姜黄素对神经干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达影响的离体研究

目的探讨姜黄素对神经干细胞内Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选择孕14.5 d的SD大鼠,取胚鼠大脑前端2/3部分组织,提取神经干细胞。培养并传代3次时,进行细胞免疫荧光学鉴定;同时换用只添加2%B27的Neurobasal培养基连续培养细胞,并设置空白对照组、IWR-1(Wnt信号通路特异性阻断剂10μmol/L)处理组、姜黄素500 nmol/L组、IWR-1+姜黄素500 nmol/L组(先添加IWR-1,20min后再加入姜黄素)、DMSO组。细胞培养3 d时,采用Western blot方法检测各组wnt3a、β-catenin蛋白表达水平变化,采用RT-PCR方法检测各组wnt3a、β-catenin的mRNA表达量变化。结果 Western blot结果显示:对培养第3代的细胞干预3 d后,姜黄素组wnt3a、β-catenin表达量较其他各组明显升高(P<0.05),IWR-1处理后其表达水平明显降低(P<0.05);姜黄素联合IWR-1处理细胞后wnt3a、β-catenin表达量明显减少(P<0.05);DMSO组表达量接近空白对照组。RT-PCR结果显示:与空白对照组比较,姜黄素组wnt3a及β-catenin基因表达水平明显上调(P<0.05),而IWR-1组wnt3a及β-catenin基因表达水平明显下降(P<0.05),总体变化趋势与Western blot结果一致。结论初步证明姜黄素可激活Wnt信号通路,由此推测姜黄素与经典的Wnt/β-catenin信号通路密切相关。

神经外科新进展

目的调研神经外科专业现状和发展动态,为确定军队神经外科研究方向提供参考。方法采用情报调研方法,检索近5年来部分国内外神经外科研究文献,分析全军神经外科领域基础研究与临床工作取得的新进展。结果"十一五"期间,军队神经外科在保持颅脑战、创伤研究等传统优势领域的同时,在脑与脊髓肿瘤、血管内治疗、功能性神经外科疾病等领域取得了巨大成效,共获得军队科技进步和医疗成果奖47项。人才梯队建设成果斐然。但是,神经外科专业在军内、军地、地区之间的发展还不很均衡,需要进一步加强技术合作。结论在今后一个时期,军队神经外科既要紧跟世界神经外科发展趋势,重视基础和临床研究,又要推进军事特色技术创新,在颅脑创伤救治、防护设备研制、非专科治疗等方面加强研究工作。

神经外科重症监护病房中心静脉置管相关性深静脉血栓54例分析

目的研究我院神经外科重症监护病房(neurosurgical intensive care unit,NICU)中心静脉置管相关性深静脉血栓(CVC-related DVT)的发病特点。方法回顾性分析我科2009-2012年NICU中心静脉置管病例的CVC-related DVT发生情况,并对结果进行统计学分析。结果研究期间共有304例患者行中心静脉置管,110例符合条件入选本研究,其中54例发生CVC-related DVT,总体发生率为49.1%,置管时间为16 h至24 d,平均置管时间为7.67 d。其间,导管堵塞2例,导管脱落3例,无置管相关死亡病例。高龄可能是CVC-related DVT发生的危险因素。结论 NICU的CVC-related DVT发生率高,出现时间早,进展迅速,对置管患者早期进行彩超检测并加强局部护理,可有效减少症状性血栓发生率及严重并发症。

显微外科技术治疗大型听神经瘤216例

目的 探讨显微手术切除大型听神经瘤 (L AN)的治疗效果 .方法 CT或 MRI证实位于桥脑小脑角区的直径≥31mm L AN2 16例 ,采用显微手术切除 ,术后评估治疗效果 ,分别比较术前、术后的听神经和面神经功能 .结果 肿瘤全切率 79.6 % (172例 ) ;次全切除率 15 .3% (33例 ) ;部分切除率 5 .1% (11例 ) ;术后死亡率 1.4% (3例 ) .听神经解剖学保留率为 12 .5 % (2 7例 ) ,出院时神经功能保留率为 4.2 % (A级 ,9例 ) ;面神经解剖学保留率为 82 .4% (178例 ) ,出院时神经功能保留率为 5 2 .8% (House分级 , ～ 级 94例 ) .对187例平均随访 3.9a,其中 12 8例 (6 8.4% )恢复良好 ,44例(2 3.5 % )恢复较好 ,15例 (8.0 % )恢复较差 ,后者中有 10例(5 .4% )肿瘤复发 (再次治疗后治愈 ) .结论 显微外科手术切除大型听神经瘤安全。

