仿头模在口腔颌面外科学教学中的应用

口腔颌面外科学（oral and maxillofacial surgery）是一门以外科治疗为主,以研究口腔器官（牙、牙槽骨、唇、颊、舌、腭、咽等）、面部软组织、颌面诸骨（上颌骨、下颌骨、颧骨等）、颞下颌关节、唾液腺以及颈部某些疾病的防治为主要内容的学科。它是一门集科学性、技巧性、实践性很强的临床医学学科,它不仅要求学生掌握扎实的基础理论知识,更要求学生具备高超的临床操作技能和分析解决实践中各种问题的能力。

口腔鳞癌细胞缺氧诱导因子表达水平与其对顺铂敏感性的研究

目的检测不同口腔鳞癌细胞的缺氧诱导因子-1α的表达水平,探讨口腔鳞癌细胞对顺铂的敏感性是否与其表达水平相关。方法将OSC2、OSC4、OSC5、OSC6口腔鳞癌细胞培养并检测其缺氧诱导因子-1α的表达水平,利用四唑蓝比色法(MTT)检测各种细胞对不同浓度顺铂的生长抑制率。结果OSC2和OSC4的缺氧诱导因子-1α的表达水平明显低于OSC5和OSC6,OSC2和OSC4对顺铂的敏感性高于OSC5和OSC6,其生长受顺铂抑制明显。结论缺氧诱导因子-1α的表达水平与口腔鳞癌细胞对顺铂的敏感性相关,缺氧诱导因子可能成为肿瘤化疗药物的新分子靶点。

口腔鳞状细胞癌中S100A4蛋白、MMP-2蛋白的表达及意义

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中S100A4蛋白和MMP-2蛋白的表达及意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测40例OSCC组织及口腔正常黏膜组织中S100A4蛋白和MMP-2蛋白的表达情况。结果:①S100A4蛋白的表达与OSCC患者的年龄、性别、部位、临床分期、组织分化程度无明显关系(P>0.05),而与淋巴结转移密切相关(P<0.01)。②MMP-2蛋白的表达与OSCC患者的年龄、性别、部位、临床分期、组织分化程度无明显关系(P>0.05),而与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。S100A4蛋白与MMP-2蛋白的表达呈正相关(r=0.336,P<0.05)。结论:S100A4蛋白及MMP-2蛋白的表达与肿瘤的转移密切相关,检测两者的表达情况有助于对口腔鳞癌进行转移的预测并为抗癌治疗提供新的目标与方向。

DNA聚合酶γ介导的口腔鳞癌细胞放疗增敏

目的:研究mtDNA损伤修复蛋白POLG的表达调控与γ射线不敏感的口腔鳞状细胞癌细胞(OSC-5)的凋亡损害的相关性。方法:体外培养OSC-5细胞,并用30Gyγ射线处理,MTT比色法检测OSC-5细胞存活率,RNA干涉技术敲除POLG基因,Western Blot检测POLG和Cleaved-PARP蛋白的表达。结果:30Gyγ射线处理后OSC-5细胞的增殖率为(75.67±4.16)%;si-POLG下调OSC-5细胞POLG蛋白表达水平;si-POLG转染的细胞经γ射线处理后Cleaved-PARP蛋白表达增加,细胞存活率下降(P<0.05)。结论:通过抑制口腔鳞状细胞癌细胞mtDNA损伤修复蛋白POLG能增加对γ射线不敏感的OSC细胞的凋亡损害。

缺氧诱导因子的表达水平与口腔鳞癌对5-FU敏感性的研究

目的:探讨不同口腔鳞癌细胞的缺氧诱导因子-1α的表达水平,阐明口腔鳞癌细胞对5-FU的敏感性是否与其表达水平相关。方法:将OSC2、OSC4、OSC5、OSC6口腔鳞癌细胞培养并检测其缺氧诱导因子-1α的表达水平,利用MTT检测法检测各种细胞对5-FU不同浓度的生长抑制率。结果:OSC2和OSC4的缺氧诱导因子1α的表达水平明显低于OSC5和OSC6,OSC2和OSC4对顺铂的敏感性高于OSC5和OSC6,其生长受5-FU抑制明显。结论:缺氧诱导因子的表达水平与口腔鳞癌细胞对5-FU的敏感性相关,缺氧诱导因子可能成为肿瘤化疗药的新的分子靶点。

