除风益损颗粒质量控制方法研究

目的:采用薄层色谱法和高效液相色谱法建立除风益损颗粒的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法定性鉴别除风益损颗粒中赤芍、牡丹皮、当归、川芎、大黄、防风、女贞子;高效液相色谱法(HPLC)对黄芩中黄芩苷进行含量测定,采用Waters Atlantis d C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.4%磷酸溶液(47∶53)为流动相,检测波长280 nm,流速1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,进样量10μL。结果:采用薄层色谱法建立了除风益损颗粒中赤芍、牡丹皮、当归、川芎、大黄、防风、女贞子的定性鉴别方法,斑点清晰,阴性无干扰;采用高效液相色谱法建立了除风益损颗粒中黄芩苷含量测定的方法,专属性强,黄芩苷在0.101~1.01μg(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均回收率为100.22%,RSD为0.84%。结论:建立的薄层色谱法鉴别及含量测定方法专属性强、重复性好,可用于除风益损颗粒的质量控制。

党参配方颗粒的制备工艺研究

目的考察党参配方颗粒的最佳制备工艺。方法以出膏率、党参炔苷转移率、特征图谱检测等为考察指标确定饮片加水量、煎煮时间等提取工艺参数;以颗粒一次成型率、性状、溶化性为考察因素,筛选辅料,确定制剂成型工艺参数。结果最佳提取工艺参数为:煎煮2次,第1次加水12倍量,第2加水10倍量,煎煮时间均为1h;提取物浸膏相对密度为1.25~1.30,采用真空带式干燥方式,麦芽糊精作为赋形剂。结论采用优选的药辅配比及工艺参数制备的颗粒具有比较稳定的成型率,且粒度、水分、溶化性等检查均符合颗粒剂制剂通则要求。优选的党参配方颗粒制备工艺稳定可行,颗粒质量较好,可应用于党参颗粒的工业化生产中。

人参皂苷CK对MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨人参皂苷CK对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响。方法 MCF-7细胞经不同浓度的人参皂苷CK处理后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,real-time q PCR法检测E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白mRNA表达,Western blot法检测p-PI3K、p-Akt蛋白表达。结果与对照组比较,10μmol/L人参皂苷CK处理72 h,20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理24、48、72 h后,对细胞增殖的抑制率显著增加(P<0.05);20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理48 h后,细胞凋亡率和E-钙黏蛋白mRNA表达显著增加(P<0.05);20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理48 h后,N-钙黏蛋白、波形蛋白mRNA表达,以及p-PI3K、p-Akt蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论人参皂苷CK可抑制MCF-7细胞增殖、上皮间质转化,并诱导细胞凋亡,这可能与抑制PI3K/Akt信号通路相关。

玉米须中抑制黄嘌呤氧化酶活性组分的筛选及其作用

目的:提取玉米须中具有抑制黄嘌呤氧化酶(XOD)作用的活性组分,为进一步开发治疗痛风的中药新药提供依据。方法:通过测定黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生尿酸和超氧离子的生成量,得出玉米须不同溶剂提取物(乙醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物)及不同溶剂(水和10%、30%、50%、70%、90%乙醇)纯化得到的活性组分对XOD活性抑制率,以确定活性组分,并将其与阳性对照药别嘌醇进行XOD活性半数抑制率(IC50)比较。结果:乙酸乙酯提取物XOD活性抑制率最高,为(25.60±1.01)%;与其他各组比较,经50%乙醇纯化得到的活性组分XOD活性抑制率最高,为(60.90±1.27)%。与阳性药别嘌醇进行比较,通过测定尿酸生成量得出50%乙醇纯化得到的活性组分对XOD的IC50为6.00 mg.L-1,别嘌呤醇对XOD的IC50为1.10 mg.L-1;而通过测定超氧离子生成量得出50%乙醇纯化得到的活性组分对XOD的IC50为4.50 mg.L-1,别嘌呤醇对XOD的IC50为1.05 mg.L-1。结论:玉米须中抑制XOD的活性组分为经50%乙醇纯化得到的活性组分。

