以学生为中心神经内科查房教学模式的实践

目的:探讨以学生为中心的查房教学对神经内科住院医师规范化培训学员教学的效果。方法:选取轮转神经内科住院医师规范化培训学员200名为研究对象,对照组100名学生开展老师为中心的查房教学模式,实验组100名学生开展学生为中心的教学模式,从基础知识、技能操作、诊断思路、病例书写、沟通技巧等五大要素设计并实施以学生为中心的教学查房模式,每轮学生神经内科实习8周,每1周进行1次查房,实习结束前测评两组学生的神经内科临床实习效果。结果:实验组学生的病例书写得分高于对照组(P<0.01);学习效果如基础知识、技能操作、诊疗思路、沟通技巧的评价得分较对照组学生高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:以学生为中心的神经内科查房教学着重强调学生在学习中的中心地位,对学生能力的全面提高起到了积极的作用,通过查房教学能够在临床真实情镜下使住培医师在人文关怀、沟通技巧、问诊查体及简单的诊疗思路等方面得到提升。

半乳凝素1对脑损伤大鼠室管膜下区内源性神经干细胞原位增殖及迁移的影响

背景:半乳凝素1表达于室管膜下区的星形胶质细胞中并诱导其分化,分化的星形胶质细胞可明显提高脑源性神经生长因子的产生。目的:观察侧脑室注入半乳凝素1对脑缺血损伤大鼠内源性神经干细胞增殖、迁移的影响。设计、时间及地点:细胞学体内观察实验,于2007-03/11在佳木斯大学神经科学研究所完成。材料:纯种清洁级成年Wistar大鼠48只,随机分为模型组、药物组,24只/组。半乳凝素1为北京晶美生物工程公司产品。方法:两组大鼠均采用线栓法制作局灶性大脑中动脉闭塞模型。造模后24h,药物组经右侧侧脑室注入10μL浓度为0.2g/L的半乳凝素1,模型组注射等量生理盐水。分别于缺血再灌注后3,7,14,28d处死大鼠,取脑组织制作石蜡切片,处死前1d腹腔注射BrdU。主要观察指标:免疫组织化学染色检测大脑室管膜下区BrdU和巢蛋白阳性细胞的表达。结果:模型组缺血再灌注3d后大脑室管膜下区BrdU、巢蛋白阳性细胞开始增加,7d增殖达高峰,14d后表达开始下降,28d后下降至最低。药物组缺血再灌注3d后大脑室管膜下区两种阳性细胞均明显增加;7d增殖达高峰,半定量分析BrdU、巢蛋白阳性细胞数分别是模型组的2倍和1.5倍,且BrdU阳性细胞向腹外侧迁移,巢蛋白阳性细胞胞体变大,突起增长,并有向外侧迁移进入脑实质的迹象;14d后开始下降;28d降至最低,但仍明显多于模型组(P<0.05)。结论:经侧脑室注入半乳凝素1在大鼠脑缺血后可激活内源性神经干细胞原位增殖,并存在由增殖区向外周脑实质迁移的趋势。