颌面部骨折114例临床分析

目的:分析颌面部骨折的致伤原因,临床特征及治疗方法。方法:对2000—01～2004—12我科收治的114例颌面部骨折患者进行了回顾性分析、讨论。结果:颌面部骨折患者为11.17%,其中以21～30岁年龄组发病率最高,占40.35%。下颌骨骨折多见,占48.25%.交通肇事和打架斗殴是主要的致伤原因。对骨折的治疗以钛板坚强内固定为主要治疗方法。结论:颌面骨骨折在口腔疾病中呈上升趋势,好发于青壮年,切开复位坚强内固定为骨折治疗的最佳方案。

EGFR-siRNA对口腔鳞癌细胞耐药机制影响的研究

目的:探讨EGFR-siRNA在人舌鳞癌细胞株顺铂耐药逆转过程中的作用。方法:逐步递增浓度、间歇作用体外诱导法建立Tca8113/CDDP细胞株。设计合成针对EGFR基因的siRNA干扰序列,瞬时转染Tca8113/CDDP细胞,采用RT-PCR法检测EGFR因子表达。MTT法测定顺铂对各组细胞的抑制作用。结果:EGFRsiRNA染效率达80%以上,各组细胞存活率存在浓度依赖,转染后相同浓度的顺铂作用后Tca8113/CDDP细胞株的抑制率明显升高(P<0.05),电泳带亮度明显弱于未转染组,EGFR mRNA表达下降(P<0.05)。结论:EGFRsiRNA能下调口腔鳞癌耐药细胞EGFR mRNA的表达,降低细胞增殖活性,并能恢复其对顺铂的敏感性。

乳杆菌A2代谢产物LGF2对人口腔癌细胞增殖的抑制作用

目的考察乳杆菌A2(Lactobacillus A2)代谢产物LGF2对人口腔癌细胞CAL-27、KB细胞增殖的抑制作用。方法采用凝胶层析法对乳杆菌A2(Lactobacillus A2)的乳清蛋白代谢产物进行分离纯化,部分收集器收集,真空冷冻干燥法进行冷冻干燥。采用MTT法检测收集组分对人口腔癌细胞增殖的抑制作用。采用倒置光学显微镜观察经乳杆菌代谢产物作用后肿瘤细胞的形态变化。结果层析产物LGF2作用于人口腔癌细胞,倒置光学显微镜观察显示随着药物浓度的提高人口腔癌细胞数量逐渐减少;MTT法检测结果表现出随着药物浓度的提高癌细胞抑制率提高,LGF2对人口腔癌细胞系CAL-27、KB细胞增殖的抑制作用其对应的IC50分别为0.723 mg/m L和0.729 mg/m L。结论 LGF2对人口腔癌细胞系CAL-27、KB细胞增殖有抑制作用且呈剂量依赖性关系。

