甲磺酸伊马替尼增强ALA-PDT对皮肤基底细胞癌细胞杀伤作用研究

目的:探讨5-氨基酮戊酸(ALA)和/或甲磺酸伊马替尼对HaCaT角质形成细胞、基底细胞癌HSC-2内卟啉含量及ABCG2蛋白表达的影响,为进一步提高PDT的临床疗效提供理论依据。方法:本研究采用表皮HaCaT角质形成细胞、HSC-2基底细胞癌细胞系,在有或无甲磺酸伊马替尼的情况下,用ALA孵育这两种细胞。采用Western-Blotting方法测定ABCG2蛋白含量,ELISA方法检测细胞内卟啉物质的含量,并用共聚焦激光扫描显微镜观察细胞内卟啉物质的定位。结果:研究发现在HaCaT细胞和HSC-2细胞中,与单一ALA与HSC-2细胞作用相比,ALA与甲磺酸伊马替尼联合作用可提高原卟啉物质在HSC-2细胞内的蓄积作用,增强PDT诱导细胞死亡的作用,同时与单一ALA与HSC-2细胞作用相比,ALA与甲磺酸伊马替尼联合作用可显著降低ABCG2蛋白的表达,增强PDT治疗对HSC-2细胞的杀伤作用。结论:本研究揭示了ALA-PDT治疗基底细胞癌敏感性降低的可能原因,为采用ALA-PDT联合甲磺酸伊马替尼进一步提高PDT治疗基底细胞癌的疗效提供理论基础。

ABCG2抑制剂对ALA-PDT诱导皮肤癌细胞凋亡的影响

目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette transporter group 2,ABCG2)抑制剂Ko-143对5-氨基乙酰丙酸-光动力疗法(5-aminolaevulinic acid-photodynamic therapy,ALA-PDT)诱导人皮肤基底癌细胞TE354.T和皮肤鳞癌细胞SCL-1凋亡的影响。方法体外培养TE354.T和SCL-1细胞,分为对照组、ALA-PDT组(2 mmol·L^(-1)5-ALA+PDT)、Ko-143组(10μmol·L^(-1)Ko-143)和ALA-PDT+Ko-143组(2 mmol·L^(-1)5-ALA+10μmol·L^(-1)Ko-143+PDT),应用MTT法检测细胞增殖,应用流式细胞术检测细胞凋亡,应用ELISA法检测细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性和丙二醛(malonydialdehyed,MDA)含量,应用蛋白印迹(Western blot)法检测细胞中原卟啉IX(protoporphyrin IX,PPIX)、ABCG2、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白的表达。结果与对照组相比,ALA-PDT组和Ko-143组TE354.T、SCL-1细胞增殖抑制率、凋亡率、细胞中MDA的含量及PPIX和Cleaved caspase-3蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05),细胞中GSH-Px的活性及Bcl-2/Bax蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05),ALA-PDT组TE354.T和SCL-1细胞中ABCG2表达水平的差异均无统计学意义(P>0.05),Ko-143组TE354.T和SCL-1细胞中ABCG2蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05);与ALA-PDT组相比,ALA-PDT+Ko-143组TE354.T、SCL-1细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞中MDA含量、PPIX和Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞中GSH-Px活性及细胞中ABCG2和Bcl-2/Bax蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。结论Ko-143可抑制ABCG2的表达,导致PPIX蛋白在细胞中的蓄积水平升高,进而提高ALA-PDT诱导TE354.T、SCL-1细胞氧化应激损伤和凋亡水平。