半乳凝素1诱导脑损伤大鼠内源性神经干细胞原位增殖及定向分化

背景:半乳凝素1表达于室管膜下区的星形胶质细胞中并诱导其分化,分化的星形胶质细胞可明显提高脑源性神经生长因子的产生。目的:观察半乳凝素1诱导脑损伤大鼠内源性神经干细胞的原位增殖和定向分化效果。设计、时间及地点:细胞学体内观察实验,于2007-03/11在佳木斯大学神经科学研究所完成。材料:纯种清洁级成年Wistar大鼠48只,随机分为模型组、药物组,24只/组。半乳凝素1为北京晶美生物工程公司产品。方法:两组大鼠均采用线栓法制作局灶性大脑中动脉闭塞模型。造模后24h,药物组经右侧侧脑室注入10μL浓度为0.2g/L的半乳凝素1,模型组注射等量生理盐水。分别于缺血再灌注后3,7,14,28d处死大鼠,取脑组织制作石蜡切片,处死前1d腹腔注射Brdu。主要观察指标:免疫组织化学染色检测海马齿状回颗粒细胞层下区Brdu和巢蛋白阳性细胞的表达,免疫荧光双标法检测海马齿状回颗粒细胞层下区胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶的表达。结果:模型组脑缺血后3dBrdu、巢蛋白阳性细胞开始增加,7d增殖达高峰,14d后表达开始下降,28d后下降至最低。药物组脑缺血后3d两种阳性细胞均明显增加;7d增殖达高峰,半定量分析Brdu、巢蛋白阳性细胞数分别是模型组的1.8倍和2倍;14d后开始下降;28d降至最低,但仍明显多于模型组(P<0.05)。脑缺血后各时间点两组Brdu+/胶质纤维酸性蛋白+细胞基本相似(P>0.05);药物组脑缺血7dBrdu+/神经元特异性烯醇化酶+细胞开始大量增多,28d达高峰,半定量分析所有BrdU+细胞中约27%表达神经元特异性烯醇化酶,明显高于模型组(P<0.05)。结论:半乳凝素1在大鼠脑缺血后可激活内源性神经干细胞的原位增殖及分化,且分化后表达成熟神经元标志物神经元特异性烯醇化酶阳性细胞明显增多。

bFGF和BDNF对MCAO大鼠海马区神经干细胞原位增殖的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)对大鼠脑缺血损伤后海马区(SGZ)神经干细胞原位增殖的影响。方法:将Wistar大鼠84只随机分为空白对照组(12只)、bFGF组(24只)、BDNF组(24只)、bFGF+BD-NF组(24只)。采用线栓法制作局灶性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。分别于缺血再灌注后3d、7d、14d、28d处死大鼠。免疫组织化学方法动态检测SGZ区BrdU、Nestin的表达。结果:各组SGZ区的BrdU和Nestin阳性细胞均在脑缺血3d后开始增加,7d达到高峰,14d后开始下降,28d降至最低水平;与空白对照组相比,均有统计学意义(P<0.05);其中bFGF+BDNF组Brdu和Nestin阳性细胞数增加更明显。结论:侧脑室注射bFGF、BDNF可促进脑缺血大鼠SGZ区内源性神经干细胞原位增殖;bFGF和EGF联合应用对脑缺血大鼠神经干细胞原位增殖效应有协同作用。

神经生长因子和脑源性神经营养因子对神经干细胞迁移的影响

目的:探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)与脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)体外实验对神经干细胞迁移的影响。方法:体外应用半固体培养法连续14d观察不同浓度的NGF、BDNF及NGF+BDNF组合诱导神经干细胞迁移的情况。结果:体外条件下不同浓度的神经营养因子的组间和组内比较显示,100μg/L BDNF诱导神经干细胞迁移作用最明显。BDNF+NGF联合组在诱导神经干细胞迁移方面未见协同效应。结论:NGF、BDNF二者皆有诱导神经干细胞迁移的作用,100μg/L BDNF组诱导迁移作用最明显。

移植神经干细胞的存活与迁移:电刺激小脑顶核可提高移植效率吗?

