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HPV-16E6基因沉默对宫颈癌CaSki细胞的影响
被引量:
4
1
作者
成海恩
张溢
+5 位作者
张翠莉
潘巍巍
石华
何柳兴
易发平
宋方洲
《第四军医大学学报》
北大核心
2006年第20期1888-1891,共4页
目的:研究特异性抑制HPVE6基因的表达对宫颈癌CaSki细胞的影响.方法:构建表达HPV-16E6基因siRNA重组质粒,体外转染CaSki细胞后检测E6mRNA表达变化及E6主要作用靶分子P53的蛋白变化;流式细胞术分析细胞周期.结果:特异RNAi表达质粒转染Ca...
目的:研究特异性抑制HPVE6基因的表达对宫颈癌CaSki细胞的影响.方法:构建表达HPV-16E6基因siRNA重组质粒,体外转染CaSki细胞后检测E6mRNA表达变化及E6主要作用靶分子P53的蛋白变化;流式细胞术分析细胞周期.结果:特异RNAi表达质粒转染CaSki细胞后明显降低了E6mRNA水平,且P53蛋白水平增高.流式细胞仪测定发现细胞停滞在G0-G1期,细胞增殖受到抑制.结论:采用RNA干扰技术能沉默CaSki细胞中整合的HPV-16E6基因的表达,使细胞中抑癌蛋白P53水平增高,导致肿瘤细胞生长停滞.
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关键词
RNA干扰
宫颈肿瘤
乳头状瘤病毒
人
E6基因
下载PDF
职称材料
表达HPV-16 E6基因siRNA真核载体的构建及体外转染效率鉴定
被引量:
1
2
作者
成海恩
张溢
+5 位作者
张翠莉
石华
潘巍巍
易发平
马永平
宋方洲
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2006年第5期636-640,676,共6页
目的:采用RNA干扰技术选择性的沉默宫颈癌Ca Ski细胞株中HPV-16 E6基因的表达。为观察HPV-16 E6基因的小干扰片段能否在Ca Ski细胞特异性的抑制E6基因的表达,构建能在哺乳动物细胞中表达E6小干扰RNA的真核表达质粒,并观察其转染效率。方...
目的:采用RNA干扰技术选择性的沉默宫颈癌Ca Ski细胞株中HPV-16 E6基因的表达。为观察HPV-16 E6基因的小干扰片段能否在Ca Ski细胞特异性的抑制E6基因的表达,构建能在哺乳动物细胞中表达E6小干扰RNA的真核表达质粒,并观察其转染效率。方法:根据HPV-16 E6基因序列,设计特异性的小干扰片段,并将其定向克隆到带有卡那霉素抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1上,将其转染至Ca Ski细胞中,观察荧光表达,鉴定其转染效率。结果:通过酶切鉴定和序列测定,成功的构建二条表达小干扰RNA的质粒及其阴性对照质粒,并成功的转染到Ca Ski细胞株中,转染效率达到50%以上。结论:siRNA真核表达载体的构建及体外转染的成功为下一步研究奠定了良好的基础。
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关键词
HPV16
E6基因
RNA干扰
转染
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职称材料
题名
HPV-16E6基因沉默对宫颈癌CaSki细胞的影响
被引量:
4
1
作者
成海恩
张溢
张翠莉
潘巍巍
石华
何柳兴
易发平
宋方洲
机构
重庆医科大学生物化学与分子生物学
教研室
公共卫生学院生殖医学教研室
重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室
重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室
出处
《第四军医大学学报》
北大核心
2006年第20期1888-1891,共4页
基金
国家自然科学基金(30371479)
文摘
目的:研究特异性抑制HPVE6基因的表达对宫颈癌CaSki细胞的影响.方法:构建表达HPV-16E6基因siRNA重组质粒,体外转染CaSki细胞后检测E6mRNA表达变化及E6主要作用靶分子P53的蛋白变化;流式细胞术分析细胞周期.结果:特异RNAi表达质粒转染CaSki细胞后明显降低了E6mRNA水平,且P53蛋白水平增高.流式细胞仪测定发现细胞停滞在G0-G1期,细胞增殖受到抑制.结论:采用RNA干扰技术能沉默CaSki细胞中整合的HPV-16E6基因的表达,使细胞中抑癌蛋白P53水平增高,导致肿瘤细胞生长停滞.
关键词
RNA干扰
宫颈肿瘤
乳头状瘤病毒
人
E6基因
Keywords
RNA interference
cervix neoplasms
papillomavirus, human
E6 gene
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
表达HPV-16 E6基因siRNA真核载体的构建及体外转染效率鉴定
被引量:
1
2
作者
成海恩
张溢
张翠莉
石华
潘巍巍
易发平
马永平
宋方洲
机构
重庆医科大学基础医
学院
生物化学与分子生物学
教研室
重庆医科大学
公共卫生学院生殖医学教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2006年第5期636-640,676,共6页
基金
国家自然科学基金(No:30371479)
文摘
目的:采用RNA干扰技术选择性的沉默宫颈癌Ca Ski细胞株中HPV-16 E6基因的表达。为观察HPV-16 E6基因的小干扰片段能否在Ca Ski细胞特异性的抑制E6基因的表达,构建能在哺乳动物细胞中表达E6小干扰RNA的真核表达质粒,并观察其转染效率。方法:根据HPV-16 E6基因序列,设计特异性的小干扰片段,并将其定向克隆到带有卡那霉素抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1上,将其转染至Ca Ski细胞中,观察荧光表达,鉴定其转染效率。结果:通过酶切鉴定和序列测定,成功的构建二条表达小干扰RNA的质粒及其阴性对照质粒,并成功的转染到Ca Ski细胞株中,转染效率达到50%以上。结论:siRNA真核表达载体的构建及体外转染的成功为下一步研究奠定了良好的基础。
关键词
HPV16
E6基因
RNA干扰
转染
Keywords
HPV 16 E6 gene
RNA interference
Transfection
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
R349.5 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HPV-16E6基因沉默对宫颈癌CaSki细胞的影响
成海恩
张溢
张翠莉
潘巍巍
石华
何柳兴
易发平
宋方洲
《第四军医大学学报》
北大核心
2006
4
下载PDF
职称材料
2
表达HPV-16 E6基因siRNA真核载体的构建及体外转染效率鉴定
成海恩
张溢
张翠莉
石华
潘巍巍
易发平
马永平
宋方洲
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2006
1
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职称材料
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