缺氧条件对成骨细胞VEGF和TGF-β1表达影响的实验研究

目的研究CoCl2对体外培养的鼠下颌骨成骨细胞的作用,观察缺氧条件对成骨细胞VEGF及TGF-β1表达的影响,为临床牵张成骨技术的分子生物学机制研究提供理论依据。方法取新生24h内Wistar大鼠下颌骨,改良酶消化法培养和纯化成骨细胞,采用HE染色、ALP组织化学染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学、钙结节染色行细胞形态学及组织学鉴定,并绘制生长曲线。取第3代最佳生长状态的鼠下颌骨成骨细胞,用150μmol/LCoCl2处理(实验组),设正常状态下培养为对照组,分别于培养后0、3、6、9、12、24h,采用免疫荧光技术检测VEGF及TGF-β1表达。结果HE染色示成骨细胞形态多样,呈三角形、多角形、圆形及鳞片形等不规则形态,突起长短不一向外伸展,胞核清晰可见;胞浆丰富,呈粉红色,胞核蓝紫色,有时可见2个细胞核,密集处细胞形态不明显,分界模糊,仅见大圆核细胞。ALP组织化学染色示细胞胞质呈黑色颗粒,细胞核轮廓不清,细胞密集区可见大量阳性细胞。Ⅰ型胶原免疫组织化学染色示实验组阳性细胞均匀可见,胞浆呈棕黄色,胞核周围尤为明显,空白对照组细胞未见棕黄色颗粒。钙结节染色示成骨细胞于盖玻片上培养15d后,细胞聚集成不透明区域,呈结节样;茜素红染色后,有橙红色着色。培养各时间点对照组细胞激光共聚焦显微镜下可见较弱的VEGF表达荧光;实验组细胞随缺氧时间延长,VEGF表达荧光强度值增加,于术后9h达高峰,随后降至正常水平。培养各时间点激光共聚焦显微镜下可见两组细胞均有TGF-β1表达荧光,对照组各时间点荧光强度值均略高于VEGF对照组;实验组TGF-β1表达在缺氧3h短期成倍增加,随缺氧时间延长表达逐渐降低。结论经新生大鼠下颌骨培养的成骨细胞性状稳定;适当缺氧可诱导成骨细胞VEGF和TGF-β1表达增强。

乳杆菌代谢产物诱导人舌鳞癌细胞的凋亡作用

目的:考察植物乳杆菌代谢产物对人舌鳞癌细胞系CAL-27细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡的作用。方法:植物乳杆菌23201分别经复原乳清培养基和复原乳清菊糖培养基培养,制备相应的代谢产物1(LPM1)和代谢产物2(LPM2);用MTT法检测细胞增殖抑制作用;通过吖啶橙染色法检测凋亡细胞的形态学变化;采用琼脂糖凝胶电泳法检测细胞DNA片段。结果:不同浓度LPM1和LPM2分别作用CAL-27细胞24 h,最大抑制率分别达到(44.2±3.3)%和(41±4.1)%;荧光显微镜下观察,凋亡细胞的细胞核不规则,凝聚呈新月形或马蹄形;琼脂糖凝胶电泳显示出典型的"梯"状DNA条带。结论:植物乳杆菌代谢产物可以抑制CAL-27细胞的增殖,呈剂量依赖性关系,并诱导CAL-27细胞凋亡。

牙周膜干细胞膜片的构建及其生物学特性的研究

目的:探讨牙周膜干细胞膜片的构建及其生物学特性。方法:采用胶原酶消化人牙周膜组织,获得牙周膜干细胞(Periodontal ligament stem cells,PDLSCs),经体外鉴定、扩增后构建PDLSCs细胞膜片,并通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜(SEM)对PDLSCs细胞膜片形态学进行检测。此外,细胞膜片厚度及膜片中细胞密度也被检测。结果:PDLSCs成功被分离、培养、鉴定,并且PDLSCs体外培养2周后,获得白色膜状PDLSCs细胞膜片。倒置显微镜下观察显示,细胞复层生长,细胞呈典型的纺锤状。体式显微镜下观察显示,细胞与细胞之间紧密连接。组织学观察显示,细胞与细胞之间存在着大量细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)。扫描电镜下观察膜片表面显示,细胞在膜片上充分伸展,细胞之间紧密连接。PDLSCs细胞膜片厚度由起初的(48±3.2)μm到3周后的(69±3.4)μm,但在第2周细胞厚度(64±3.3)μm,变化最明显。细胞膜片中的细胞密度检测显示连续培养3周后仍然有大量具有活性的细胞存在,然而细胞密度在第2周时最大。结论:本研究证明我们已经成功探索出一套稳定、可靠的PDLSCs细胞膜片构建方法,为利用PDLSCs细胞膜片修复、再生牙周组织及牙周缺损提供了一定的技术保证。