背景:缺血早期半暗带中神经元和内皮细胞的坏死和凋亡无法得到缓解,加之移植后的存活率低,向功能细胞的分化率低,是单纯神经干细胞移植的缺陷。课题组提出整体干预理念,期望给移植细胞提供优化的整体环境。目的:观察神经干细胞移植与电刺激小脑顶核相结合整体干预对移植神经干细胞存活与迁移的影响。方法:体外分离、培养新生Wistar大鼠海马表皮生长因子反应性神经干细胞,Brdu标记,并用胎牛血清诱导,观察其多向分化潜能;80只Wistar大鼠分为4组:顶核刺激+神经干细胞移植组(n=32):左侧小脑顶核刺激24h后行右侧大脑中动脉梗死,再24h后将神经干细胞立体定向注入右侧侧脑室内;顶核刺激组(n=8):PBS代替神经干细胞,其余同顶核刺激+神经干细胞移植组;单纯神经干细胞移植组(n=32):同心圆电极插入小脑顶核,不通电其余同顶核刺激+神经干细胞移植组;对照组(n=8):同心圆电极插入小脑顶核后不通电,其余同顶核刺激组。记录梗死后6,24h,3,7,14,28d大鼠的神经功能;分别在移植后3,7,14,28d处死大鼠,以梗死灶为中心切片,Brdu免疫组织化学染色,观察移植神经干细胞的存活与迁移。结果与结论:分离培养的表皮生长因子反应性细胞表达nestin抗原,并有自我更新及多向分化潜能,在胎牛血清诱导下可分化为神经胶质细胞和神经元。经Brdu标记后,85%以上神经干细胞表达Brdu抗原。移植28d内顶核刺激+神经干细胞移植组功能评分明显优于与其他3组(P<0.05～0.01)。顶核刺激+神经干细胞移植组在移植14,28d存活细胞数明显多于单纯神经干细胞移植组;提示电刺激小脑顶核可显著提高移植神经干细胞的存活率及大脑中动脉梗死大鼠的神经功能评分;优化的整体环境可提高移植神经干细胞对局灶性脑缺血损伤细胞的替代作用。

Aβ_(1-40)诱导的神经干细胞凋亡中钾通道和JNK信号转导通路的作用

目的探讨Aβ1-40诱导的神经干细胞凋亡中钾通道与JNK的作用,以及钾通道与JNK的关系,进一步了解AD的发病机制。方法应用MTT法、Hoechst33342法、比色法及Westernb1ot法分别检测以TEA和SP 600125作用的Aβ1-40诱导神经干细胞的存活率、凋亡发生率、Caspase-3活性的改变及JNK磷酸化的情况。结果预先加入TEA使Aβ1-40诱导的神经干细胞的存活率增加,凋亡减少;JNK的选择性阻断剂SP 600125可显著的保护Aβ1-40诱导的神经干细胞的凋亡。在Aβ1-40孵育前30min加入TEA,与Aβ1-40共同孵育24h,TEA使JNK的磷酸化表达显著降低。结论 Aβ1-40可以使神经干细胞发生凋亡。钾通道在Aβ1-40诱导的神经干细胞凋亡时被激活,TEA可以明显减轻Aβ1-40诱导的神经干细胞的凋亡。Aβ1-40诱导神经干细胞后JNK信号转导通路参与了凋亡的发生,SP600 125对Aβ1-40诱导的神经干细胞具有明显的保护作用。TEA作用于Aβ1-40诱导的神经干细胞可以使JNK蛋白表达下降,说明Aβ1-40引起的钾通道激活和JNK磷酸化两者之间有一定的相互联系,进而诱发了下游凋亡相关蛋白的改变。

胱氨酸对MCAO模型鼠海马CA1区神经干细胞核磷蛋白表达的影响

目的:研究胱氨酸(CYS)对大鼠MCAO模型再灌注后海马CA1区神经干细胞凋亡相关蛋白核磷蛋白(NPM)表达水平的影响,探讨CYS保护细胞的机制。方法:线栓法制备MCAO模型,104只大鼠随机分为假手术组8只,MCAO组与MCAO+CYS治疗组各按时间点随机分为6个亚组,每亚组8只。MCAO+CYS治疗组给予CYS(0.15mg/g),腹腔注射;MCAO组与假手术组给予生理盐水(1mL/d),腹腔注射;TUNEL染色方法检测海马CA1区的神经干细胞的凋亡水平,免疫组织化学染色方法检测NPM表达水平的变化。结果:MCAO组与MCAO+CYS治疗组海马CA1区TUNEL阳性细胞数目增加,MCAO组增加显著。假手术组海马CA1区NPM的表达有一定的数量,MCAO组表达数量增加,MCAO+CYS治疗组显著增强。结论:大鼠海马CA1区核磷蛋白可受大脑中动脉阻塞急性缺血缺氧的作用而表达水平增加,应用胱氨酸治疗大大增加核磷蛋白的表达。

