除风益损颗粒质量控制方法研究

目的:采用薄层色谱法和高效液相色谱法建立除风益损颗粒的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法定性鉴别除风益损颗粒中赤芍、牡丹皮、当归、川芎、大黄、防风、女贞子;高效液相色谱法(HPLC)对黄芩中黄芩苷进行含量测定,采用Waters Atlantis d C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.4%磷酸溶液(47∶53)为流动相,检测波长280 nm,流速1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,进样量10μL。结果:采用薄层色谱法建立了除风益损颗粒中赤芍、牡丹皮、当归、川芎、大黄、防风、女贞子的定性鉴别方法,斑点清晰,阴性无干扰;采用高效液相色谱法建立了除风益损颗粒中黄芩苷含量测定的方法,专属性强,黄芩苷在0.101~1.01μg(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均回收率为100.22%,RSD为0.84%。结论:建立的薄层色谱法鉴别及含量测定方法专属性强、重复性好,可用于除风益损颗粒的质量控制。

P-HPLC法同时测定不同产地不同采收期墨旱莲中6种成分的含量

目的建立同时测定不同产地、不同采收期墨旱莲药材中咖啡酸、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸C、木犀草素、蟛蜞菊内酯6种化学成分的HPLC含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.3%甲酸水溶液,梯度洗脱;检测波长340 nm;流速0.9 mL·min^(-1);柱温30℃。结果咖啡酸线性范围为0.02008~0.20080μg(r=0.9998),平均回收率(n=6)为99.07%;木犀草苷线性范围为0.04084~0.40840μg(r=0.9999),平均回收率(n=6)为99.13%;异绿原酸B线性范围为0.08186~0.81860μg(r=1.0000),平均回收率(n=6)为98.46%;异绿原酸C线性范围为0.07966~0.79660μg(r=0.9995),平均回收率(n=6)为97.84%;木犀草素线性范围为0.08104~0.81040μg(r=1.0000),平均回收率(n=6)为97.89%;蟛蜞菊内酯线性范围为0.40280~4.02800μg(r=0.9992),平均回收率(n=6)为98.18%。不同产地的墨旱莲药材6种成分含量差异较大,江苏宿迁含量最高。结论该方法稳定可靠、准确、重复性好。适合于墨旱莲药材中多种成分的含量测定研究,为墨旱莲药材寻找更佳产地及采收期提供了科学依据。

稳心安神颗粒HPLC指纹图谱的建立及6种成分测定

目的:建立稳心安神颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并同时测定2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、盐酸小檗碱、丹酚酸B、槲皮素、五味子醇甲、丹参酮ⅡA的含量。方法:采用高效液相色谱法,Alphasil VC-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为0.9 mL·min^(-1),检测波长为280 nm,进样量为10μL,柱温为25℃;建立指纹图谱,采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)”对10批稳心安神颗粒进行相似度评价,对2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、盐酸小檗碱、丹酚酸B、槲皮素、五味子醇甲、丹参酮ⅡA色谱峰进行指认,同时测定6种成分的含量。结果:10批稳心安神颗粒中标定25个共有峰,相似度均在0.950以上。6个成分分别在0.0210~0.2100、0.4168~4.1680、0.4044~4.0440、0.0102~0.1020、0.0426~0.4260、0.0448~0.4480μg进样量范围内线性关系良好,平均回收率为98.61%~100.69%,RSD为0.75%~1.26%。结论:该方法重复性好,可操作性强,可用于控制稳心安神颗粒的质量。

八味通里颗粒的质量标准研究

目的建立院内制剂八味通里颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)对八味通里颗粒中炒莱菔子、大黄、槟榔进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)对枳壳和枳实中新橙皮苷进行含量测定,使用ACE-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)分析柱,流动相为乙腈(A)-0.25%磷酸溶液(B)=19∶81,检测波长为283 nm,流速为0.9 ml/min,柱温为25℃,进样量为10μl。结果TLC斑点清晰、阴性无干扰专属性强、重现性好;HPLC含量测定方法简便准确,阴性无干扰、专属性强,新橙皮苷分别在0.21~2.10μg(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.91%(RSD=0.43%)。结论本研究建立的TLC薄层鉴别及HPLC含量测定方法可操作性强、方法简单、专属性好,可有效控制八味通里颗粒的质量。

人参皂苷CK对MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨人参皂苷CK对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响。方法 MCF-7细胞经不同浓度的人参皂苷CK处理后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,real-time q PCR法检测E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白mRNA表达,Western blot法检测p-PI3K、p-Akt蛋白表达。结果与对照组比较,10μmol/L人参皂苷CK处理72 h,20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理24、48、72 h后,对细胞增殖的抑制率显著增加(P<0.05);20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理48 h后,细胞凋亡率和E-钙黏蛋白mRNA表达显著增加(P<0.05);20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理48 h后,N-钙黏蛋白、波形蛋白mRNA表达,以及p-PI3K、p-Akt蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论人参皂苷CK可抑制MCF-7细胞增殖、上皮间质转化,并诱导细胞凋亡,这可能与抑制PI3K/Akt信号通路相关。

