丙基)环己烯(8.23%)、樟脑萜(5.1%)等。MTT法检测其对肝癌HepG2细胞的毒性作用,激光共聚焦检测对NF-κβ65表达的影响。结果:挥发油抑制肝癌HepG2细胞生长的的IC50值为0.34%浓度;NF-κβ65表达的平均荧光强度为:对照组为323.25,2-10浓度精油组为84.18,2-11浓度挥发油组为197.93,2-12浓度挥发油组261.43。结论:柠檬百里香叶挥发油对HepG2细胞有很强毒性作用,其诱导细胞凋亡机制可能与NF-κβ65表达有关。

红景天苷对糖尿病并发骨质疏松大鼠瘦素表达的影响

目的:观察探讨红景天苷(SDS)对糖尿病并发骨质疏松大鼠瘦素表达的影响。方法:将60只雌性SD大鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、SDS低剂量组(C组,18 mg.kg-1.d-1)、SDS高剂量组(D组,36 mg.kg-1.d-1),相应干预后,于11、16周末断颈取血,测血糖、胰岛素(INS)、瘦素(LP)浓度,取下丘脑测神经肽Y(NPY)含量,取胫骨测骨密度(BMD)。结果:C、D组与B组相比,血糖明显下降(P<0.05),血清INS、LP浓度及胫骨BMD水平明显升高(P<0.05),下丘脑NPY含量明显下降(P<0.01);16周末与11周末相比,C组下丘脑NPY含量变化不明显(P>0.05);D组下丘脑组织NPY含量及胫骨BMD水平明显升高(P<0.01)。结论:SDS可能通过促进INS分泌和提高INS敏感性,来加强血浆LP对骨代谢的外周正性作用;长期大量应用还可能通过作用于血脑屏障而抑制LP对骨代谢的中枢负性影响,从而对糖尿病骨质疏松症起治疗作用。

心衰患者TNF-α、生长激素与下丘脑-垂体-甲状腺轴的相关性

目的:研究充血性心衰(CHF)患者肿瘤坏死因子、生长激索与下丘脑-垂体-甲状腺轴(HHTA)的关系。方法:应用放免法测定28例CHF患者及14例健康人的血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),生长激素(GH)及甲状腺激素的含量。后者包括三碘甲状腺原氨酸(T3),四碘甲状腺原氨酸(T4),游离T3(FT3).游离T4(FT4)及反T3(rT3)。还测定了促甲状腺激素(TSH),促甲状腺激素释放激素(TRH)的含量。结果:①CHF患者血清TNF-α,GH,T3,FT3,FT4,rT3浓度与对照组相比发生显著性变化,而TSH、TRH无显著变化;②血清TNF-α与FT3呈显著负相关(r=-0.54.P<0.05);③血清GH与HHTA系统呈显著负相关(r=-0.57)。结论:①在CHF患者,HHTA系统调节失衡;②TNF-α,GH与HHTA系统间相互影响,可能加速心功能恶化。

参附注射液对脑缺血再灌注大鼠bcl-2、p53表达的影响

目的研究参附注射液(SFI)对脑缺血再灌注损伤神经元凋亡、bcl-2、p53蛋白表达的影响及对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法健康大鼠分为缺血对照组和SFI治疗组,再灌注开始时治疗组大鼠腹腔注射SFI,对照组注射生理盐水,于再灌注6、12、24 h处死大鼠取脑组织制切片,分别进行bcl-2、p53蛋白及凋亡细胞检测。结果 TUNEL染色结果各组均有阳性细胞表达,SFI治疗组凋亡细胞数与缺血对照组比较显著减少。bcl-2蛋白结果显示治疗组bcl-2阳性细胞数均明显高于对照组。p53蛋白检测结果显示治疗组阳性细胞数均明显低于对照组。结论 SFI能抑制脑缺血再灌注损伤神经元凋亡,其抗凋亡机制可能与上调bcl-2蛋白及下调p53蛋白表达有关。