低氧诱导因子1α在神经干细胞缺氧、复氧损伤的作用

取出生在24h内的Wistar大鼠,无菌条件下分离海马组织,制成细胞悬液,转入培养瓶中培养。7-8d传代一次。将实验组分两组（缺氧组、缺氧-复氧组）,用CoCl2预处理,制备模拟缺氧模型。

嗅鞘细胞与神经干细胞共培养后增殖及向神经元的分化

背景:影响神经干细胞增殖分化的外在因素包括细胞因子和微环境,嗅鞘细胞能分泌多种细胞因子,与神经干细胞共培养时改变其微环境。目的:观察不同浓度嗅鞘细胞对神经干细胞增殖及分化的影响。方法:体外分别培养Wistar大鼠神经干细胞和嗅鞘细胞,5×107L-1神经干细胞分别和1×107L-1,1×109L-1,1×1011L-1嗅鞘细胞共培养,同时设立正常对照组,不加嗅鞘细胞。倒置荧光显微镜下观察神经干细胞增殖情况,诱导7d后行NSE免疫细胞化学染色,计算阳性细胞/细胞总数得出阳性细胞百分比。结果与结论:①3种浓度嗅鞘细胞与神经干细胞共培养3d后,均促进了神经干细胞增殖,以1×109L-1嗅鞘细胞共培养组作用最显著,明显优于1×107L-1嗅鞘细胞组、1×1011L-1嗅鞘细胞组。②神经干细胞与1×109L-1嗅鞘细胞共培养7d后,神经干细胞分化为神经元样细胞的百分比最高,与正常对照组相比差异有显著性意义(P<0.01)。

缺血性脑卒中患者经彩超检测MCA血流速度及脉动指数的临床效果研究

缺血性脑卒中发病率较高，且常伴有认知功能损害（Post stroke cognitive impairment，PSCI）［1］。文献报道显示［2］：缺血性脑卒中患者认知功能损害将对患者生活质量产生影响，严重者甚至演变为痴呆。对于血管性认知功能缺损（VCI）评估主要根据患者临床表现、影像学改变诊断为主，该方法虽然能评估患者认知功能，但是对于患者预后判断价值有限［3，4］。近年来，彩超检测MCA血流速度及脉动指数在部分缺血性脑卒中患者中得到应用，且效果理想［5］。为了探讨彩超检测MCA血流速度及脉动指数在缺血性脑卒中患者中的临床效果。选取2015年1月-2016年1月医院诊治的缺血性脑卒患者50例，报道如下。

TCD联合DSA在脑卒中缺血早期诊断中的效果观察

研究表明,我国脑血管疾患者近几年来日益增多,成为一种多发的常见的疾病,严重者可以造成死亡和致残[1],其中,缺血性脑血管疾病占到了大约2/3的比例。本研究通过对来我院患者进行颅脑多普勒彩超检查,确诊其为颅脑内动脉闭塞或狭窄,之后再通过数字减影血管造影技术检查,对两项结果相关数据进行比对研究,分析其不同特点和应用价值,以此达到正确诊疗缺血性脑血管疾病的目的。现将有关研究情况总结如下。

