高等中医院校“双创”类治未病保健人才培养教学模式的研究

本文为落实对于开展中医治未病工作的指示精神,提出在预防保健人才培养模式上应该加强"治未病"创新、创业教育,不断改变形式以培养更高素质的中医治未病临床人才。探索我国治未病保健人才特色的教学与人才培养模式。因此提出"双创"型要求,开展"三位一体"人才培养模式,构建高等中医院校"四横三纵"的实践教学模式,为推进以"双创"为核心的治未病保健人才培养提供了一定的启示。

2种炮制方法对何首乌中6种成分变化的影响

目的探索"九蒸九晒"、药典法2种炮制方法对何首乌中6种成分含有量变化的影响。方法何首乌甲醇提取液的分析采用Agilent C_(18)色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm);流动相乙腈-0. 01%磷酸,梯度洗脱;体积流量1. 0 mL/min;检测波长295 nm;柱温30℃。结果 6种成分在各自范围内线性关系良好(R^2>0. 995 0),平均加样回收率98. 96%～101. 23%,RSD 0. 41%～1. 37%。结论何首乌在2种炮制方法下6种成分含有量存在较大差异,这些差异是否与疗效和肝毒性相关还有待进一步探讨。

半夏与虎掌南星、天南星的鉴别研究

目的探索半夏与虎掌南星、天南星的鉴别特征,确保临床用药安全有效。方法采用性状鉴别、薄层定性鉴别以及HPLC指纹图谱进行研究。结果半夏呈类球形,偶有1~2个小侧芽,无序着生;虎掌南星呈扁半圆形,侧芽数量1至多个,且与主块茎多在一个平面,排列有规律,形如虎掌;天南星呈扁球形,少有侧芽;薄层鉴别结果显示三者在Rf值0.05、0.23和0.99处显相同颜色斑点,虎掌南星在Rf值0.91左右处的斑点随着侧芽数量的增多,逐渐趋向天南星,与半夏存在一定差别;指纹图谱结果显示虎掌南星在20.38 min和55.79 min处比半夏新增2个峰,与半夏指纹图谱相似度在0.88左右,天南星在6.663 min、20.858 min、42.412 min和63.287 min处比半夏新增4个峰,与半夏指纹图谱相似度为0.697。结论半夏、虎掌南星、天南星在性状鉴别、薄层鉴别、指纹图谱鉴别均存在较大差别,其变异品种也存在差异,建议临床区别应用。

不同剂量雷公藤多苷对慢性肾小球肾炎患者血清水平的影响

目的探讨不同剂量雷公藤多苷对慢性肾小球肾炎患者血清白细胞诱素-1(LKN-1)、视黄醇结合蛋白(RBP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)的影响。方法选取2015年3月~2017年3月我院接诊的100例肾小球肾炎患者,随机数表法分为A组和B组,每组各50例,在常规治疗基础上,两组均给予雷公藤多苷片治疗,A组先以1.5mg/kg·d的剂量服用4周,之后以1mg/kg·d的剂量再服用4周;B组剂量为1mg/kg·d,连续用药8周。比较两组治疗前后肌酐(sCr)、尿素氮(BUN)、24小时尿蛋白定量以及血清LKN-1、RBP、MMP-9、TIMP-1的变化,并比较临床疗效及不良反应。结果治疗后,两组SCr、BUN、24小时尿蛋白定量较治疗前均得到明显降低(P<0.05),A组SCr、BUN、24小时尿蛋白定量明显低于B组(P<0.05);治疗后,两组血清LKN-1、RBP、TIMP-1较治疗前明显降低,血清MMP-9明显增加(P<0.05),A组血清LKN-1、RBP、TIMP-1明显低于B组,血清MMP-9明显高于B组(P<0.05);A组临床疗效总有效率明显高于B组(P<0.05);两组不良反应发生率无显著差异(P>0.05)。结论慢性肾小球肾炎患者中,增加雷公藤多苷的起始剂量更有助于改善肾功能、提高临床疗效,其内在机制可能更有效的降低血清LKN-1、RBP水平,增加MMP-9活性,抑制TIMP-1的表达相关,且并未增加药物不良反应,用药安全性高。