微侵袭神经外科技术治疗脑猪囊虫病

目的 探讨脑猪囊虫病的临床、病理特征及外科处理的适应证 ,介绍采用 CT脑立体定向、神经导航结合显微手术等微侵袭神经外科技术治疗脑猪囊虫病的经验与体会 .方法 脑猪囊虫病患者 382例 ,采用 CT脑立体定向技术定位 376例 ,神经导航技术定位 6例 ,行“钥匙孔”小范围开颅 ,在显微镜下切除所有病灶 .结果 30 9例有癫痫症状者 ,术后30 3例症状消失 ,6例症状减轻 ,需继续给予抗癫痫药物治疗 ,术前有偏瘫 5 1例 ,失语 2 3例患者 ,均于术后 1mo内完全恢复 ,未出现新的神经损害症状 ,无并发症及死亡 .结论 微侵袭神经外科技术是一种安全可靠、创伤很小的方法 ,用于治疗脑猪囊虫病可取得满意疗效 .

帕金森病大鼠苍白球神经元簇发放电及峰峰间期序列的研究

目的观察帕金森病大鼠模型苍白球神经元的电活动。方法30只大鼠注射6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)建立PD模型,并通过跑步机测试、注射阿朴吗啡诱发旋转和免疫组化检测黑质对模型进行评价;10只大鼠注射含0.2%抗坏血酸的人工脑脊液建立对照组。在立体定向仪引导下记录大鼠在PD病理及正常生理状态下GP神经元的自发放电活动。结果模型组大鼠中有13只行为学及病理学检测结果符合PD模型标准。电生理记录显示对照组大鼠GP神经元放电频率为(6.04±2.12)Hz,模型组大鼠GP神经元放电频率为(21.10±3.21)Hz(P=0.001)。模型组GP神经元簇发放电模式的比例术后4周为59%,术后8周为61%,而对照组GP神经元簇发放电模式的比例在术后4周和8周均为11%。模型组大鼠神经元放电的峰峰间期散点图在100ms以下有一分布密集条带。结论PD模型大鼠GP神经元较生理状态下放电频率明显增加,簇状放电模式比例增大,ISI序列发生明显变化。

颅内疾病X-刀立体定向放射神经外科治疗510例

目的 分析 X-刀立体定向放射神经外科治疗颅内疾病的疗效 .方法 用 CT薄层连续扫描图像定位 ,采用 BRW立体定向坐标系统 ,Radionics RSA- 3型 X-刀治疗计划系统 ,Philips SL - 75 - 14医用电子直线加速器 ,对 5 10例颅内疾病患者实施 X-刀治疗 .结果 平均随访时间为 15 (3～ 36 ) mo,其中多数病例在治疗后 1～ 6 mo出现明显的症状改善和影像学检查显示病灶缩小或消失等改变 .结论 合理选择适应症 ,采用 X-刀立体定向放射神经外科技术治疗颅内疾病 ,是一种安全。

锌对海马神经元毒性作用的机制研究

目的大量文献报道,锌在诸多神经系统疾病所致的神经元死亡过程中发挥了重要作用,但具体机制不清。本实验拟对锌的神经元毒性机制进行体外实验研究。方法在体外培养的海马神经元中加入锌(或)锌阻断剂,利用相差显微镜从形态学观察神经元损伤;Western blot法检测p38、泛素化蛋白的表达;用MTT(methyl thiazolyl tetrazolium)比色法定量分析神经元的损伤;再加入锌和(或)p38抑制剂,观察泛素化蛋白表达的变化。结果锌对体外培养的海马神经元有明显的毒性作用;锌以明显的浓度依赖和时间依赖的方式诱导海马神经元中泛素化蛋白、p38的升高;抑制p38可减少锌诱导的泛素化蛋白的表达。结论高浓度的锌对神经元有毒性作用,它可能激活p38信号通路影响蛋白降解并最终导致神经元损伤。

