WPBL教学法用于临床病理生理学教学的研究

近年来科学与网络技术飞速发展,伴随着新的教育教学理论指导的出现,在网络资源支持下,呈现出基于问题学习的教学结构形式(problem-based learning on web,WPBL)。为了探讨WPBL教学法在"临床病理生理学"教学中的应用效果,对本院2009级临床医学专业62名学生,进行临床病理生理学部分教学内容分组教学尝试,实验组采用WPBL教学法,对照组采用传统教学法。通过闭卷考试评价教学效果,并结合调查问卷评价学生的学习态度和满意度。经统计,实验组的测试成绩明显优于对照组(P<0.05),问卷调查显示95.2%以上的学生对WPBL教学法感兴趣,认为WPBL教学法能提高学习主动性、分析、判断、解决问题的能力。从结果看WPBL教学法能够提高"临床病理生理学"教学效果。

一种受学生欢迎的学习方式——生理学课堂讨论课

本文为在生理课教学中加强与临床的联系以及提倡重视学生学习的独立思考和主动性,开展了课堂讨论的教学方式.通过实行收到了良好的效果.此种方式为加强学习效果,提高学生的素质同时也为提高教师的教学水平具有一定的促进作用.

生理学教学中实施基于网络的以问题为基础学习教学方法的探讨

本文对基于网络的以问题为基础学习（web problem—based learning，WPBL）教学方法在生理学教学中的应用进行了探讨。佳木斯大学在应用WPBL教学方法中，充分运用网络资源创设一种逼真的、栩栩如生的生理学问题情景，为学生形成可以自由探索和自主学习的开放环境，激发学生对生理学的学习兴趣，充分调动学生的主动性，以进一步提高生理学的教学效果。

抗炎类药物治疗糖尿病肾病的Meta分析

目的 系统评价抗炎类药物治疗糖尿病肾病(DN)的有效性。方法 采用PubMed、The Cochrane Library、Embase、Web of Science、Scopus、Ovid、ProQuest、CBM、CNKI、万方、VIP、读秀数据库,搜集抗炎类药物治疗DN的随机对照试验(RCT),检索时限从建库至2022年4月5日。由两名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.4软件进行Meta分析。结果 共纳入29篇文献,含26个RCT,4 095例患者。Meta分析结果显示,与常规治疗相比,常规治疗联合抗炎类药物治疗DN能够有效降低尿白蛋白与肌酐比值[SMD=-0.17,95%CI(-0.31,-0.03),P=0.02]、尿白蛋白排泄率[SMD=-0.37,95%CI(-0.56,-0.18),P=0.000 1]、尿蛋白排泄率[SMD=-0.97,95%CI(-1.29,-0.64),P <0.000 01]和糖化血红蛋白[SMD=-0.17,95%CI(-0.27,-0.08),P=0.000 4];而在降低血肌酐[SMD=-0.04,95%CI(-0.19,0.1),P=0.57]、尿素氮[MD=-0.23,95%CI(-0.50,0.04),P=0.09]和空腹血糖[SMD=-0.15,95%CI(-0.32,0.02),P=0.08]方面差异无统计学意义;除少数药物外,多种药物在改变肾小球滤过率[SMD=-0.04,95%CI(-0.15,0.07),P=0.47]方面差异无统计学意义。结论 常规治疗联合抗炎类药物,能更好地改善DN患者的蛋白尿水平,但肾功能改善不明显。受纳入研究数量及疗程限制,上述结论有待更多高质量研究验证。