miR-26a对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力的调控作用

目的利用小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化模型,探讨miR-26a在成骨分化中的表达趋势及调控作用。方法提取雌性C57/BL6J小鼠双侧下肢股骨骨髓分离培养BMSCs,诱导分化为成骨细胞,通过实时定量PCR检测miR-26a在BMSCs及其诱导分化细胞中的表达。使用miR-26a的促进物miR-RiboTMmicroRNA-26a mimics通过siPORTTMNeoFXTMagent转染试剂瞬时转染BMSCs并加入成骨诱导剂培养,同时设立转染microRNA-26a mimics NC的对照组。培养7 d、14 d后,进行细胞形态、碱性磷酸酶(ALP)染色、钙盐结节(茜素红染色)等项目的检测。另外制造绝经后骨质疏松小鼠模型(OVX组)与假手术动物模型(sham组),RT-PCR检测OVX组中miR-26a的表达。结果 miR-26a的表达在BMSCs向成骨分化过程中上升约25倍,成骨基因的表达也随着诱导时间的延长逐渐升高。转染miR-26a mimics后的BMSCs在培养7d后逐渐由梭形变为多角形,与阴性对照组类似;ALP染色显示阴性对照组培养7 d后为阳性,而实验组在培养7 d时呈强阳性;茜素红染色显示实验组培养14d后出现数量较多的钙盐沉积结节,而阴性对照组则较少。miR-26a mimics组成骨基因的表达均高于对照组。RT-PCR检测结果显示OVX组中miR-26a的表达低于sham组4倍。结论 miR-26a mimics的转染可以促进BMSCs的成骨分化潜能,在骨质疏松的环境中miR-26a表达下降,间接证实了miR-26a对小鼠BMSCs成骨潜能的促进作用。

大鼠成骨细胞体外培养、特性鉴定及低氧时VEGF表达的变化

目的:用酶消化法从Wistar大鼠下颌骨分离和体外培养成骨细胞,观察应用CoCl2处理后,成骨细胞中VEGF的表达变化。方法:取新生24h内Wistar大鼠下颌骨,采用多次酶消化法进行成骨细胞原代培养,经细胞形态学及组织学鉴定,取最佳生长状态的鼠下颌骨成骨细胞,采用CoCl2处理后建立体外成骨细胞低氧模型,以激光共聚焦显微镜观察不同低氧时间的VEGF的表达情况。结果:经大鼠下颌骨培养出的成骨细胞具有成骨细胞的典型生物学行为,富含碱性磷酸酶(ALP)活性,可合成Ⅰ型胶原等;应用CoCl2处理后,对照组细胞可观察到较弱的荧光,随低氧时间的延长,VEGF表达的荧光比值增加,低氧组低氧6h光密度值明显增加;在低氧9h时,VEGF的表达强度最高,达到峰值,随后降至正常水平。结论:采用新生大鼠下颌骨培养成骨细胞的方法切实可行,可用于口腔医学相关研究;低氧可调节成骨细胞VEGF的表达。

原发性舍格伦综合征患者Th22细胞及其细胞因子IL-22的表达及意义

目的探讨Th22细胞及其细胞因子白细胞介素22(IL-22)在原发性舍格伦综合征(p SS)患者外周血中的表达及临床意义。方法 p SS患者根据唾液腺受累程度分为轻、中、重度患者。健康成人作为对照组。检测Th22细胞及其细胞因子IL-22在轻、中、重度p SS患者和健康对照组外周血中的表达。结果 p SS患者外周血中Th22细胞及细胞因子IL-22表达明显高于健康对照组(P<0.05)。而且患者病情越严重,外周血中Th22细胞及细胞因子IL-22水平越高:重度组高于中度组(P<0.05),中度组高于轻度组(P<0.05)。结论 p SS患者外周血中Th22及其细胞因子IL-22较健康对照组明显升高,而且病情越严重,Th22及其细胞因子IL-22水平越高。因此,检测外周血中Th22及其细胞因子IL-22水平有可能成为判断p SS病情严重程度的指标,并为治疗提供新的治疗靶点。

