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基于iTRAQ蛋白质组学的OsAAP6不同转基因水稻胚乳差异蛋白筛选
1
作者
彭波
孙晓宇
+7 位作者
邱静
彭娟
赵强
孙艳芳
宋晓华
张志国
周伟
汪全秀
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期1060-1069,共10页
【目的】基于iTRAQ蛋白质组学筛选不同OsAAP6转基因水稻胚乳的差异蛋白,明确胚乳中的差异蛋白,以期为后续利用OsAAP6基因提升稻米的营养品质提供理论依据。【方法】以水稻OsAAP6超量表达阳性[OX(+)]和阴性对照[OX(-)]材料及OsAAP6互补...
【目的】基于iTRAQ蛋白质组学筛选不同OsAAP6转基因水稻胚乳的差异蛋白,明确胚乳中的差异蛋白,以期为后续利用OsAAP6基因提升稻米的营养品质提供理论依据。【方法】以水稻OsAAP6超量表达阳性[OX(+)]和阴性对照[OX(-)]材料及OsAAP6互补表达阳性[ZpZc(+)]和阴性对照[ZpZc(-)]为试验材料,采用同位素标记相对与绝对定量(iTRAQ)技术对其进行蛋白质组学检测分析,并利用考马斯亮蓝G-250法对其胚乳中的4类储藏蛋白(谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白和球蛋白)进行含量检测。【结果】与ZpZc(-)和OX(-)转基因阴性对照相比,ZpZc(+)和OX(+)转基因阳性胚乳中OsAAP6基因的表达量分别在P<0.01和P<0.001水平极显著升高。与ZpZc(-)和OX(-)转基因阴性对照相比,ZpZc(+)和OX(+)转基因阳性水稻共有58种差异蛋白共同上调或下调表达,其中有39种蛋白显著增加(P<0.05,下同),有19种蛋白显著降低。在39种共同上调表达的蛋白中有27种蛋白参与水稻种子储藏底物的合成与积累,且有16种上调表达蛋白参与种子储藏蛋白的代谢和积累。与ZpZc(-)和OX(-)转基因阴性对照相比,ZpZc(+)和OX(+)转基因阳性水稻胚乳中的谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白和球蛋白含量均显著增加。【结论】OsAAP6基因上调表达,能抑制与支链淀粉合成相关蛋白的积累,但能促进其胚乳中储藏蛋白的积累,进而提高胚乳中谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白和球蛋白含量,可用于高蛋白水稻新品种的分子育种和遗传改良。
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关键词
水稻
ITRAQ
蛋白质组学
OsAAP6基因
差异蛋白
营养品质
下载PDF
职称材料
水稻qPC1基因启动子功能性变异位点的鉴定及其转运功能
2
作者
彭波
邱静
+11 位作者
彭娟
何璐璐
孔冬艳
孙晓宇
刘岩
阿新祥
靳可心
孙艳芳
庞瑞华
周伟
赵金会
汪全秀
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2023年第12期2573-2582,共10页
【目的】鉴定水稻种子中蛋白质含量的正调控基因qPC1启动子的功能性变异位点,开发qPC1基因分子标记,并解析其转运功能,为阐明qPC1基因的生物学功能及其利用qPC1基因进行分子育种提供理论依据。【方法】采用基因定点突变、水稻原生质体...
【目的】鉴定水稻种子中蛋白质含量的正调控基因qPC1启动子的功能性变异位点,开发qPC1基因分子标记,并解析其转运功能,为阐明qPC1基因的生物学功能及其利用qPC1基因进行分子育种提供理论依据。【方法】采用基因定点突变、水稻原生质体瞬时转化技术和双荧光素酶报告法鉴定qPC1基因启动子功能性变异位点,利用缺陷型酵母互补试验以及水稻根部氨基酸的吸收试验解析qPC1的转运功能。【结果】相对于南洋占qPC1序列,珍汕97 qPC1启动子-7~-12 bp位置处6个碱基(CACAGA)的缺失将导致其启动子活性显著增加。对此设计对应的功能性分子标记PB13,并利用PCR技术在珍汕97与南洋占的重组自交系群体中进行验证。在缺陷型酵母互补试验中发现qPC1蛋白能够转运γ-氨基丁酸、瓜氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、精氨酸和谷氨酸等多种氨基酸,且发现qPC1能促进水稻根对多种氨基酸的吸收,并对苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、谷氨酸和酸性氨基酸具有较快的吸收与转运速率。【结论】水稻qPC1基因启动子区-7~-12 bp位置为其功能性变异位点,qPC1在酵母中能够参与多种氨基酸转运,且在水稻根中能促进氨基酸的吸收与转运,即qPC1蛋白可能是一种广谱性氨基酸转运蛋白。该试验结果为进一步全面阐明qPC1基因调控水稻种子中蛋白质含量的分子机制并利用qPC1基因进行优质水稻新品种的选育提供了重要信息。
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关键词
功能性位点
qPC1基因
转运功能
启动子
下载PDF
职称材料
题名
基于iTRAQ蛋白质组学的OsAAP6不同转基因水稻胚乳差异蛋白筛选
1
作者
彭波
孙晓宇
邱静
彭娟
赵强
孙艳芳
宋晓华
张志国
周伟
汪全秀
机构
信阳师范大学生命科学学院/大别山农业生物资源保护与利用研究院
信阳
市植保植检站
河南省科研平台服务中心
信阳
市
农业
科学
院
河南羚锐制药股份有限公司
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期1060-1069,共10页
基金
国家自然科学基金项目(U2004141)
河南省科技攻关项目(222102110141,222102110115,212102110249)。
文摘
