人羊膜间充质干细胞移植联合百令胶囊改善大鼠肾功能及血液高凝状态

背景:百令胶囊的主成分是虫草酸,主要功效为免疫调节、改善血脂和保护肾脏等。人羊膜间充质干细胞是一种比骨髓间充质干细胞分化潜能更强的干细胞,但是目前其对肾损伤后的修复及改善尚缺乏研究。目的:观察人羊膜间充质干细胞移植联合百令胶囊对肾病综合征大鼠大鼠肾功能及凝血的影响。方法:体外培养人羊膜间充质干细胞,并制备其细胞悬液并进行CM-Dil标记。50只SD大鼠随机分为5组(n=10)。正常组不予任何处理;余40只大鼠静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型,均分为4组,模型组不作处理,人羊膜间充质干细胞组连续3 d尾部静脉注射干细胞、百令胶囊组连续12周灌胃百令胶囊,联合组连续3 d尾静脉注射人羊膜间充质干细胞,同时连续12周灌胃百令胶囊。实验12周时检测各组大鼠血肌酐、尿素氮、凝血指标、24 h尿蛋白水平;苏木精-伊红染色观察肾组织病理变化;荧光显微镜观测CM-Dil标记人羊膜间充质干细胞的存活及分布;TUNEL法检测肾脏细胞凋亡情况。结果与结论:(1)人羊膜间充质干细胞组、百令胶囊组血肌酐和尿素氮、24 h尿蛋白水平高于联合组,明显低于模型组,大鼠的血液高凝状态有所缓解,差异有显著性意义(P<0.05);联合组凝血指标低于人羊膜间充质干细胞组、百令胶囊组(P<0.05);(2)模型组的肾脏病理没有改善甚至恶化,联合组的病理改善情况优于人羊膜间充质干细胞组和百令胶囊组;(3)荧光显微镜观测CM-Dil标记的人羊膜间充质干细胞,联合组多于人羊膜间充质干细胞组;(4)模型组凋亡细胞面积最大,人羊膜间充质干细胞组、百令胶囊组可见细胞凋亡,联合组细胞凋亡面积较小,组间比较差异均有显著性意义(P<0.05);(5)结果提示,人羊膜间充质干细胞移植联合百令胶囊能够改善肾病综合征大鼠的肾功能及血液高凝状态,减少蛋白尿程度,改善组织病理损伤程度,减少肾组织细胞凋亡。

脂肪间充质干细胞移植联合人工虫草多糖改善肾病综合征的高凝血状态及肾功能

背景:临床上常将人工虫草多糖作为肾病综合征的辅助药。采用阿霉素建立SD大鼠肾病综合征模型是经典的实验性肾病综合征模型之一,该模型的临床表现及病理变化均类似于人类微小病变肾病。目的:观察人工虫草多糖与脂肪间充质干细胞联合应用对肾病综合征大鼠肾功能及凝血的影响。方法:体外培养脂肪间充质干细胞制备细胞悬液,并对悬液进行PKH26标记。50只SD大鼠随机取10只为正常组(不予任何处理),余40只SD大鼠静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型,随机均分为4组,模型组不作处理;脂肪间充质干细胞组尾部静脉注射脂肪间充质干细胞连续3 d;人工虫草多糖组灌胃人工虫草多糖连续12周;联合组连续3 d尾静脉注射干细胞,同时灌胃人工虫草多糖连续12周。实验12周测定各组大鼠24 h尿蛋白定量、血清血脂指标、肌酐、尿素氮及凝血指标变化;光镜下观察双肾组织病理学变化;荧光显微镜观测PKH26标记的脂肪间充质干细胞存活及分布情况,采用RT-PCR技术检测肾组织中Hpa基因表达情况。结果与结论:(1)检测指标:脂肪间充质干细胞组、人工虫草多糖组及联合组的24 h尿蛋白定量及血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、肌酐、尿素氮水平均明显低于模型组(P<0.05),而血清总蛋白、白蛋白、高密度脂蛋白水平则明显高于模型组(P<0.05)。联合组各项指标与脂肪间充质干细胞组及人工虫草多糖组比较,差异有显著性意义(P<0.05);(2)血液高凝状态:脂肪间充质干细胞组、人工虫草多糖组大鼠的血液高凝状态较模型组明显缓解,联合组进一步缓解(P<0.05);(3)双肾组织病理变化:联合组的双肾组织病理改善情况明显优于脂肪间充质干细胞组和人工虫草多糖组,脂肪间充质干细胞组和人工虫草多糖组较模型组稍有改善,但不及联合组;(4)荧光显微镜观测PKH26标记的脂肪间充质干细胞:联合组多于脂肪间充质干细胞组及人工虫草多糖组;(5)Hpa基因表达:模型组较正常组明显增加,脂肪间充质干细胞组、人工虫草多糖组较模型组减少,联合组明显减少(P<0.05);(6)结果提示,脂肪间充质干细胞移植联合人工虫草多糖能够改善肾病综合征大鼠的肾功能及血液高凝状态,减轻肾组织的病理学损害。