阿尔茨海默病模型大鼠海马组织可塑性变化及其对谷氨酸受体与相关蛋白的影响

目的探讨阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织可塑性的变化及对谷氨酸受体与相关蛋白的影响。方法 50只健康雄性SD大鼠随机分为AD模型组和对照组,每组25只。AD模型组双侧海马注射Aβ_(1~42),利用水迷宫实验进行入组鼠筛选,建立AD大鼠模型,在基线记录维持40 min后给予能诱发长时程增强(LTP)的高频刺激,记录f EPSP,采用经典的蔗糖密度梯度离心来提取突触小体、支架蛋白和Ca MKⅡα,分析AD模型大鼠海马组织可塑性变化及对谷氨酸受体与相关蛋白的影响。结果高频刺激能诱导LTP持续数小时之久。实验中通过刺激海马区侧支旁通路,在CA1区辐射层记录兴奋性突出后场电位,结果显示:海马区组织可塑性变化产生LTP并不依赖于NRB2活性;AD模型组海马区内谷氨酸受体及相关蛋白水平含量显著高于对照组(P<0.05)。结论采用水迷宫实验能成功建立大鼠AD模型,且海马组织可塑性变化对谷氨酸受体与相关蛋白能产生明显的影响,海马学习记忆机制参与成瘾和戒断引起的行为适应性变化。

CBL教学模式在脑血管病教学中的应用价值分析

目的分析CBL教学模式在脑血管病教学中的应用价值。方法选取我校内科专业两个班共100名学生进行研究,分成对照组与研究组,每组各50名,对照组采取传统教学模式,研究学生采取CBL教学模式;在开课后进行统一考试,对两组学生成绩进行比较,同时通过问卷调查对两组学生进行教学满意度调查,统计结果并进行对比分析。结果研究组综合成绩和教学满意度明显优于对照组,差异明显,P<0.05。结论 CBL教学模式能够有效的激发学生对脑血管病学习的兴趣,提升其治疗实际脑血管病的综合能力,CBL教学模式适合脑血管病教学的开展,教学效果非常理想,值得在脑血管病教学中应用。

蒙特利尔认知量表和MMSE量表在阿尔茨海默病筛查中的比较与应用

阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease，AD）又称老年性痴呆，是一种神经系统退行性疾病，尚无特异的早期诊断标志。神经心理学量表主要应用在老年痴呆筛查工作中，是高级神经功能受损诊断、评估和康复的重要依据。蒙特利尔认知评估（MontrealCognitiveAssessment，MoCA）是根据临床经验并参考简明智能量表（minimentalstateexamination，MMSE）制定，

急性脑血管病合并癫痫的临床治疗

目的探究对急性脑血管合并癫痫的患者进行治疗的措施及效果。方法选择58例急性脑血管病合并癫痫患者作为观察组,随机选取同时期未发生癫痫的急性脑血管病患者58例作为对照组。两组患者均给予常规脑血管病的基础治疗,在此基础上,观察组患者依据其出现癫痫的严重状况及类型制定癫痫治疗方案。比较两组患者的临床特点以及治疗疗效。结果观察组患者死亡率为5.2%,对照组患者死亡率为6.9%,两组患者死亡率比较差异无统计学意义(P>0.05);在进行治疗2周后,对照组患者神经功能缺损评分为(20.48±4.23)分,观察组患者为(37.58±5.74)分,观察组患者神经功能缺损评分显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论急性脑血管病是导致癫痫发病的一个重要原因,及时有效的对患者进行抗癫痫的治疗能够有效缓解患者病情,同时改善患者的预后。

经颅多普勒超声诊断脑梗死的临床价值分析

目的研究经颅多普勒超声诊断脑梗塞的临床价值。方法选取2016年4—7月我院收治的84例脑梗塞患者进行对比分析,随机将患者分成对照组和研究组,每组42例;研究组脑梗塞患者采用经颅多普勒超声(TCD)检查方式诊断,对照组患者采用脑电图(EEG)检查方式诊断。结果对脑梗死患者使用经颅多普勒超声(TCD)检查方式的诊断准确率明显比使用脑电图检查方式诊断的准确率高,差异明显(P<0.05)。结论经颅多普勒超声诊断脑梗塞的准确率高于常规的脑电图检查,在临床上可以推广。