羟基磷灰石/骨碎补复合材料修复骨缺损的实验研究

目的:研究羟基磷灰石/骨碎补复合材料修复骨缺损的效果。方法:大白兔双侧下颌骨形成人工骨缺损,植入羟基磷灰石/骨碎补复合材料及对照材料,进行X线片、组织学、扫描电镜等方法观察,结果进行比较。结果:修复区密度,4、8、12、16周密度逐渐减小,存在显著性差异(P<0.01)。组织学观察,随时间延长新骨呈渐进性成熟,扫描电镜观察也证实了新生骨呈渐进性成熟过程。实验组骨缺损修复程度优于各对照组材料。结论:羟基磷灰石/骨碎补复合材料有明显促进骨缺损修复的作用。

牙槽孔及其毗邻的解剖学研究及临床应用

目的:为上牙槽后神经阻滞麻醉提供解剖学资料。方法:对50具成人颅骨进行观测。根据观测结果弯制弧形注射针头,为50例患者进行上牙槽后神经阻滞麻醉。结果:牙槽孔距颧下嵴起始部距离,左侧(21.54±3.05)mm;右侧(20.91±2.50)mm。牙槽孔距颧下嵴起始部的弧长,左侧(20.91±2.50)mm。牙槽孔距颧下嵴起始部的弧长,左侧(23.28±1.64)mm;右侧(22.94±1.68)mm。结论:以牙槽孔至颧下嵴起始部的弧长和弦长为标准弯制注射针头,采用口内注射法进行上牙槽后神经阻滞麻醉,成功率为98％。

基于CBCT的上颌窦底提升关键解剖位点数据测量分析

目的:利用锥形束CT(cone beam CT,CBCT)影像测量上颌窦底提升术相关解剖位点,为上颌窦底提升术提供影像解剖学数据。方法:从2014-08~2015-07在佳木斯大学附属口腔医院口腔种植科就诊的以"上颌后牙区缺失"为主诉的患者,测量所有符合纳入标准患者的影像解剖学数据。所得数据输入SPSS17.0软件进行统计学分析。结果:共纳入41例患者,男20例,女21例,共48个上颌窦。可用骨宽度男性(7.51±2.10)mm,女性(6.45±2.46)mm,可用骨高度男性(6.69±4.12)mm,女性(8.50±2.63)mm;上颌窦近远中距离男(27.13±4.75mm,女性(27.02±4.79)mm;上颌窦颊腭侧距离男性(16.08±4.10)mm,女性(17.03±4.95)mm;上颌窦前外侧壁厚度男性(1.65±0.74)mm,女性(1.44±0.49)mm;上颌窦黏膜厚度男性(2.34±1.89)mm,女性(2.05±1.81)mm;上颌窦分隔检出比例男性33.3%,女性41.7%;血管检出比例男性58.33%,女性66.67%。结论:CBCT可以测量上颌窦相关解剖位点的解剖数据,对所测的数据,对上颌后牙区的种植及上颌窦底提升有指导意义。

正颌外科技术在颌面部骨折治疗中的应用

目的:评价正颌外科技术在颌面部骨折治疗中的方法和效果。方法:对在我院就诊的38例陈旧性颌面骨折,运用正颌外科技术进行治疗,按正颌外科常规,术前摄头颅定位正侧位片,取模;头影测量及模型外科等,术前制作咬颌板,手术均采用标准的正颌外科截骨线进行,精确复位后行坚强内固定,术后颌间固定2周～3周;术后1个月、3个月、6个月复查拍片,观察骨折愈合情况、咬颌关系及开口度等功能恢复情况。结果:38例患者创口均1期愈合,术后经颌间牵引,咬颌关系和外观基本恢复伤前状况。结论:治疗颌面部陈旧性骨折应用正颌外科技术,此法具有稳固性好,咬颌关系稳定、感染率低的优点,目前是治疗颌骨骨折错位愈合较理想的方法。