救必应酸酯类衍生物的合成、鉴定及其体外抗肿瘤活性研究

目的:合成并鉴定救必应酸酯类衍生物,并评价其体外抗肿瘤活性。方法:以救必应酸为原料,通过28位酯化、3β位和23位羟基与酸酐反应合成救必应酸酯类衍生物;采用高分辨质谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及理化性质对合成的救必应酸酯类衍生物进行结构鉴定。采用MTT法评价紫杉醇(阳性对照)、救必应酸及救必应酸酯类衍生物对人宫颈癌细胞He La、人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺腺癌细胞SPC-A1、人肝癌细胞HepG2的体外抗肿瘤活性[以半数抑制浓度(IC50)为指标]。结果:共合成了6个救必应酸酯类衍生物,分别为救必应酸甲酯(化合物1)、3,23-O-双(乙酰基)救必应酸甲酯(化合物2)、3,23-O-双(丙酰基)救必应酸甲酯(化合物3)、3,23-O-双(丁酰基)救必应酸甲酯(化合物4)、3,23-O-双(邻苯二甲酰基)救必应酸甲酯(化合物5)及3,23-O-双(丁二酰基)救必应酸甲酯(化合物6)。与紫杉醇比较,化合物5和化合物6对HeLa、A375、HepG2、SPC-A1细胞的抗肿瘤活性与其相似,差异无统计学意义(P>0.05),救必应酸及其他化合物的IC50显著减小(P<0.05)。结论:本研究合成了6个救必应酸酯类衍生物,其中化合物5、6具有显著的体外抗肿瘤活性,可为后续研究提供参考。

RP-HPLC法同时测定金莲花中3种碳苷黄酮的含量

目的建立金莲花药材中3种碳苷黄酮含量同时测定的方法,以比较不同产地金莲花药材及不同部位中3种成分的含量。方法采用RP-HPLC法。色谱柱:Shim-pack C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈体积分数为0.35%的磷酸溶液(体积比为16∶84),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:345 nm,柱温:25℃。结果荭草苷、牡荆苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷能够达到基线分离;荭草苷在9.94～99.40 mg·L-1、牡荆苷在2.49～24.90 mg·L-1、荭草素2″OβL半乳糖苷在10.64～106.40 mg·L-1内线性关系良好。结论本方法为金莲花药材的综合利用和资源开发提供了参考,有利于控制金莲花药材的质量。

金莲花不同溶剂提取物抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的谱-效关系研究

目的:研究金莲花11种不同溶剂提取物抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的谱-效关系。方法:利用高效液相色谱-串联质谱法建立金莲花11种不同溶剂提取物的指纹图谱,通过与对照品、文献信息比对,指认共有峰对应的化合物。采用MTT法检测金莲花11种不同溶剂提取物对缺氧/复氧损伤大鼠心肌细胞H9c2存活率的影响,采用酶联免疫吸附测定法检测细胞中丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)水平和上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。通过灰色关联度分析法(GRA)和偏最小二乘法(PLS)联合分析共有峰对应成分与抗心肌细胞缺氧/复氧损伤(药效)的谱-效关系。结果:金莲花11种不同溶剂提取物的指纹图谱中有22个共有峰,指认出22个化合物。与缺氧/复氧损伤组比较,缺氧/复氧+S1~S6、S9、S10组细胞的存活率均显著升高,MDA含量、ROS水平、LDH含量均显著降低(P<0.05);缺氧/复氧+S8组细胞的ROS水平、LDH含量均显著降低(P<0.05)。22个化合物与药效的GRA关联度均大于0.8;除峰1、2、7、13、14、21外,其余峰对应化合物与药效的PLS分析回归系数均大于0(即成正相关);贡献排名前9位的共有峰均为峰6>11>4>5>8>9>12>10>15。结论:荭草苷(峰6)、牡荆苷(峰11)、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷(峰4)、荭草素-2″-O-β-D-吡喃木糖苷(峰5)、槲皮素-3-O-吡喃葡萄糖苷(峰8)、牡荆素-2″-O-β-L-半乳糖苷(峰9)、金丝桃苷(峰12)、牡荆素-2″-O-β-D-吡喃木糖苷(峰10)、2″-O-(2″′-甲基丁酰基)-荭草苷(峰15)可能是金莲花抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的主要成分。