CXC趋化因子配体10对肝细胞癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响及其机制

目的:探讨外源性CXC趋化因子配体10 (CXCL10)对肝细胞癌(HCC) SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响,并阐明其作用机制。方法:按照CXCL10作用浓度,将人HCC SMMC-7721细胞分为0 mg·L^(-1)CXCL10组、10 mg·L^(-1)CXCL10组和30 mg·L^(-1)CXCL10组。上述部分细胞给予细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂PD98059 (80μmol·L^(-1))后,将SMMC-7721细胞分为0 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组、 10mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组和30mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组。CCK-8法检测各组SMMC-7721细胞增殖率,EdU法检测各组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率,Transwell小室实验检测各组SMMC-7721细胞迁移率,Western blotting法检测各组SMMC-7721细胞中ERK、磷酸化ERK (p-ERK)和细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)蛋白表达水平。结果:CCK-8法检测,培养24h后,与0mg·L^(-1)CXCL10组比较,10mg·L^(-1)CXCL10和30mg·L^(-1)CXCL10组SMMC-7721细胞增殖率升高(P<0.05或P<0.01)。EdU法检测,与0mg·L^(-1)CXCL10组比较,10mg·L^(-1)CXCL10和30mg·L^(-1)CXCL10组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率升高(P<0.01);Transwell小室实验检测,培养48 h后,与0 mg·L^(-1)CXCL10组比较,10 mg·L^(-1)CXCL10和30 mg·L^(-1)CXCL10组SMMC-7721细胞迁移率升高(P<0.01)。Western blotting法检测,细胞培养24 h后,采用CXCL10溶液处理24h,与0mg·L^(-1)CXCL10组比较,10mg·L^(-1)CXCL10组和30 mg·L^(-1)CXCL10组SMMC-7721细胞中ERK、p-ERK及Cyclin D1蛋白表达水平升高(P<0.01)。CCK-8法检测,加入ERK抑制剂PD98059后,与0 mg·L^(-1)CXCL10组比较,10 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组和30 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05);与10 mg·L^(-1)CXCL10组比较,10 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05);与30 mg·L^(-1)CXCL10组比较,30 mg·L^(-1)CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05)。结论:CXCL10能够促进HCCSMMC-7721细胞增殖和迁移,其作用机制与上调ERK/p-ERK/Cyclin D1通路蛋白表达有关。

肉桂醛对肝癌HepG2细胞p21和CDK4蛋白的影响

目的检测肉桂醛对肝癌HepG2细胞p21和细胞周期依赖性蛋白激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)蛋白表达的影响。方法肉桂醛(3.13、1.56、0.78、0.39、0.20、0.10 g/L)作用肝癌HepG2细胞后,MTT比色法检测HepG2细胞增殖活性和半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))。流式细胞术检测肉桂醛对HepG2细胞凋亡影响。免疫荧光法检测HepG2细胞p21和CDK4蛋白的表达。结果肉桂醛能抑制HepG2细胞增殖,且呈剂量和时间依赖性,24小时、48小时和72小时IC_(50)值分别为0.68、0.45、0.35 g/L(P<0.01)。肉桂醛组(0.900、0.450、0.225 g/L)肝癌HepG2细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。肉桂醛能增加p21蛋白和降低CDK4蛋白在HepG2细胞中的表达,各浓度肉桂醛组的p21、CDK4蛋白表达与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论肉桂醛可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,可能与调节p21和CDK4的蛋白表达有关。

内源性一氧化碳对离体犬阴茎海绵体平滑肌的作用

目的：探讨内源性一氧化碳（CO）对离体犬阴茎海绵体平滑肌作用的影响。方法：利用水浴条件下阴茎海绵体肌条的张力测定技术，用CO合成的关键酶血红素氧合酶（HO）的诱导剂——氯高铁血红素诱导海绵体平滑肌生成内源性CO，观察CO对去氧肾上腺素（PE）诱导收缩的阴茎海绵体肌条作用的影响。结果：氯高铁血红素对10μmol／LPE诱导的肌条收缩具有浓度依赖性的松弛作用，10～100μmol／L氯高铁血红素对平滑肌肌条的松弛效应与空白对照相比明显升高（P〈0．01）。用锌原卟啉-Ⅸ（ZnPP-Ⅸ）或亚甲蓝孵育处理后的肌条，氯高铁血红素的舒张作用明显减弱（P〈0．01）。结论：内源性CO具有浓度依赖性松弛阴茎海绵体平滑肌的作用，其机制可能是通过CO环磷酸鸟苷途径作用所致。

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑IGF-1、NF-κB表达及神经细胞凋亡的影响

目的:观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达及神经细胞凋亡的影响。方法:用亚惊厥剂量的PTZ复制大鼠慢性癫痫模型,用药组以灵芝孢子粉灌胃,记录癫痫发作的潜伏期及持续时间,采用免疫组织化学和TUNEL法分别检测脑IGF-1、NF-κB/P65的免疫反应性和神经细胞凋亡情况。结果:大鼠海马和皮质区每高倍视野(×400)下平均凋亡细胞数模型组(18.80±2.13、16.87±2.00)明显多于对照组(0.97±0.52、0.58±0.25),IGF-1、NF-κB/P65蛋白表达模型组明显高于对照组(均P<0.01);在造模第17、21、25d时用药组较模型组癫痫发作的潜伏期有所延长(分别为P<0.05,P<0.05,P<0.01),海马和皮质区凋亡细胞数用药组(12.30±2.46、10.48±1.33)明显少于模型组,NF-κB/P65蛋白表达用药组低于模型组,而IGF-1的免疫反应性用药组明显强于模型组。结论:IGF-1、NF-κB及神经细胞凋亡均可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显抑制NF-κB蛋白的表达,增强IGF-1的免疫反应性,可能是其对癫痫所致神经细胞凋亡有明显抑制,从而对神经细胞起保护作用的机制之一。