HPLC法同时测定胎乐颗粒中5种成分含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定胎乐颗粒中5种成分(甘草苷、金丝桃苷、黄芩苷、黄芩素和五味子醇甲)的含量。方法梯度洗脱,乙腈-0.1%磷酸水溶液为洗脱体系,检测波长270 nm,总流速1.0 mL/min,进样量10 μL,柱温为30℃。结果甘草苷、金丝桃苷、黄芩苷、黄芩素和五味子醇甲分别在1.96~19.58 μg/mL(r = 0.9999)、1.65~16.52 μg/mL(r = 0.9998)、11.71~117.12 μg/mL(r = 0.9999)、1.63~16.26 μg/mL(r = 0.9999)和1.23~12.28 μg/mL(r = 0.9999)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率(RSD)分别为101.75%(0.98%)、102.32%(1.70%)、98.03%(1.35%)、99.52%(1.54%)和100.12%(1.27%)。结论该方法简单易行,可用于胎乐颗粒的质量控制。

基于肝毒性探讨何首乌临床合理应用

目的促进临床合理使用何首乌,降低肝毒性不良反应发生率。方法通过查阅文献及相关实验数据分析,探索何首乌肝毒性发生的潜在因素,并针对因素提出临床合理使用建议和用药监护。结果何首乌肝毒性的发生与炮制方法、炮制程度、化学成分、特异体质等因素有关,临床使用时应注重药品质量,辨证用药,对易感人群加强监护。结论合理使用何首乌,可降低肝毒性不良反应发生率。

2015版《中国药典临床用药须知·中药成方制剂卷》妊娠禁忌中成药收载情况分析

目的:为妊娠患者合理使用中成药提供参考。方法:对2015版《中国药典临床用药须知·中药成方制剂卷》收载的1886种中成药,按妊娠禁用、忌用与慎用分类,然后按各品种的药物组成、所属科别与功效进行对比分析。结果:妊娠禁用药品共824种,妊娠忌用药品共7种,妊娠慎用药品共353种,同时标注为妊娠禁用与慎用药品2种。妊娠禁用药品中含妊娠禁用中药者占36.04%;妊娠慎用药品中含妊娠慎用中药者占47.88%,含妊娠禁用中药者占7.93%。按药品所属科室统计,妊娠禁用、忌用、慎用中成药占比最大的分别是外科、骨伤科、眼科。内科中成药按功效统计,妊娠禁用、忌用、慎用中成药占比最大的分别是开窍剂、蠲痹通络剂、驱虫剂;妇科中成药按功效统计,妊娠禁用、慎用中成药占比最大的分别是养血通乳剂、止带剂。结论:妊娠患者遴选中成药既要关注药物组成也要重视功效主治,谨慎合理用药。

何首乌“九蒸九晒”炮制工艺优选及对L02肝细胞生长的影响

目的探索何首乌"九蒸九晒"最佳炮制工艺及不同炮制品对正常人L02肝细胞生长的影响。方法选择蒸制时间、炮制次数、晒制时间3个因素,采用L9(34)正交试验,以二苯乙烯苷、游离蒽醌、结合蒽醌含量为考察指标,优选炮制工艺;以细胞抑制率为评价指标,考察何首乌不同炮制品对L02肝细胞生长的影响。结果优选的何首乌"九蒸九晒"最佳炮制工艺为:蒸制4 h,晒制4 h,蒸晒11次。优选炮制品的肝细胞抑制率为2.86%,药典法炮制品的肝细胞抑制率为23.67%。结论本研究优选的何首乌"九蒸九晒"炮制工艺结果可靠,评价指标可控,所得炮制品的肝细胞抑制率低于药典法炮制品。

