细胞自噬在脂氧素A4治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的作用

目的脂氧素A4(LXA4)在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中已被证实具有良好的保护作用,细胞自噬是否是其保护作用机制之一仍不明确。文章拟讨论细胞自噬在LXA4治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的作用。方法48只大鼠以随机数字表法分为LXA4组、缺血再灌注组、假手术组,每组16只,假手术组仅暴露腹主动脉,其他两组构建脊髓缺血再灌注损伤模型,LXA4组:在关腹后30 min脊髓鞘内注射10μL LXA4(300 pmol);缺血再灌注组:在关腹后30 min脊髓鞘内注射等渗盐水(0.1 mL/kg);假手术组:不注射药物。3组大鼠分别于再灌注24 h后颈椎脱臼法处死,处死后取出腰段脊髓。LC3B荧光染色法对3组大鼠的脊髓组织进行染色并计数,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、γ-氨基丁酸受体A相关蛋白(GABARAP)的表达。结果假手术组LC3B阳性细胞较少,缺血再灌注组(399.80±18.46)和LXA4组(240.80±12.76)的LC3B阳性细胞数较假手术组(73.40±19.42)明显升高(P<0.05),LXA4组较缺血再灌注组阳性细胞数明显减少(P<0.05)。缺血再灌注组及LXA4组大鼠的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、GABARAP的表达较对照组明显增高(P<0.05);与缺血再灌注组比较,LXA4组脊髓组织中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ明显下降(P<0.05)。结论当SCII发生后,激活了细胞自噬,说明细胞自噬参与了SCII发生的过程;给予LXA4后,细胞自噬被抑制,脊髓缺血再灌注损伤缓解。

脂氧素A4对脊髓缺血再灌注损伤模型大鼠的神经保护

背景:前期研究已证明脂氧素A4对大鼠脊髓损伤具有神经保护作用,但其在脊髓缺血再灌注损伤中的作用机制仍不明确。目的:探讨脂氧素A4在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的保护作用。方法:将48只SD大鼠随机分为3组,每组16只:对照组、实验组制作脊髓缺血再灌注损伤模型,实验组脊髓鞘内注射脂氧素A4,对照组脊髓鞘内注射生理盐水;空白组不造模。造模后6,12,24,48 h,利用BBB评分评估大鼠运动神经功能;再灌注后24 h,采用Tunel法观察脊髓组织细胞凋亡情况,ELISA法检测脊髓组织Bcl-2和Bax浓度,Western blot检测脊髓组织cleaved-caspase-3、p-IKKβ和p-NF-κB蛋白的表达。实验通过新乡医学院第一附属医院伦理委员会批准(2018038)。结果与结论:①对照组不同时间点的BBB评分低于空白组(P<0.05),实验组造模后12,24,48 h的BBB评分高于对照组(P<0.05);②对照组细胞凋亡多于空白组(P<0.05),实验组少于对照组(P<0.05);③对照组脊髓组织内的Bcl-2、Bax水平均高于空白组(P<0.05);实验组的Bcl-2水平高于对照组(P<0.05),Bax水平低于对照组(P<0.05);④对照组cleaved-caspase-3、p-NF-κB蛋白表达强于空白组,p-IKKβ蛋白表达弱于空白组;实验组cleaved-caspase-3、p-NF-κB蛋白表达弱于对照组,p-IKKβ蛋白表达强于对照组;⑤结果表明,脂氧素A4可激活细胞质中caspase-3/IKKβ/NF-κB通道的活化,抑制细胞凋亡,起到治疗脊髓缺血再灌注损伤的作用。