组蛋白脱乙酰化酶抑制剂对炎性细胞因子表达的影响

组蛋白脱乙酰化酶（HDACs）抑制剂因其可诱导细胞周期阻滞、诱导肿瘤细胞的分化和凋亡，而且重要的是对机体的不良反应小，因此被广泛地用于各种恶性肿瘤的治疗。近年来，出现了诸多关于HDACs抑制剂被用作抗炎药物的研究，不过也有一些关于HDACs抑制剂促进某些炎性细胞因子表达的报道。本文就HDACs抑制剂对炎性细胞因子表达的影响作一综述。

计算机图像分析与人工计数方法在癫痫脑组织GFAP免疫组化中的对比研究

目的对比计算机图像分析与人工计数阳性细胞方法在检测GFAP阳性细胞中应用,探讨计算机图像分析代替人工计数的可行性及优缺点。方法应用正常组、癫痫组以及灵芝孢子粉组三组大鼠切25μ厚冰冻切片,常规GFAP免疫组化染色。人工计数GFAP阳性细胞,同时用Image-Pro Plus分析图片的积分光密度,对比各组间差异以及两种方法之间的相关性。结果两种方法都能检测出各组间存在差别,结果具有相关性。结论用人工计数方法和计算机图像处理结果具有正相关关系,其得出的结论也一致,在某些可代替人工技术方法用于免疫组化分析。

灵芝孢子粉对癫痫大鼠海马区TNF-α、ET-1影响的研究

目的:观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内皮素-1(ET-1)含量变化的影响。方法:用亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)复制慢性癫痫模型,用药组以灵芝孢子粉灌胃,记录癫痫发作的级别及潜伏期,并采用放射免疫法检测各组海马区TNF-α、ET-1的含量。结果:癫痫模型组与正常对照组相比,TNF-α、ET-1的含量明显增高(P<0.01);灵芝孢子粉组与癫痫模型组相比,造模第17、21、25天时癫痫发作的潜伏期二者差异有显著性(分别为P<0.05;P<0.05;P<0.01),TNF-α、ET-1的含量明显降低(P<0.05)。结论:TNF-α、ET-1可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显减弱TNF-α、ET-1过度表达对癫痫大鼠中枢神经系统的毒性损害,可能是通过调节神经系统免疫炎症反应而实现的,对癫痫发作导致的神经细胞损伤具有保护作用。

β-谷甾醇对原代大鼠海马神经元细胞活力的毒性

目的:研究β-谷甾醇对正常和痫性放电海马神经元的毒性作用。方法:采用24h内新生Wistar大鼠为细胞源,用Neurobasal培养液培养海马神经元9d后,加入无镁离子处理3h,诱导其痫性放电,加入β-谷甾醇(浓度),作用24h,MTT法检测β-谷甾醇对海马神经元的无毒和对原代大鼠海马神经元癫痫样细胞最佳作用时间的影响。结果:成功分离出大鼠原代海马神经元细胞,β-谷甾醇在20μmol/L浓度下对海马神经元细胞无毒性,最佳作用时间为24h。结论:浓度20μmol/L,最佳作用时间为24h,β-谷甾醇对海马神经元没有毒性,可用于癫痫治疗。

他莫昔芬诱发的脂肪肝病人肝/脾CT值与BMI及P_3/P_2的相关性

目的探讨他莫昔芬诱发的脂肪肝病人的肝/脾CT值与体重指数(BMI)及孕三醇(P3)/孕二醇(P2)的相关性。方法56名乳腺癌采用保守疗法的病人给予他莫昔芬前后每年测肝/脾CT值及终止服药后她们尿中孕三醇/孕二醇的水平。结果(Fisher)精确测试结果显示体重指数>236kg/sqm与肝/脾CT<09密切相关;孕三醇/孕二醇<1与肝/脾CT<09密切相关。结论服用他莫昔芬的病人BMI超过236kg/sqm及尿中孕三醇/孕二醇比值小于1是脂肪肝发展的危险信号。