桑黄菌丝体粗多糖的提取方法研究

采用正交试验设计,以桑黄菌丝体粗多糖含量为考察指标,用苯酚—硫酸法,分别确定了热水浸提法、微波辅助提取法和超声提取法的最佳工艺。通过极差分析得出:热水浸提法的最优工艺为浸提时间3 h、浸提3次、液料质量比50∶1、浸提温度90℃,粗多糖提取率为2.10%;微波提取法的最优工艺为微波处理15 min、液料质量比50∶1、提取3次,提取率为4.18%;超声提取法的最优工艺为超声30 min、提取2次、液料质量比60∶1、温度60℃、频率60 Hz,提取率为3.02%。微波辅助法与热水浸提法相比,时间缩短,且提取率提高近1倍;与超声提取法相比,时间缩短1/2,但提取率提高40%。因此,微波辅助提取法速度更快、提取效率更高、操作更简便,优于其他2种方法。

千里光总黄酮体外抗肿瘤和抗病毒活性研究

目的:观察千里光总黄酮的体外抗肿瘤和抗病毒作用。方法:采用MTT法测定千里光总黄酮对人肝癌细胞株SMMC-7721、人胃癌细胞株SGC-7901和人乳腺癌细胞株MCF-7的生长抑制情况;采用细胞体外病变效应(CPE)法检测千里光总黄酮在人宫颈癌HeLa细胞中对人呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用。结果:千里光总黄酮对SMMC-7721、SGC-7901和MCF-7三种瘤株生长的半数抑制浓度分别为48.73、61.32和31.26μg/mL;千里光总黄酮半数中毒浓度为0.29 mg/mL,抑制RSV的半数有效浓度为38.3μg/mL,治疗指数(TI)为7.6。结论:千里光总黄酮体外具有明显的抗肿瘤和抗病毒活性。

救必应酸酯类衍生物的合成、鉴定及其体外抗肿瘤活性研究

目的:合成并鉴定救必应酸酯类衍生物,并评价其体外抗肿瘤活性。方法:以救必应酸为原料,通过28位酯化、3β位和23位羟基与酸酐反应合成救必应酸酯类衍生物;采用高分辨质谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及理化性质对合成的救必应酸酯类衍生物进行结构鉴定。采用MTT法评价紫杉醇(阳性对照)、救必应酸及救必应酸酯类衍生物对人宫颈癌细胞He La、人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺腺癌细胞SPC-A1、人肝癌细胞HepG2的体外抗肿瘤活性[以半数抑制浓度(IC50)为指标]。结果:共合成了6个救必应酸酯类衍生物,分别为救必应酸甲酯(化合物1)、3,23-O-双(乙酰基)救必应酸甲酯(化合物2)、3,23-O-双(丙酰基)救必应酸甲酯(化合物3)、3,23-O-双(丁酰基)救必应酸甲酯(化合物4)、3,23-O-双(邻苯二甲酰基)救必应酸甲酯(化合物5)及3,23-O-双(丁二酰基)救必应酸甲酯(化合物6)。与紫杉醇比较,化合物5和化合物6对HeLa、A375、HepG2、SPC-A1细胞的抗肿瘤活性与其相似,差异无统计学意义(P>0.05),救必应酸及其他化合物的IC50显著减小(P<0.05)。结论:本研究合成了6个救必应酸酯类衍生物,其中化合物5、6具有显著的体外抗肿瘤活性,可为后续研究提供参考。

北五味子光合特性的研究

应用美国LI—COR公司制造的LI—6400型便携式光合作用测定系统,研究了田间条件下北五味子光合特性。Pn的日变化曲线是双峰型。6:00～11:00随着气温和光照的增强,叶片光合速率不断提高,11:00达到最大值;11:00～14:00逐渐下降,14:00～15:0O略有回升,到15:00出现次高峰,以后随气温和光照的减弱呈下降趋势。Pn的变化在6:00～11:00和15:00～18:00与光照强度变化规律相一致;Pn在11:00～14:00的下降,表明其光合作用存在“午休”现象。北五味子长枝比短枝,发育枝比结果枝光合速率高。北五味子不同种质间需光性差异明显,需光性强的叶片浓绿,光合速率高,高产稳产;需光性弱的叶片发黄,光合速率低,大小年现象严重。

救必应酸在大鼠体内的口服生物利用度研究

目的:研究救必应酸在大鼠体内药动学和口服生物利用度。方法:建立测定大鼠血浆中救必应酸浓度的RP-HPLC法。考察大鼠经灌胃和尾静脉给予40 mg·kg^(-1)的救必应酸后血药浓度变化。采用3p97软件计算分析药动学参数和口服生物利用度。结果:灌胃组大鼠的Cmax为(0.81±0.22)μg·ml^(-1),Tmax为(45.24±5.13)min,T1/2为(101.47±8.25)min,AUC为(76.3±13.68)μg·min-1·ml^(-1);静脉注射组的T1/2为(73.68±11.02)min,AUC为(1 687.4±29.54)μg·min^(-1)·ml^(-1)。救必应酸口服利用度为4.52%。结论:救必应酸的口服生物利用度较差。