黄精芡实汤对2型糖尿病大鼠骨骼肌PI3K-AKT -GLUT4信号通路的影响

目的探讨黄精芡实汤对2型糖尿病(T2DM)大鼠骨骼肌组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/葡萄糖运载体4(GLUT4)信号通路的影响。方法 15月龄SD雄性大鼠60只随机分为为空白对照组、模型对照组、黄精芡实汤高、中、低剂量组。测定小鼠体重,血糖,Western blot法测定脂肪PI3K、AKT2和GLUT4蛋白含量。结果糖尿病组体重、血糖显著高于空白对照组(P<0.05);高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低(P<0.05),脂肪组织中PI3K、AKT2和GLUT4蛋白表达下降(P均<0.05)。黄精芡实汤高中低剂量组血糖出现显著性下降(P均<0.05);HDL-C升高(P<0.05),脂肪PI3K、AKT2和GLUT4蛋白表达上升(P<0.05)。结论黄精芡实汤抗2型糖尿病大鼠的机制是激活胰岛素受体后PI3K/Akt/GLUT4信号通路,调节脂肪、葡萄糖等代谢有关,其中高、中剂量组作用突出。

何首乌九蒸九晒炮制工艺的优化研究

目的:建立测定何首乌中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚和总多糖含量的方法,并优化何首乌传统九蒸九晒的炮制工艺。方法:采用高效液相色谱法检测二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚的含量;采用紫外分光光度法检测总多糖的含量。以蒸制时间、烘制时间、烘制温度为自变量,二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚和总多糖含量为指标,结合加权综合评分法和星点设计-效应面法优化何首乌九蒸九晒的炮制工艺并验证。结果:二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚检测进样量的线性范围分别为0.27~2.7μg(r=0.9971)、0.063~0.63μg(r=0.9999)、0.038~0.38μg(r=0.9909),总多糖检测质量浓度的线性范围为2.07~12.42μg/mL(r=0.9996);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%;加样回收率分别为99.43%~101.06%(RSD=0.63%,n=6)、98.74%~120.33%(RSD=1.34%,n=6)、98.39%~102.44%(RSD=1.49%,n=6)、99.51%~101.98%(RSD=0.87%,n=6)。最优炮制工艺为蒸制时间4.5 h、烘制时间9 h、烘制温度66℃,反复炮制9次。3次验证试验结果显示,最优炮制工艺的平均综合评分为35.69分,与预测值(36.90分)的相对误差为3.30%。结论:所建含量测定方法操作简便、重复性好;优化所得炮制工艺预测性良好且稳定、可行。

正交试验法筛选黄精炮制工艺及其对黄精有效期研究

目的探讨不同黄精炮制条件对黄精有效期影响及黄精有效期的研究。方法选用炮制后黄精饮片,通过正交试验法筛选黄精炮制工艺对其有效期影响并通过经典恒温和留样观察试验,采用标准曲线法测定黄精多糖的含量,推导出该药有效成分含量变化规律。结果不同的炮制条件下黄精有效期影响均无统计学意义,经典恒温试验测得的黄精多糖含量变化符合一级反应规律。在20℃贮存,黄精多糖的含量变化的速度常数K20℃=7.798×10-6,该批黄精的有效期为563 d。经典恒温与留样观察结果基本一致。结论不同的炮制条件下对黄精有效期影响不大,用经典恒温试验预测中药有效期的方法可行,得出的有效期结论可靠。

护心通络方对高脂血症大鼠内皮细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:观察护心通络方对高脂血症大鼠内皮细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养建立高脂血症病理模型;50只高脂血症模型大鼠随机分为模型对照组、护心通络方低剂量组、护心通络方中剂量组、护心通络方高剂量组和辛伐他汀组,每组10只。采用Western blot测定凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达,同时利用透射电镜观察细胞凋亡、细胞结构的特征性变化。结果:随着护心通络方药物浓度的增加,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平呈现上升趋势,而促凋亡蛋白Bax呈现下降趋势(P<0.05);电镜下内皮细胞凋亡小体数目不断减少,核固缩逐渐减弱,细胞间隙减少,线粒体数目上升。结论:护心通络方能通过调整Bax和Bcl-2的蛋白表达强度降低大鼠内皮细胞凋亡率。