杨梅素抗类风湿性关节炎作用研究

目的探讨杨梅素的抗类风湿关节炎作用。方法通过对四种动物模型进行研究,考察杨梅素的抗类风湿性关节炎的作用。结果杨梅素大剂量组对四种大鼠模型具有一定的抑制作用。结论本研究证明杨梅素具有祛风除湿、温经止痛、活血通络功效,为杨梅素的开发利用提供了翔实的实验依据。

HPLC法同时测定三七花盘中人参皂苷Rb1和人参皂苷Rb3的含量

目的：建立HPLC法同时测定三七花盘中人参皂苷Rb1和人参皂苷Rb3的含量。方法采用ACE 5 C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液（32∶68）；流速：1.0mL/min；检测波长：203nm；柱温：25℃。结果人参皂苷Rb1和人参皂苷Rb3分别在10.25～143.50mg/L（r=0.9993， n=7）和10.94～153.16mg/L（r=0.9997，n=7）范围内呈良好线性关系；平均回收率（n=6）分别为98.78%和98.17%。结论本测定方法简便、快速、准确，为三七花盘的综合开发利用提供了参考，有利于控制三七花盘的质量。

HPLC法测定喘复康软胶囊中2组分含量

目的测定喘复康软胶囊中盐酸麻黄碱和盐酸异丙嗪的含量。方法HPLC法 ,采用shim packVp ODS色谱柱 ,流动相分别为甲醇 0 0 5moL·L-1磷酸二氢钾 三乙胺 (V∶V∶V =2 0∶80∶0 0 2和V∶V∶V =5 5∶4 5∶0 0 2 ,用磷酸调节 pH =3 4 ) ,检测波长分别为 2 0 6nm和 2 5 1nm。结果盐酸麻黄碱在 0 0 18～ 0 10 7mmol·L-1、盐酸异丙嗪在 0 0 14～ 0 0 37mmol·L-1内峰面积与浓度呈良好的线性关系 ,其回归方程分别为Y =3 2 13× 10 4X +2 83× 10 2 (r =0 9999)、Y =8 72 9× 10 4X +3 16 2× 10 3 (r =0 9999) ;回收率分别为 99 3% (RSD =0 6 % )和 99 4 % (RSD =0 6 % )。结论该方法可用于喘复康软胶囊中盐酸麻黄碱和盐酸异丙嗪

一年蓬研究进展

概述了菊科飞蓬属植物一年蓬化学成分及药理活性的研究进展。

薯蓣皂苷元诱导人胃低分化粘液腺癌MGC-803细胞凋亡依赖caspase-3途径

目的研究薯蓣皂苷元(Diosgenin,Dio)诱导人胃低分化粘液腺癌(MGC-803)细胞死亡的机理。方法四唑蓝(MTT)比色法检测Dio对肿瘤细胞生长抑制作用;流式细胞仪检测Dio对MGC-803细胞膜Annexin V表达的影响;APO-BRDU试剂盒检测Dio对MGC-803细胞DNA的影响;酶联免疫分析仪测定Dio对MGC-803细胞caspase-3活力和caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对Dio诱导细胞死亡的影响。结果一定浓度范围内Dio对MGC-803细胞增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;经Dio处理后Annexin V-FITC+/PI-的凋亡细胞逐渐增多;随Dio剂量增大,DNA断裂碎片增多,凋亡细胞也逐渐增多。Dio作用细胞24 h,明显增强细胞caspase-3的活性。caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO能部分抑制MGC-803细胞的凋亡。结论 Dio通过caspase-3途径诱导人胃低分化粘液腺癌细胞凋亡。

抑制脂肪酶活性成分研究进展

世界卫生组织在1997年宣布肥胖是一种慢性疾病[1],肥胖可导致心血管疾病、糖尿病、高血压、高血脂,且与多种慢性疾病的产生密切相关[2],因此寻找治疗肥胖的药物已成为医学界研究的热点.脂肪酶在人类的健康和疾病中发挥着重要作用,除在人体消化、运输和加工食用脂类中发挥作用外还参与水解各种脂质底物以调节膜完整性.