低温对大鼠血浆及不同脑区神经肽等活性物质含量变化的影响

目的 :探讨低温对血浆及不同脑区精氨酸加压素 (AVP)、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )、亮氨酸 -脑啡肽 (L-EK)、环磷酸腺苷 (cAMP)、Ca2 + 及Mg2 + 含量影响。方法 :复制大鼠实验性低温模型 ,随机分组处理 ,实验结束时 ,取下丘脑、脑干及血样品 ,采用放射免疫法测定AVP、AngⅡ、L -EK、cAMP的含量 ,原子吸收法测定Ca2 + 及Mg2 + 含量。结果 :实验组L -EK、cAMP、Ca2 + 及Mg2 + 值显著高于对照组 (P <0 0 1 ) ;实验Ⅰ组、Ⅲ组血浆AVP、AngⅡ值显著高于对照组 (P <0 0 1 ) ,Ⅱ组显著低于对照组 (P <0 0 1 )。实验Ⅰ组、Ⅲ组下丘脑和脑干AVP、AngⅡ值显著低于对照组 (P<0 0 1 ) ,Ⅱ组显著高于对照组 (P <0 0 1 )。结论 :低温时 ,L -EK、AVP、AngⅡ、cAMP、Ca2 + 及Mg2 +

不同月龄大鼠阴茎组织中内源性一氧化碳与环磷酸鸟苷和环磷酸腺苷的关系

目的:探讨增龄对大鼠阴茎组织中内源性一氧化碳(CO)与环磷酸鸟苷(cGMP)、环磷酸腺苷(cAMP)含量的变化。方法:8、16、24个月大鼠各8只,分别注射阿朴吗啡(APO)进行大鼠阴茎勃起功能实验;麻醉后取阴茎海绵体,用改良双波长分光光度法测量其CO浓度,并测量其cAPM、cGMP含量。结果:随月龄增加,CO含量降低,各月龄组间差异有显著性(P均<0.01);cGMP、cAMP含量均随月龄增加而逐渐下降,各月龄组间差异有显著性(P均<0.01)。结论:随月龄的增加,大鼠阴茎组织中CO、cAMP、cGMP含量下降,提示衰老对大鼠阴茎组织中CO、cAMP、cGMP含量影响显著。

精索静脉曲张大鼠睾丸细胞线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达和细胞凋亡的研究

目的:研究精索静脉曲张(VC)大鼠睾丸细胞线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达与细胞凋亡及其机制。方法:选取35只成年健康雄性Wistar大鼠,随机分为VC组(VG,n=20)和假手术组(SOG,n=15)。术后10周,取双侧睾丸,采用火焰原子吸收法测定线粒体钙、采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生殖细胞凋亡,免疫组化SABC法检测Bcl-2/Bax蛋白表达。结果:VC组大鼠双侧睾丸生殖细胞线粒体钙的含量明显低于SOG组,生殖细胞凋亡显著增多,Bcl-2表达显著降低,Bax表达显著升高,但双侧睾丸生殖细胞凋亡率差异无显著。结论:VC时,大鼠睾丸生殖细胞凋亡明显增加,提示VC时所致的男性不育可能是在某种凋亡诱发因素(高温、毒素返流、氧自由基等)作用下,线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达的变化直接对生殖细胞产生影响,导致男性不育。

灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠附睾细胞线粒体Ca^(2+)细胞色素C的影响

目的:研究灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠附睾组织中细胞色素C(Cyt-C)、线粒体Ca2+的影响。方法:青春期Wistar大鼠50只,大鼠尾静脉一次性注射2%链脲佐菌素(STZ)或柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液制备2型糖尿病大鼠模型和对照组模型。糖尿病大鼠模型随机分模型组和灵芝组,每组20只,分别给以高脂高糖饮食、高脂高糖+灵芝孢子粉[250mg/(kg.d)],对照组10只,正常饮食。10周后,取双侧附睾,检测附睾细胞线粒体Ca2+、Cyt-C含量。结果:2型糖尿病模型制备成功,模型组附睾细胞线粒体Ca2+含量[(3.279±0.502)mg/L]明显高于对照组[(2.606±0.048)mg/L,P<0.01],灵芝组[(2.693±0.196)mg/L]明显低于模型组(P<0.05),与对照组差异无显著性(P>0.05)。模型组线粒体Cyt-C含量[(3.213±1.511)μmol/L]明显少于对照组[(5.688±1.679)μmol/L,P<0.05],胞质Cyt-C含量[(2.484±0.661)μmol/L]明显高于对照组[(1.574±0.329)μmol/L,P<0.01];灵芝组线粒体Cyt-C含量[(5.258±1.560)μmol/L]高于模型组,但差异无显著性(P>0.05),胞质Cyt-C含量[(1.727±0.396μmol/L]明显低于模型组(P<0.05),与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论:2型糖尿病大鼠附睾细胞钙稳态失衡、线粒体有损伤,附睾细胞可能存在细胞凋亡过度。灵芝孢子粉在糖尿病状态下,对附睾组织有保护作用或有对抗细胞凋亡作用。

精索静脉曲张与氧化应激的研究

目的 :研究精索静脉曲张 (VC)时氧化应激的损害机制。 方法 :2 8例VC不育男性 ,行精索内静脉结扎术 ,采精索内静脉血和外周静脉血 ;建立大鼠左侧VC模型 (n =12 ) ,以假手术大鼠为对照组 (n =8) ,术后 3个月取睾丸组织。采用分光光度法检测VC男性血浆及大鼠睾丸组织中一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)、黄嘌呤氧化酶(XO)、乳酸 (Lac)和乳酸脱氢酶 (LDH)含量。 结果 :VC患者精索内静脉血浆中NO、NOS、XO、Lac含量明显高于外周静脉血浆 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,LDH明显降低 (P <0 .0 1)。实验性VC大鼠左侧睾丸组织NO、XO高于对照组 (P <0 .0 1) ,Lac明显降低 (P <0 .0 1)。 结论 :VC时 ,可由于曲张精索静脉血浆中NO、NOS和XO及睾丸组织中NO和XO产生增加 ,以及Lac和LDH含量的变化 ,而导致精子生成障碍或 /和精子活力下降 ,引起男性不育。

实验性精索静脉曲张诱导青春期大鼠附睾细胞凋亡的研究

目的:研究实验性精索静脉曲张(EVC)大鼠附睾细胞凋亡及其显微、超微结构的变化。方法:采用青春期雄性Wistar大鼠复制左精索静脉曲张模型,以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,常规制作附睾体部光镜、电镜标本,观察附睾组织细胞形态变化。结果:实验组(VG)细胞凋亡率显著高于假手术组(SOG)(P<0.01),实验组左、右侧细胞凋亡率有差别,但无显著意义(P>0.05)。光镜下主要改变有附睾管萎缩,上皮细胞出现空泡化,上皮内晕、亮细胞数明显增多。电镜下主要表现为主细胞内溶酶体增多、变大,残余小体增加,内质网扩张,线粒体嵴模糊,高尔基复合体空泡化;核染色质致密,形成大小不等的团块,边集于核膜处;上皮细胞游离面微绒毛稀少,可见局灶性断裂和破坏。结论:青春期大鼠实验性精索静脉曲张可致附睾组织细胞凋亡过度,使其显微及超微结构明显改变,这些变化可能是影响精索静脉曲张患者生育能力的机制之一。

戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素和神经营养因子-4表达的变化及灵芝孢子粉的干预作用

目的:观察戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素(N-cadherin)和神经营养因子-4(NT-4)表达的变化及灵芝孢子粉的干预治疗作用,研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法:健康雄性Wistar实验大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组均用致痫亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化和Westernblotting检测皮质和海马区N-cadherin和NT-4的变化。结果:实验性癫痫大鼠模型制作成功,灵芝孢子粉组和癫痫模型组实验动物均达到点燃标准,与癫痫模型组动物相比,灵芝孢子粉组大鼠潜伏期明显延长,但持续时间无显著差异。免疫组化和Western blotting检测实验结果表明:癫痫模型组实验大鼠脑海马和皮质N-cadherin含量比正常对照组增高(P<0.01);灵芝孢子粉组N-cadherins含量比癫痫模型组下降(P<0.01)。同时癫痫模型组大脑海马和皮质NT-4含量比正常对照组增加(P<0.05);灵芝孢子粉组NT-4含量比癫痫模型组增加(P<0.01)。结论:灵芝孢子粉能够降低N-cadherin的表达,调整病变神经元兴奋性,起到抗癫痫作用,还能增强NT-4的表达从而减轻癫痫发作对神经系统的损伤。