青蒿琥酯通过PI3K-Akt通路促进大鼠室管膜下区神经干细胞增殖的体外研究

目的探讨青蒿琥酯(artesunate,ART)对室管膜下区(subventricular zone,SVZ)神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。方法不同浓度的ART(400 nmol/L、800 nmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L)作用于NSCs 24 h后,采用CCK-8法检测其对NSCs增殖的影响。促增殖作用明显的800 nmol/L ART组加入10μmol/L PI3K-Akt通路阻断剂(LY294002),采用CCK-8法检测该通路对NSCs增殖的影响;分别设置空白对照组、LY294002组、800 nmol/L ART组、800 nmol/L ART+LY294002组,待细胞培养24 h时,行Ki-67免疫荧光染色观察ART对NSCs增殖的影响及PI3K-Akt通路在其中的作用,同时采用Western blot检测各组Nestin、Akt及p-Akt蛋白的表达水平。结果 1CCK-8法检测结果显示800 nmol/L ART组在波长450 nm处的光密度值较空白对照组明显升高,在加入LY294002后,其光密度值明显下降(P<0.05),与空白对照组水平相当;2Ki-67免疫荧光染色结果提示800 nmol/L ART可促进NSCs增殖,LY294002可抑制这一作用;3Western blot检测结果显示:神经干细胞表面标志蛋白Nestin及p-Akt蛋白表达水平在800 nmol/L ART组明显上调,在加入LY294002后两者表达水平均下调(P<0.05)。结论 ART可在体外促进SVZ区NSCs的增殖,其机制与PI3K-Akt信号通路相关。

浅谈神经外科ICU青年住院医师的教学与培养

神经外科ICU医师工作杂、任务重、要求高、压力大,而青年住院医师在ICU病房中发挥着举足轻重的作用。因此,如何加强青年住院医师的教学和培养,使他们快速成长,更早更好的胜任神经外科ICU的工作,是一个值得探讨的问题。本文主要从医德医风、专业素质、沟通能力等方面论述神经外科ICU青年住院医师的教学与培养。

雌激素对帕金森病大鼠中脑黑质多巴胺能神经元保护作用的研究

目的 :观察雌激素对去卵巢大鼠中脑黑质多巴胺能神经元的作用 ,探讨雌激素对帕金森病防治的可能性。方法 :对成年雌性大鼠行卵巢切除术 ,应用立体定向技术注射 6 羟基多巴胺 (6 OHDA)于大鼠中脑黑质 ,采用免疫组织化学的方法对黑质TH(酪氨酸羟化酶 )阳性神经元进行标记、计数 ;同时 ,对大鼠的行为学进行观测。结果 :在没有给予雌激素的去卵巢大鼠组 ,阿朴吗啡 (APO)诱导的旋转次数与其他对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,大鼠中脑黑质TH阳性神经元的数目与其他对照组比较也有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 :雌激素对雌性大鼠中脑黑质多巴胺能神经元具有保护作用 ,除了经过雌激素受体途径以外 ,还有其他的作用机制。

促红细胞生成素对大鼠激光脑损伤神经保护作用的实验研究

目的探讨外源性促红细胞生成素(EPO)对大鼠激光脑损伤的神经保护作用,为激光脑损伤的治疗提供新思路。方法80只健康雄性SD大鼠制作激光脑损伤模型,随机分为假手术(A)组、模型(B)组、EPO治疗(C)组、生理盐水对照(D)组,每组20只。对术后大鼠进行运动神经功能评分,采用免疫组织化学方法检测大鼠脑中热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果激光损伤后24h,C组神经功能评分显著改善。A组HSP70表达较弱,B组HSP70表达增加,C组HSP70表达显著升高(P<0.01),D组HSP70表达增加。结论促红细胞生成素对大鼠激光脑损伤神经保护作用可能与HSP70表达有关。