复方甘草酸苷、地塞米松对毛乳头细胞活性影响的研究

目的:探讨复方甘草酸苷和地塞米松对体外培养的人毛乳头细胞增殖活性的影响。方法:二步酶消化法分离培养毛乳头细胞,采用免疫组化法对细胞α-平滑肌肌动蛋白进行染色鉴定。噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度复方甘草酸苷、地塞米松对人毛乳头细胞增殖的影响。结果:与空白对照组比,复方甘草酸苷在10、20、50mg/L浓度时可明显刺激毛乳头细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05),在0.5～20mg/L范围内刺激作用逐渐增强。与空白对照组比,地塞米松在1、2.5mg/L浓度时可明显刺激毛乳头细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05),在0.5～2.5mg/L范围内刺激作用逐渐增强。复方甘草酸苷组较地塞米松组细胞生长状态好,胞浆更为丰富。结论:复方甘草酸苷和地塞米松在抗炎、免疫调节的同时还可能通过调节毛乳头细胞的活性诱导毛发生长。在治疗脱发性疾病方面,复方甘草酸苷可能比传统的糖皮质激素更有优势。

恶性萎缩性丘疹病1例

患者男,50岁,全身泛发萎缩性丘疹1年,合并肠穿孔、腹膜炎,死亡。

胰岛素样生长因子1和成纤维细胞生长因子7与毛乳头细胞的生长

背景:毛乳头细胞凝集性生长与其诱导毛发生长有关。毛乳头细胞分泌的多种生长因子如胰岛素样生长因子1、成纤维细胞生长因子7可能对毛乳头细胞生长具有重要的影响。目的:观察正常人毛乳头细胞的增长与生长方式与胰岛素样生长因子1、成纤维细胞生长因子7的相关性。方法:采用二步酶消化法分离培养毛乳头细胞,免疫组化法和流式细胞仪分别检测两种生长因子在凝集性与非凝集性生长的毛乳头细胞中的表达,MTT法检测2.5～100μg/L质量浓度胰岛素样生长因子1对人毛乳头细胞增殖的影响。结果与结论:胰岛素样生长因子1与成纤维细胞生长因子7均表达于细胞胞浆,但表达量随时间减弱,其中第3代明显比第9代毛乳头细胞中成纤维细胞生长因子7的表达强烈(P<0.05)。与对照组相比,不同质量浓度胰岛素样生长因子1均有明显促进毛乳头细胞增殖的作用(P<0.05),其中以2.5μg/L最为显著。提示毛乳头细胞的凝集性生长状态的改变可能与胰岛素样生长因子1、成纤维细胞生长因子7表达下降有关,胰岛素样生长因子1可明显刺激毛乳头细胞增殖。

血管内皮生长因子对毛乳头细胞生长特性的影响

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)对体外培养的毛乳头细胞生长的影响。方法取神经外科手术患者头皮,采用两步酶消化分离法分离人毛乳头细胞,取对数生长期的第3代人毛乳头细胞,调整细胞浓度为1×107/L,将实验分为20μg/L的血管内皮生长因子组及只加培养基的空白对照组。结果低传代培养的毛乳头细胞VEGF表达较强,随着传代次数增多,表达逐渐减弱,血管内皮生长因子组与空白对照组相比,细胞生长曲线停滞期减少,提前进入对数生长期,VEGF组与空白对照组的吸光度值相比较明显升高(P=0.002)。结论 VEGF可以促进体外培养的人毛乳头细胞的增殖。

乳腺癌组织中FOXM1和PLK1的表达及意义

目的探讨叉头框转录因子M1(FOXM1)及Polo样激酶1(PLK1)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测FOXM1及PLK1蛋白在803例乳腺浸润性导管癌和乳腺癌旁组织中的表达情况及其与乳腺癌组织临床病理特征间的关系。结果 FOXM1及PLK1在乳腺浸润性导管癌组织中的阳性表达率分别为59.78%(480/803)和27.90%(224/803),显著高于其在乳腺癌旁组织中的表达(29.89%,0),差异具有统计学意义(χ~2=145.011,χ~2=260.307,P=0.000)。FOXM1及PLK1蛋白的表达与乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移及临床分期相关,而与肿瘤大小无关,且二者表达具有正相关关系(r=0.414,P<0.01)。结论 FOXM1及PLK-1可能协同参与了乳腺癌的发生、发展,并可能成为乳腺癌预后评估的重要指标。

