同时检测动物性食品中6种β-受体激动剂的化学发光免疫分析方法的建立

建立同时测定动物性食品中6种β-受体激动剂(克伦特罗、西马特罗、溴布特罗、班布特罗、马布特罗和西布特罗)残留的化学发光免疫分析方法。结果表明:6种β-受体激动剂在猪肉样品中的检测限(limit of detection,LOD)分别为0.48、1.96、0.41、0.29、0.42、0.87μg/kg,在羊肉样品中的LOD分别为0.37、1.78、0.43、0.38、0.31、0.96μg/kg;样本的平均添加回收率为66.7%~106.4%,且批内、批间相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于15%。在最优条件下,西马特罗的50%抑制质量浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为0.254μg/L,克伦特罗、溴布特罗、班布特罗、马布特罗和西布特罗与西马特罗的交叉反应率分别为438.0%、470.0%、434.0%、561.0%和198.0%。同时,比较化学发光免疫分析方法和液相色谱-串联质谱(liquid chromatographic-tandem mass spectrometric,LC-MS/MS)法的检测结果,表明化学发光免疫分析方法具有较高的准确度和可靠性。因此,化学发光免疫分析方法能够实现动物性食品中多种β-受体激动剂药物残留的快速检测,且灵敏度较高。

白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子PCNA和TGFα表达的影响

本试验利用猪轮状病毒和大肠杆菌混合感染建立腹泻模型,通过免疫组织化学方法研究白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子蛋白表达的影响,揭示白头翁素防治腹泻的黏膜修复机制。结果显示:小鼠腹泻96h内,自愈组、治疗组和预防组黏膜修复因子PCNA和TGFα的蛋白表达量均有所升高,其中预防组显著高于空白对照组(P<0.05),腹泻96h后,表达量逐渐下降直至正常。结果表明,白头翁素防治小鼠轮状病毒和大肠杆菌混合感染性腹泻的显著效果可能与其调节黏膜修复因子PCNA和TGFα的表达有关,从而促进了肠黏膜的修复。

羊骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的制备及其特性

制备抗羊骨骼肌肌钙蛋白T(skeletal muscle troponin T,sTnT)的单克隆抗体,评价单抗的特性。通过煮沸提取、切胶纯化制备sTnT,融合后获得分泌抗羊sTnT的杂交瘤细胞株,用酶联免疫吸附测定法检测单抗效价、亚型、特异性等。结果表明:筛选后获得3株单克隆抗体(2E11、3D3、4C2),其中4C2特异性好,效价达到15.12×10^5以上,为IgG1亚型,亲和常数(K_a)为1.1×10^9 L/mol;免疫印迹结果显示,该单抗能与牛、羊的骨骼肌提取物反应,与鸡、鸭的骨骼肌提取物无明显反应,表明4C2可以用于区分反刍动物和禽类的骨骼肌组织。

饲料中地西泮残留的酶联免疫检测试剂盒研制

为快速、简便地检测饲料中地西泮的残留,应用间接竞争酶联免疫原理研制出饲料中地西泮残留检测试剂盒,并对其性能进行评价。结果:试剂盒的灵敏度为0.1μg/L,对配合料、浓缩料、预混料的检测限分别为10、20、20μg/kg;平均添加回收率为71.5%～94.2%,批内、批间相对标准偏差均小于15%;与地西泮结构类似物无交叉反应。结果表明:研制的试剂盒检测快速、灵敏度高、特异性强,适用于从源头上对动物性食品中的地西泮残留进行检测监管。