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织GDNF与NT-3表达的影响

目的:观察和探讨灵芝孢子粉干预后戊四氮(PTZ)致痫大鼠皮质和海马区胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和神经营养因子-3(NT-3)的变化,进一步研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法:Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组采用PTZ腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。实验后断头迅速取脑,采用免疫组化方法检测皮质和海马区GDNF和NT-3表达的变化;同时用Westernblotting检测海马各指标蛋白的变化。结果:灵芝孢子粉干预后,免疫组化显示:皮质和海马区GDNF和NT-3较癫痫模型组明显增加;Western blotting检测显示:海马中GDNF和NT-3表达较癫痫组显著增加。结论:灵芝孢子粉能够增强GDNF和NT-3的表达从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤,所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用。

灵芝孢子粉对戊四氮慢性点燃大鼠学习记忆及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的观察灵芝孢子粉对戊四氮点燃大鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝孢子粉对神经细胞保护的作用机制。方法将60只成年SD大鼠随机分为空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉用药高、中、低剂量组共5组。癫痫模型组和灵芝孢子粉用药各组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTA35 mg.kg-1.d-1,直至达到点燃标准。点燃后,用药组以灵芝孢子粉灌胃。采用Morris水迷宫测试大鼠空间记忆能力,制备海马10%组织匀浆,化学比色法检测其ChAT、AChE的活性。结果水迷宫逃避潜伏期,模型组明显高于用药高剂量组和对照组(均P<0.01);跨过原平台次数,模型组明显少于用药高剂量组(P<0.05)和对照组(P<0.01);与模型组相比,用药中、高剂量组呈剂量依赖性显著抑制海马AChE的活性、增强ChAT的活性(均为P<0.05)。结论灵芝孢子粉可通过抑制功能脑区AChE活性、增加ChAT的活性,以增强中枢胆碱能神经系统的功能,改善癫痫大鼠认知能力,从而对脑组织起保护作用。

缰核损毁降低外源性抑郁症大鼠室旁核促肾上腺皮质激素释放激素的表达

目的探讨缰核与下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴及抑郁症之间的关系。方法应用慢性温和性刺激诱导抑郁症大鼠模型,观察缰核损毁对抑郁症大鼠行为、血清皮质醇及下丘脑室旁核内促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)表达的影响。结果经历慢性不可预知性刺激后,大鼠在开野实验中的水平活动次数及直立次数明显减少(P<0.01);在强迫游泳实验中的不动时间延长,上窜时间缩短(P<0.01);放射免疫学结果显示血清皮质醇水平显著升高(P<0.01),免疫组织化学结果显示下丘脑室旁核内CRH表达增加。损毁缰核后,抑郁症大鼠在开野实验中的水平及直立次数明显增加(P<0.01);强迫游泳实验中不动时间明显缩短,上窜时间明显延长(P<0.01);血清皮质醇水平下降(P<0.05);下丘脑室旁核内CRH表达减少。结论缰核损毁可改善抑郁症大鼠的抑郁行为,对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能的调节可能是实现这一作用的机制之一。

实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织IL-1和NO的变化

目的 :研究精索静脉曲张 (VC)对大鼠睾丸组织中IL 1和NO含量的影响。 方法 :采用部分结扎左肾静脉及左髂总静脉之间的交通支 ,制备Wistar大鼠VC模型。将大鼠随机分为手术结扎组 (VC组 ,n =30 )和假手术组 (n =2 0 ) ,分别测定 2组大鼠睾丸组织中IL 1和NO的含量 ,并加以比较。 结果 :①IL 1、NO含量在左侧睾丸组织中VC组均显著高于假手术组 (P <0 .0 1) ,而在右侧睾丸组织中 2组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;②IL 1与NO呈正相关关系 (r =0 .5 72 ,P <0 .0 1)。 结论 :VC时睾丸组织IL 1和NO的变化 ,可能是造成睾丸损伤。