干细胞因子对体外培养毛乳头细胞生长特性的影响

目的观察体外培养传代的毛乳头细胞表达干细胞因子(stem cell factor,SCF)情况;并观察SCF对体外培养的毛乳头细胞生长曲线的影响。方法应用免疫组化及流式细胞技术测量不同代次的毛乳头细胞SCF的表达变化情况,采用MTT比色法观察SCF对毛乳头细胞生长增殖的影响。结果低传代培养的毛乳头细胞SCF的表达较强,随着传代次数的增多,表达逐渐减弱。SCF组与对照组相比,细胞生长曲线的停滞期减少,提前进入对数生长期,并且OD值与对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SCF可以促进体外培养的人毛乳头细胞的增殖。

心理干预联合复方甘草酸苷治疗斑秃疗效观察

斑秃（alopecia areata,AA）是一种局限性斑片状脱发,可自行缓解,也可复发。130岁前发病的患者占66%,40岁以后发病者仅占20%。2斑秃的病因及发病机制十分复杂,一般认为与自身免疫、遗传因素及心理因素密切相关。研究发现心理因素是诱发及加重病情的首要原因,3目前斑秃的治疗主要以药物及物理治疗为主,心理干预治疗斑秃疗效评估的文章较少,笔者采用心理干预联合复方甘草酸苷治疗斑秃,取得了较好效果,现报道如下。

保湿剂并用糖皮质激素治疗异位性皮炎的疗效观察

目的:研究保湿剂对外用糖皮质激素治疗异位性皮炎疗效的影响。方法:通过随机对照临床研究,采用湿疹面积及严重度指数评分法,对外用糖皮质激素和保湿剂治疗45例轻中度异位性皮炎患者的临床疗效进行评估。结果:与单独外用糖皮质激素或保湿剂相比,联合外用糖皮质激素加保湿剂治疗轻、中度异位性皮炎,较单用糖皮质激素疗效显著,单独外用保湿剂可明显减轻轻中度异位性皮炎患者的临床症状。结论:外用保湿剂能增强局部糖皮质激素的疗效,单独外用保湿剂治疗异位性皮炎可获得与糖皮质激素相近的疗效。

变应性鼻炎和慢性荨麻疹的变应原检测分析

目的分析变应性鼻炎患者和慢性荨麻疹过敏原检测结果。方法对入选的变应性鼻炎患者和慢性荨麻疹患者(各100例)进行变应原皮内试验,对检测结果进行分析。结果变应性鼻炎患者吸入组阳性率为92.00%,食物组阳性率60.00%,差异有统计学意义(P<0.05);慢性荨麻疹患者吸入组阳性率为62.00%,食物组阳性率61.00%,差异无统计学意义(P>0.05);变应性鼻炎与慢性荨麻疹患者的吸入组阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),而食物组阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论变应性鼻炎主要由吸人性变应原致敏,而慢性荨麻疹过敏原复杂多样。

抗核小体抗体检测在系统性红斑狼疮中的临床应用

目的探讨抗核小体抗体(AnuA)在系统性红斑狼疮(SLE)中的临床应用。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测187例SLE及84例其他风湿性疾病患者血清AnuA和抗dsDNA抗体水平,采用免疫印迹法检测抗Sm抗体。结果 AnuA诊断SLE的敏感性和特异性分别为72.19%和97.62%,其敏感性显著高于抗dsDNA抗体、抗Sm抗体(P<0.05),其特异性与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体差异无统计学意义(P>0.05);联合检测AnuA、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体诊断SLE的敏感性达95.72%。SLE患者AnuA阳性组与阴性组相比,阳性组患者口腔溃疡、关节疼痛发生率更高,24h尿蛋白异常和补体C3降低(P<0.05)。结论 AnuA对SLE有较高敏感性和特异性,是诊断SLE最有价值的指标之一;联合检测AnuA、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体可提高SLE的诊断;AnuA可能与SLE疾病活动性相关。