黄精芡实汤干预糖尿病前期人群临床疗效评价

目的:观察黄精芡实汤干预对糖尿病前期人群的临床生化指标、中医证候评分及红外线热扫描结果的影响。方法:选取2018年10月至12月期间80例糖尿病前期患者,按随机数表法分为对照组、治疗组,每组40例。对照组进行饮食、运动治疗,治疗组进行黄精芡实汤治疗。比较两组患者治疗前后中医证候积分、空腹血糖(GLU)、餐后2h血糖水平、红外线热扫描(热CT)检测结果。结果:治疗后,对比两组患者在热CT检测、中医证候评分改善方面,结果未表现出明显差异(P>0.05)。且两组患者在疗效性指标方面,患者均显示明显改善,两组患者结果无明显差异(P>0.05)。结论:采用黄精芡实汤治疗糖尿病前期人群,可有效缓解患者症状,临床效果显著。

牛黄古今来源探讨

牛黄是我国传统的名贵中药,具有极高的药用价值,在诸多经典名方中均有应用,但常因药源匮乏难以满足临床用药需求。古人认为牛黄来自不同地区的牛中或牛的肝、胆等不同部位,而现行《中国药典》认为牛黄为黄牛的胆结石,与古代来源比较,牛黄药典来源缩小了牛种纳入标准,从而加剧牛黄资源稀缺,且来源描述中存在牛的中文名与拉丁学名不一致。因此,本文对牛黄古今来源进行探讨,建议修订《中国药典》牛黄来源,增加牛种胆结石纳入标准,以期缓解临床上牛黄短缺局面,促进牛黄临床应用。

基于经典与现代炮制方法对何首乌主要化学成分变化规律研究

目的:探索何首乌经典"九蒸九晒"与"药典"两种炮制方法对主要化学成分的影响规律。方法:采用HPLC法测定两种炮制方法下何首乌二苯乙烯苷、游离蒽醌和结合蒽醌的含量,分析变化规律。结果:"九蒸九晒"炮制品中,二苯乙烯苷的含量从3.021%下降至0.905%;结合蒽醌含量从0.401%下降至0.015%;总蒽醌含量从0.681%下降至0.445%;游离蒽醌含量从0.281%上升至0.432%;"药典"方法炮制何首乌各指标成分含量与经典炮制方法的四蒸四晒品接近。结论:何首乌传统"九蒸九晒"炮制方法与"药典"炮制方法在化学成分方面存在较大区别,成分上的区别是否与肝毒性相关还需进一步探讨。

基于计算预测的茵陈蒿汤治疗肝硬化的“成分-靶标-通路”相关性分析

中药方剂是中医治疗疾病的主要形式和手段。目前,中医药研究存在整体与局部脱节、宏观与微观脱节、体内过程与活性评价脱节,建立能反映中医药整体特色的研究新策略和新方法,成为中医药现代化的当务之急。整合药理学的提出,为解决中医药研究＂碎片化＂问题提供了一条切实可行的途径。该研究基于整合药理学平台探讨茵陈蒿汤治疗肝硬化的分子机制,借助整合药理学平台V1.0版本软件的分析功能,构建茵陈蒿汤治疗肝硬化疾病＂核心成分-关键靶标-主要通路＂多维网络,从多个角度探索茵陈蒿汤治疗肝硬化潜在的分子机制。通过整合药理学平台分析茵陈蒿汤治疗肝硬化的分子机制研究中发现,茵陈蒿汤可通过氧化磷酸化、能量代谢、循环系统、甘油磷脂代谢、脂质代谢等相关通路达到对肝硬化的治疗作用。茵陈蒿汤治疗肝硬化可能与人体能量代谢和脂质代谢有较大关联。

基于整合药理学平台的斑蝥治疗结直肠癌的分子机制研究

目前,中医药研究普遍存在整体与局部、宏观与微观、体内过程与活性评价脱节,建立能反映中医药整体特色的研究新策略和新方法,成为中医药现代化的当务之急。整合药理学的提出,为解决中医药研究＂碎片化＂问题提供了一条切实可行的途径。该研究基于整合药理学平台探讨斑蝥治疗结直肠癌的分子机制,借助整合药理学平台V1.0版本软件的分析功能,构建斑蝥治疗结直肠癌疾病＂核心成分-关键靶标-主要通路＂多维网络,从多个角度探索斑蝥治疗结直肠癌潜在的分子机制。通过整合药理学平台分析斑蝥治疗结直肠癌的分子机制研究中发现,斑蝥对结直肠癌的干预作用可能与氨基酸代谢、NF-κB信号通路、免疫系统、内分泌系统、神经系统以及趋化因子信号转导通路、幽门螺杆菌感染中的上皮细胞信号转导、T细胞受体信号通路、B细胞受体信号通路等有关。