传统开颅与钻孔引流术治疗高血压脑出血后颅内压变化的对比研究

目的 :探讨传统开颅与钻孔引流术加尿激酶溶解术两种治疗方式对高血压脑出血 (HICH)患者颅内压的影响。方法 :112例 HICH患者随机分为两组 ,分别采用传统开颅术和钻孔引流术及尿激酶溶解术治疗。60例患者采用传统开颅术 ,5 2例采用钻孔引流术及尿激酶治疗 ;同时在出血对侧行侧脑室置管 ,监测侧脑室颅内压 (ICP) ;采集术后即刻、2 4h、72 h和 1周的 ICP值 ,并进行统计分析。结果 :虽然传统开颅组与钻孔引流术和尿激酶溶解术组均有 ICP的增高 ,但传统开颅组 ICP增高幅度明显低于钻孔引流术组 ,两组患者的 ICP对比有显著差异 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。结论 :在降低

人与大鼠海马血管构筑的比较性研究

本实验采用血管色素明胶灌注与甲酯铸型扫描电镜法 ,观察比较分析人与大鼠海马血管来源、分布规律及超微结构 ;利用图像分析仪对其血管密度及管径进行测量并分析。结果显示 ,人海马血管来源于大脑后动脉和脉络膜前动脉 ,而大鼠主要来源于大脑后动脉。人海马表面与内部血管呈规律性分布 ,而其内部血管分布不如大鼠明显。大鼠海马血管分布与神经组织构筑相匹配。

姜黄素诱导内源性神经干细胞促进大鼠脊髓损伤后功能修复

目的 探讨姜黄素对脊髓损伤后内源性神经干细胞分化的影响及其对损伤后功能修复的作用。 方法 雄性SD大鼠72只按随机数字表法分为3组：假手术组（n=12）、单纯损伤组（n=30）、姜黄素处理组（n=30）。假手术组仅行椎板切除术，单纯损伤组、姜黄素处理组以70 g力的动脉瘤夹钳夹T9-T10节段脊髓1 min造模。姜黄素处理组于脊髓损伤后30 min按200 mg/kg给予腹腔注射姜黄素，单纯损伤组给予等量生理盐水。分别于损伤后1 d，1、2、4、8周行BBB运动功能评分及斜板实验评价大鼠后肢功能，后处死大鼠并取材，行免疫荧光染色分别观察Nestin、Tuj1、GFAP/CSPG的表达，Western blot检测Wnt3a蛋白及β-catenin表达情况。 结果 BBB运动功能评分及斜板实验结果显示损伤后自1周开始，各时间点姜黄素处理组大鼠后肢功能恢复情况均优于单纯损伤组（P〈0.05）。免疫荧光染色显示脊髓损伤后1周可见损伤区附近有Nestin阳性细胞，2周时达高峰，4周时明显减少，单纯损伤组、姜黄素处理组组间差异无统计学意义；姜黄素处理组Tuj1阳性神经元数量较单纯损伤组明显增多；4周时脊髓损伤中心囊腔周边形成胶质瘢痕，姜黄素处理组GFAP及CSPG表达明显弱于单纯损伤组。Western blot检测Wnt3a及β-catenin表达显示假手术组几乎无表达，姜黄素处理组表达量较单纯损伤组明显增强（P〈0.05）。 结论 姜黄素可通过激活Wnt/β-catenin信号通路诱导脊髓损伤后被激活的内源性神经干细胞更多地分化为神经元，减轻胶质瘢痕，从而改善大鼠后肢功能的恢复。

神经导航在脑肿瘤手术中的应用

目的 探讨在神经导航指导下 ,脑肿瘤及周围结构的定位和外科手术治疗效果 .方法 应用 Stealth Station和Vector Vision神经导航系统 ,手术切除 36例脑肿瘤 ,总结治疗效果 ,分析定位准确性与疗效的关系 .结果 36例脑肿瘤共 36个 ,全切除 35个 (97% )、次全切除 1个 (3% ) .出院时患者症状明显改善 2 9例 (81% )、无明显变化 7例 (19% )、本组无症状恶化及死亡 .平均注册误差和 10 cm预期准确性分别为 (2 .0 9± 0 .6 7) mm和 (1.95± 0 .37) mm.术中持续准确性SA1,SA2和 SA3分别为 (2 .0 2± 0 .95 ) ,(1.0 3± 0 .48)和 (1.15± 0 .98) mm.结论 使用 Stealth Station和 Vector Vision神经导航系统 ,在术前可制定脑肿瘤手术计划 ,术中提供瘤体的动态跟踪和实时导航 ,手术定位准确、可靠 ,有助于肿瘤全切除及降低手术并发症 。