RP-HPLC法同时测定金莲花中3种碳苷黄酮的含量

目的建立金莲花药材中3种碳苷黄酮含量同时测定的方法,以比较不同产地金莲花药材及不同部位中3种成分的含量。方法采用RP-HPLC法。色谱柱:Shim-pack C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈体积分数为0.35%的磷酸溶液(体积比为16∶84),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:345 nm,柱温:25℃。结果荭草苷、牡荆苷、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷能够达到基线分离;荭草苷在9.94～99.40 mg·L-1、牡荆苷在2.49～24.90 mg·L-1、荭草素2″OβL半乳糖苷在10.64～106.40 mg·L-1内线性关系良好。结论本方法为金莲花药材的综合利用和资源开发提供了参考,有利于控制金莲花药材的质量。

一测多评法测定山茱萸炮制前后6种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、当药苷、马钱苷和山茱萸新苷I 6种有效成分的色谱条件,并以马钱苷为参照建立"一测多评"定量分析方法。方法采用不同HPLC系统和不同色谱柱考察相对校正因子的耐用性。同时采用外标法与"一测多评"法对6批山茱萸生品及酒制品进行分析,对含量测定结果进行比较。结果相对校正因子的耐用性良好,外标法与一测多评法测得6种成分的含量间无显著差异。结论该方法简便、准确、成本低,可用于山茱萸生品及炮制品的质量评价。

金莲花不同溶剂提取物抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的谱-效关系研究

目的:研究金莲花11种不同溶剂提取物抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的谱-效关系。方法:利用高效液相色谱-串联质谱法建立金莲花11种不同溶剂提取物的指纹图谱,通过与对照品、文献信息比对,指认共有峰对应的化合物。采用MTT法检测金莲花11种不同溶剂提取物对缺氧/复氧损伤大鼠心肌细胞H9c2存活率的影响,采用酶联免疫吸附测定法检测细胞中丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)水平和上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。通过灰色关联度分析法(GRA)和偏最小二乘法(PLS)联合分析共有峰对应成分与抗心肌细胞缺氧/复氧损伤(药效)的谱-效关系。结果:金莲花11种不同溶剂提取物的指纹图谱中有22个共有峰,指认出22个化合物。与缺氧/复氧损伤组比较,缺氧/复氧+S1~S6、S9、S10组细胞的存活率均显著升高,MDA含量、ROS水平、LDH含量均显著降低(P<0.05);缺氧/复氧+S8组细胞的ROS水平、LDH含量均显著降低(P<0.05)。22个化合物与药效的GRA关联度均大于0.8;除峰1、2、7、13、14、21外,其余峰对应化合物与药效的PLS分析回归系数均大于0(即成正相关);贡献排名前9位的共有峰均为峰6>11>4>5>8>9>12>10>15。结论:荭草苷(峰6)、牡荆苷(峰11)、荭草素-2″-O-β-L-半乳糖苷(峰4)、荭草素-2″-O-β-D-吡喃木糖苷(峰5)、槲皮素-3-O-吡喃葡萄糖苷(峰8)、牡荆素-2″-O-β-L-半乳糖苷(峰9)、金丝桃苷(峰12)、牡荆素-2″-O-β-D-吡喃木糖苷(峰10)、2″-O-(2″′-甲基丁酰基)-荭草苷(峰15)可能是金莲花抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的主要成分。

名贵动物药哈蟆油的化学成分研究进展

根据近70年来国内外公开发表的有关文献及作者的研究,对哈蟆油的化学成分进行综述。哈蟆油含有蛋白质、脂肪酸、核酸、维生素类、碳水化合物、磷脂类、激素类、甾体类等化合物。迄今为止,已从哈蟆油中分离鉴定出多种化学成分,但尚未发现其药效物质基础,有待于进一步研究。