不同前处理方法测定林蛙牛骨胶囊中钙含量实验对比研究

目的建立保健食品林蛙牛骨胶囊中钙的含量测定方法。方法样品采用湿法消解、微波消解法、压力罐消解及干法灰化处理样品,以火焰原子吸收光谱法对林蛙牛骨胶囊中钙的含量进行对比研究,比较不同消解方法的精密度、重复性及回收率等。结果湿法消解、微波消解法、压力罐消解测定林蛙牛骨胶囊中钙平均回收率分别为99.16%、98.90%、97.83%。结论采用微波消解法进行前处理更简便、更快捷,测得样品中钙的含量也相对较高,更适用于林蛙牛骨胶囊中钙含量的测定。

三维适形放疗联合单药吉西他滨同步放化疗治疗晚期胰腺癌的临床价值

目的分析三维适形放疗联合单药吉西他滨同步放化疗治疗晚期胰腺癌的临床价值。方法选取36例晚期胰腺癌患者,回顾患者临床资料,给予三维适形联合单药吉西他滨同步放化疗治疗,分析患者治疗效果。结果 36例患者近期疗效总有效率为66.7%,毒副反应在Ⅱ-Ⅲ度,表现为骨髓抑制及胃肠道反应,治疗后生存质量明显提高,疼痛程度明显减轻,与治疗前对比（P〈0.05）。结论三维适形联合单药吉西他滨同步放化疗治疗晚期胰腺癌的临床疗效值得肯定,可延长患者生存期,不良反应轻,值得临床进一步推广及使用。

忍冬叶不同溶剂提取物与抗氧化的谱效关系研究

目的通过研究忍冬叶色谱峰与抗氧化活性之间的相关性分析,揭示忍冬叶抗氧化活性的可能的物质基础。方法采用HPLC-MS/MS建立忍冬叶11种不同极性提取物的指纹图谱,通过与对照品、文献信息比对、二级碎片信息指认共有峰对应的化合物。以DPPH自由基清除率及总还原力为指标,评价11种提取物抗氧化作用,通过灰色关联度法和偏最小二乘法联合分析共有峰与抗氧化作用的谱效关系,确认各共有峰的贡献程度。结果忍冬叶11种不同溶剂提取物中有20个共有峰,指认出18个化合物。S9清除DPPH自由基作用及总还原力活性均最强,其IC_(50)值分别为(1.08±0.15)mg·mL^(-1)、(3.41±0.10)mg·mL^(-1);18个化合物与药效的灰色关联度分析关联度均>0.8,除峰8、6、10、11外,其余峰与药效的偏最小二乘法分析回归系数均大于0,成正相关,其贡献程度排名前九位的共有峰为:峰5>4>16>17>18>20>19>1>9。结论忍冬叶中3,4-二羟基肉桂酸(峰5)、绿原酸(峰4)、3,4-二咖啡酰奎宁酸(峰16)、3,5-二咖啡酰奎宁酸(峰17)、4,5-二咖啡酰奎宁酸(峰18)、木犀草素(峰20)、槲皮素(峰19)、5-咖啡酰奎宁酸(峰1)、4-咖啡酰奎宁酸(峰9)可能是抗氧化的主要活性成分。

替吉奥维持治疗晚期转移性乳腺癌的临床疗效及毒副反应

目的分析替吉奥维持治疗晚期转移性乳腺癌的效果及毒副反应。方法随机选取30例晚期转移性乳腺癌患者,均采取替吉奥维持治疗,分析患者的治疗效果,观察其毒副反应。结果 30例患者经替吉奥维持治疗总有效率为40%,疾病控制率为73.3%;出现8例Ⅰ-Ⅱ度骨髓抑制及5例胃肠道不适。结论替吉奥维持治疗晚期转移性乳腺癌效果显著,毒副反应轻。

淫羊藿苷转化产物的制备及活性研究

目的旨在分析淫羊藿苷及转化产物抑制α-葡萄糖苷酶活性研究。方法对淫羊藿苷进行酶水解、酸水解、酶水解与酸水解相结合的方式进行结构转化,采用薄层色谱法、理化方法、核磁共振波谱法对转化产物进行结构鉴定,分别得到淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、水合淫羊藿素、环淫羊藿素及脱水淫羊藿素。采用pNPG法建立α-葡萄糖苷酶筛选模型,对淫羊藿苷及其产物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果体外活性试验果表明,脱水淫羊藿素、淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ体外活性较淫羊藿苷好,其中脱水淫羊藿素(IC_(50)=0.102 mg/mL)的活性最好,与拜糖平(IC_(50)=0.850 mg/mL)相比抑制活性更强。结论淫羊藿苷转化产物可作为继续进行结构修饰的先导化合物,具有深入研究和开发的前景。

姜侧柏叶炮制工艺的实验研究

目的采用正交试验法优选姜侧柏叶的炮制工艺。方法以芸香苷、槲皮苷、杨梅素的含量为指标,选择炮制温度、炮制时间和生姜用量3个因素,每个因素取3个水平,进行姜侧柏叶炮制工艺优选考察。结果生姜用量对姜侧柏叶炮制工艺有显著影响,最佳工艺为:生侧柏叶与姜汁按照10∶1比例拌匀,120℃炮制15 min,取出,自然放凉。结论正交试验确定的姜侧柏叶炮制工艺合理可靠,稳定性好。