皮肌炎回顾性分析

目的本研究主要阐述皮肌炎与恶性肿瘤相关的临床因素。方法对82例皮肌炎患者进行回顾性分析。结果 82例患者中,18例检查出恶性肿瘤,其中最常见的是鼻咽癌,其他肿瘤包括胃癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌和结肠癌。与不合并恶性肿瘤组相比,合并恶性肿瘤组患者年龄更大,男性更多见,出现恶性红斑多见。2组患者的临床、血清学及实验室检查恶性肿瘤相关危险因素差异无统计学意义(P>0.05)。结论在成人皮肌炎患者中,尤其是老年男性伴恶性红斑皮损患者,应积极筛查肿瘤。

无痛乳管镜检查术的应用观察

目的评价无痛乳管镜检查术临床应用的可行性、安全性。方法对2010年6月至2011年12月在丙泊酚静脉麻醉复合利多卡因表面麻醉下完成的52例无痛乳管镜检查术的资料进行回顾性分析,统计检查成功率、患者舒适率(对检查过程感觉舒适无痛苦的例数/接受检查例数)、患者依从性(如有必要愿意复查的例数/接受检查例数)、并发症及其发生率。结果检查成功率为100%,患者舒适率为100%,患者依从性为98.1%,常见并发症及其发生率为呼吸抑制(21.2%)、血压下降(15.4%)、心律失常(7.7%)、躁动(3.8%)。结论在丙泊酚静脉麻醉复合利多卡因表面麻醉下的无痛乳管镜检查术安全、舒适,麻醉管理简单、方便,可以提高检查成功率和患者依从性,尤其适用于精神过度紧张不能合作、对疼痛敏感以及高龄、合并严重心脑血管疾病的患者,值得在临床上推广应用。

血管淋巴样增生伴嗜酸性粒细胞增多症临床病理观察

目的:探讨血管淋巴样增生伴嗜酸性粒细胞增多症(angiolymphoid hyperplasia with eosinopilia,ALHE)的临床病理学特征、免疫组织化学染色(immunohistochemical stain,IHC)及鉴别诊断。方法:对3例ALHE进行临床病理分析及免疫组化研究,并进行文献复习。结果:2例ALHE为女性患者,1例为男性患者,病变位于头面部真皮内,组织形态以小到中等大小血管增生为主,血管内衬胞浆丰富的上皮样内皮细胞,血管周围见大量炎细胞浸润。免疫组化染色显示CD34、CD31、CD3阳性,CD20及CK阴性。结论:ALHE是一种少见的、良性的血管瘤,诊断主要依靠特征性组织学特点。

针刺配合枇杷清肺饮加减治疗痤疮40例

目的:探讨中西医联用治疗痤疮的临床疗效。方法:将120位痤疮患者随机分为两组,对照组内服丹参酮胶囊,治疗组口服西药同西药组,中药内服枇杷清肺饮加减(枇杷叶、桑白皮、黄芩、夏枯草、连翘、金银花、海浮石、甘草),且每日常规针灸合谷、三阴交、血海等穴位,观察两组临床疗效。结果:对照组总有效率61.7%;治疗组总有效率88.3%,两组相比,有明显差异有统计学意义。结论:本法治疗本病可清热凉血,提高临床治愈率。

皮疹泛发全身的Sweet综合征1例

患者女，23岁。因全身起斑块伴瘙痒、疼痛4d，于2010年8月24日来我院就诊。患者7d前鼻塞、流涕，未予治疗，4d前上下肢出现红斑，自觉瘙痒、疼痛，皮疹逐渐增多，扩展至躯干及上肢，就诊前2h前下肢、背部出现水疱、血疱。起病后无畏寒发热，关节肿痛等不适，一般情况好，既往患系统性红斑狼疮2年，目前病情稳定。 体格检查：T37．0℃，系统检查未见明显异常。皮肤科检查：躯干、四肢皮肤可见大量红色、暗红色水肿性斑块、结节（图1），

兄弟同患光泽苔藓

光泽苔藓（LN）是一种慢性丘疹性鳞屑性疾病，好发于儿童及青少年。本病家族发病少见，我科诊治2例兄弟同患LN，现报告如下。