HPLC法测定喘复康软胶囊中2组分含量

目的测定喘复康软胶囊中盐酸麻黄碱和盐酸异丙嗪的含量。方法HPLC法 ,采用shim packVp ODS色谱柱 ,流动相分别为甲醇 0 0 5moL·L-1磷酸二氢钾 三乙胺 (V∶V∶V =2 0∶80∶0 0 2和V∶V∶V =5 5∶4 5∶0 0 2 ,用磷酸调节 pH =3 4 ) ,检测波长分别为 2 0 6nm和 2 5 1nm。结果盐酸麻黄碱在 0 0 18～ 0 10 7mmol·L-1、盐酸异丙嗪在 0 0 14～ 0 0 37mmol·L-1内峰面积与浓度呈良好的线性关系 ,其回归方程分别为Y =3 2 13× 10 4X +2 83× 10 2 (r =0 9999)、Y =8 72 9× 10 4X +3 16 2× 10 3 (r =0 9999) ;回收率分别为 99 3% (RSD =0 6 % )和 99 4 % (RSD =0 6 % )。结论该方法可用于喘复康软胶囊中盐酸麻黄碱和盐酸异丙嗪

多指标综合加权评分法优选酒萸肉蒸制工艺

目的:研究酒萸肉蒸制工艺,确定最佳工艺参数。方法:采用L9(34)正交试验法,以加酒量、蒸制时间、烘干温度、烘干时间为考查因素,以没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、当药苷、马钱苷、山茱萸新苷I的含量以及浸出物含量为指标进行综合加权评分优化工艺参数,并进行验证试验。结果:酒萸肉的最佳蒸制工艺为每100 kg净山萸肉加黄酒20 kg,拌匀,闷润1 h,蒸制8 h,60℃烘6 h至干燥。结论:该蒸制工艺简单、稳定,可为酒萸肉的工业化生产提供参考。

返魂草营养元素与绿原酸含量变化规律研究

为探讨返魂草体内N、P、K三要素与绿原酸含量的变化规律,于通化县修正返魂草生产基地定期取样,采用HPLC法测定绿原酸含量,常规方法测定营养元素含量。结果表明,在年生育期内,返魂草体内N与K含量变化规律相似,在拔节期和开花坐果期有较大变动;在营养生长和生殖生长时P含量有明显波动,尤以营养生长时P含量较高。三者含量最高峰出现在拔节盛期,绿原酸最高含量出现在由营养生长转入生殖生长时,这说明营养物质的合成与有效成分的合成不在同一时期,绿原酸的合成以营养物质的合成为基础。营养元素和绿原酸均在植株枯萎时含量最低。

人参益智片质量标准研究

目的 制定人参益智片质量标准草案,控制制剂成品质量.方法 采用薄层色谱法对制剂中的人参、补骨脂等进行鉴别,采用HPLC法测定补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素总含量.色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-2％冰乙酸溶液（30∶70）为流动相;检测波长为246 nm.结果 TLC法对制剂中鉴别药材专属性强、斑点分离清晰、重现性好,阴性无干扰;HPLC测定补骨脂素在0.019～0.19 μg范围、异补骨脂素在0.023～0.23 μg范围内呈良好的线性关系,回收率为97.50％,RSD为2.95％.结论 质量检测方法简便易行,专属性强,重复性好,可作为制剂的质量控制标准.

名贵动物药哈蟆油的药理作用研究进展

收集了20余年来有关哈蟆油药理学研究的文献报道,进行集中整理分析,详尽报道哈蟆油的药理作用。哈蟆油具有抗疲劳、抗应激、抗衰老、镇咳祛痰、提高机体免疫力等多种药理作用。迄今为止,哈蟆油的药理作用研究较为深入,为哈蟆油的深层次开发奠定了理论基础。

薯蓣皂苷元对人胃癌SGC-7901细胞体外作用的研究

目的探讨薯蓣皂苷元对人胃癌SGC-7901细胞株的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测不同浓度薯蓣皂苷元对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术检测薯蓣皂苷元对SGC-7901细胞凋亡的影响。结果 MTT结果显示,薯蓣皂苷元体外可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性,作用244、8、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为62.90、31.83和18.21μg.mL-1;流式细胞检测表明,8、163、2、64μg.mL-1的薯蓣皂苷元分别作用SGC-7901细胞122、43、6 h,对细胞周期没有明显影响,但能明显诱导SGC-7901细胞发生凋亡,同样具有显著的时间-剂量依赖性。结论薯蓣皂苷元具有抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖、诱导其凋亡的作用,但对SGC-7901细胞周期没有明显影响。