【目的】基于iTRAQ蛋白质组学筛选不同OsAAP6转基因水稻胚乳的差异蛋白,明确胚乳中的差异蛋白,以期为后续利用OsAAP6基因提升稻米的营养品质提供理论依据。【方法】以水稻OsAAP6超量表达阳性[OX(+)]和阴性对照[OX(-)]材料及OsAAP6互补表达阳性[ZpZc(+)]和阴性对照[ZpZc(-)]为试验材料,采用同位素标记相对与绝对定量(iTRAQ)技术对其进行蛋白质组学检测分析,并利用考马斯亮蓝G-250法对其胚乳中的4类储藏蛋白(谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白和球蛋白)进行含量检测。【结果】与ZpZc(-)和OX(-)转基因阴性对照相比,ZpZc(+)和OX(+)转基因阳性胚乳中OsAAP6基因的表达量分别在P<0.01和P<0.001水平极显著升高。与ZpZc(-)和OX(-)转基因阴性对照相比,ZpZc(+)和OX(+)转基因阳性水稻共有58种差异蛋白共同上调或下调表达,其中有39种蛋白显著增加(P<0.05,下同),有19种蛋白显著降低。在39种共同上调表达的蛋白中有27种蛋白参与水稻种子储藏底物的合成与积累,且有16种上调表达蛋白参与种子储藏蛋白的代谢和积累。与ZpZc(-)和OX(-)转基因阴性对照相比,ZpZc(+)和OX(+)转基因阳性水稻胚乳中的谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白和球蛋白含量均显著增加。【结论】OsAAP6基因上调表达,能抑制与支链淀粉合成相关蛋白的积累,但能促进其胚乳中储藏蛋白的积累,进而提高胚乳中谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白和球蛋白含量,可用于高蛋白水稻新品种的分子育种和遗传改良。
关键词
水稻
ITRAQ
蛋白质组学
OsAAP6基因
差异蛋白
营养品质
Keywords
rice
iTRAQ
proteomics
OsAAP6 gene
differential proteins
nutritional qualityFoundation
分类号
S511.035.3 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
水稻qPC1基因启动子功能性变异位点的鉴定及其转运功能
2
作者
彭波
邱静
彭娟
何璐璐
孔冬艳
孙晓宇
刘岩
阿新祥
靳可心
孙艳芳
庞瑞华
周伟
赵金会
汪全秀
机构
信阳师范大学生命科学学院/大别山农业生物资源保护与利用研究院
信阳
市植保植检站
云南省
农业
科学
院
生物
技术与种质
资源
研究
所/
农业
部云南稻种
资源
观测实验站
出处
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2023年第12期2573-2582,共10页
基金
国家自然科学基金项目(U2004141,U1604110,31801332)
河南省高等学校青年骨干教师培养计划项目(2019GGJS162)
+2 种基金
河南省科技攻关项目(222102110141,222102110115,212102110249)
信阳市创新专项(20210007)
信阳师范学院2022年研究生科研创新基金项目(2022KYJJ066,2022KYJJ068)。
文摘
【目的】鉴定水稻种子中蛋白质含量的正调控基因qPC1启动子的功能性变异位点,开发qPC1基因分子标记,并解析其转运功能,为阐明qPC1基因的生物学功能及其利用qPC1基因进行分子育种提供理论依据。【方法】采用基因定点突变、水稻原生质体瞬时转化技术和双荧光素酶报告法鉴定qPC1基因启动子功能性变异位点,利用缺陷型酵母互补试验以及水稻根部氨基酸的吸收试验解析qPC1的转运功能。【结果】相对于南洋占qPC1序列,珍汕97 qPC1启动子-7~-12 bp位置处6个碱基(CACAGA)的缺失将导致其启动子活性显著增加。对此设计对应的功能性分子标记PB13,并利用PCR技术在珍汕97与南洋占的重组自交系群体中进行验证。在缺陷型酵母互补试验中发现qPC1蛋白能够转运γ-氨基丁酸、瓜氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、精氨酸和谷氨酸等多种氨基酸,且发现qPC1能促进水稻根对多种氨基酸的吸收,并对苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、谷氨酸和酸性氨基酸具有较快的吸收与转运速率。【结论】水稻qPC1基因启动子区-7~-12 bp位置为其功能性变异位点,qPC1在酵母中能够参与多种氨基酸转运,且在水稻根中能促进氨基酸的吸收与转运,即qPC1蛋白可能是一种广谱性氨基酸转运蛋白。该试验结果为进一步全面阐明qPC1基因调控水稻种子中蛋白质含量的分子机制并利用qPC1基因进行优质水稻新品种的选育提供了重要信息。
关键词
功能性位点
qPC1基因
转运功能
启动子
Keywords
Functional sites
qPC1 gene
Transport function
Promoter
分类号
S511.01 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于iTRAQ蛋白质组学的OsAAP6不同转基因水稻胚乳差异蛋白筛选
彭波
孙晓宇
邱静
彭娟
赵强
孙艳芳
宋晓华
张志国
周伟
汪全秀
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
水稻qPC1基因启动子功能性变异位点的鉴定及其转运功能
彭波
邱静
彭娟
何璐璐
孔冬艳
孙晓宇
刘岩
阿新祥
靳可心
孙艳芳
庞瑞华
周伟
赵金会
汪全秀
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2023
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