AIM2、Lp-PLA2、UCH-L1在急性脑梗死中的表达及预测价值研究

目的 探讨外周血单个核细胞黑色素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)表达,血清脂蛋白相关磷酯酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)、泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin C-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)水平与急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)病情以及神经功能损伤预后的关系,分析AIM2、Lp-PLA2、UCH-L1预测ACI患者神经功能损伤预后的价值。方法 选择我院神经内科收治的150例ACI患者(ACI组)和72例门诊体检志愿者(对照组),根据病灶大小将ACI组分为大梗死组(42例)、小梗死组(61例)、腔隙性梗死组(47例),根据美国国立研究院脑卒中评定量表(National Institute of Stroke Rating Scale,NIHSS)评分分为轻度损伤组(38例)、中度损伤组(59例)、重度损伤组(53例),根据改良RANKIN量表(modified RANKIN scale,MRS)分为预后良好组(91例)、预后不良组(59例)。检测外周血单个核细胞中AIM2表达,血清Lp-PLA2、UCH-L1水平,分析AIM2、Lp-PLA2、UCH-L1预测ACI患者神经功能损伤预后的价值。结果 ACI组外周血单个核细胞AIM2表达,血清Lp-PLA2、UCH-L1水平均高于对照组(P<0.05),且大梗死组高于小梗死组和腔隙性梗死组(P<0.05),重度损伤组高于中度损伤组和轻度损伤组(P<0.05),预后不良组高于预后良好组(P<0.05)。联合AIM2、Lp-PLA2、UCH-L1预测ACI患者神经功能损伤预后的曲线下面积为0.864,高于单独AIM2、Lp-PLA2、UCH-L1单项预测的0.695、0.748、0.692(Z=3.922、2.953、3.983,P<0.05)。结论 ACI患者外周血单核细胞中AIM2表达,Lp-PLA2、UCH-L1水平均增高,且与脑梗死面积、神经缺损程度和不良神经功能损伤预后有关,三者联合在神经功能损伤预后评估中具有较高的价值。

缺氧诱导的结直肠癌外泌体通过激活PTEN/PI3Kγ信号通路介导巨噬细胞极化

目的:探究缺氧条件下,结直肠癌细胞外泌体对巨噬细胞极化的影响及机制。方法:差速离心法提取正常条件下和缺氧条件下结直肠癌细胞HT-29所分泌的外泌体(HT-29 N-exo和HT-29 H-exo),透射电镜和Western blot鉴定外泌体,荧光显微镜下观察外泌体的摄取。将U937细胞与100 ng/mL的PMA共孵育的同时分别与1μg/mL的HT-29 N-exo和HT-29 H-exo以及等体积的PBS共孵育,记为PBS组、HT-29 N-exo组、HT-29 H-exo组。qRT-PCR检测各组细胞CD163、IL-10、IL-1Rα、TGF-β1、CCL2、TNF-αmRNA的表达,Elisa检测各组细胞IL-10和TNF-α分泌,流式细胞术鉴定各组细胞CD163和CD11b表达,Western blot检测各组细胞PTEN/PI3Kγ信号通路激活情况。结果:差速离心法所提取的外泌体符合其结构和生物学特征,并且可被U937细胞摄取;相比于HT-29 N-exo组,HT-29 H-exo组细胞CD163、IL-10、IL-1Rα、TGF-β1、CCL2表达显著增加(P<0.05),IL-10分泌显著增加,TNF-α表达以及分泌显著减少(P<0.01),CD163+CD11b+巨噬细胞数显著增加(P<0.001),PTEN/PI3Kγ信号通路显著激活(P<0.001)。结论:缺氧条件下结直肠癌细胞外泌体能够显著促进巨噬细胞M2型极化,其机制为激活PTEN/PI3Kγ信号通路。