正交设计优选化瘀散凝胶贴膏基质配方

目的优选化瘀散凝胶贴膏基质配方制备工艺的最佳条件。方法采用正交设计试验,以凝胶贴膏的初黏力、持黏力、剥离强度及追随性为考察指标,对聚丙烯酸钠、明胶、甘油和丙二醇的用量进行优选,确定基质中不同辅料的最佳配比。结果优选出化瘀散凝胶贴膏最佳基质处方配比为聚丙烯酸钠∶明胶∶甘油∶丙二醇=4∶3∶3∶2。结论以最优处方基质配比制备的凝胶贴膏,表面平整光滑,具有良好的黏附性和保湿性。

不同炮制方法对黔淫羊藿化学成分及产品质量的影响

目的观察不同炮制方法对黔淫羊藿化学成分及产品质量的影响。方法选择黔淫羊藿作为研究材料,对照品选择中国药品生物制品鉴定研究所产品,测定淫羊藿、羊脂淫羊藿、炒制淫羊藿、盐制淫羊藿及酒炙淫羊藿等不同炮制方法下总黄酮及淫羊藿苷含量的不同,比较不同炮制方式对黔淫羊藿化学成分及产品质量的影响。结果淫羊藿、羊脂淫羊藿、炒制淫羊藿、盐制淫羊藿及酒炙淫羊藿的总黄酮含量分别为8.99%、9.45%、8.86%、8.88%、10.28%,淫羊藿苷含量分别为0.75%、0.87%、0.84%、0.64%、0.95%,羊脂淫羊藿及酒炙淫羊藿效果佳,炮制后总黄酮及淫羊藿苷含量较高。结论炮制前后黔淫羊藿的活性成分发生改变,且不同炮制方法改变程度具有一定差异,羊脂淫羊藿和酒炙淫羊藿方法对淫羊藿的炮制效果佳,建议临床黔淫羊藿的炮制应以羊脂淫羊藿及酒炙淫羊藿为主,能有效提高淫羊藿活性成分及产品质量。

基于网络药理学和分子对接技术探讨黄精芡实汤治疗糖尿病前期的作用机制

基于网络药理学方法分析黄精芡实汤治疗糖尿病前期的分子机制。运用系统药理学方法查找并从中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP,http://Lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php)筛选黄精芡实汤方剂中各药材的活性成分及靶点,查找糖尿病前期相关基因,确定黄精芡实汤治疗糖尿病前期的靶点。利用Cytoscape构建"药物成分-靶标"网络,筛选关键化合物。利用STRING建立蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并通过Cytoscape-CytoNCA拓扑分析筛选核心靶点。通过R-clusterProfiler对靶基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析,以预测其可能的信号通路,探究其分子机制。筛选得到黄精芡实汤79种活性成分及与糖尿病相关的靶点785个,GO和KEGG富集分析发现其功能主要与羧酸循环、肽结合、酰胺结合、水解酶活性、激酶活性调节等反应有关,富集在AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路、AMPK信号通路、IL-17信号通路、胰岛素信号通路等。Western blot检测结果显示,黄精芡实汤含药血清能够显著降低胰岛素抵抗模型细胞AKT1、AGE、RAGE蛋白表达量。黄精芡实汤治疗糖尿病前期具有多途径、多靶点、多层次的特征,主要机制包括以zhonghualiaoine、黄芩素、山柰酚、木犀草素为代表的多成分,以通过作用于AKT1靶点,阻滞AGE-RAGE信号通路发挥诱导胰岛素抵抗的作用,以改善糖尿病前期状态作用,也为后续黄精芡实汤治疗糖尿病前期的机制研究及临床应用提供依据。