拉布拉多犬低剂量性控冻精的人工授精试验研究

为了评估拉布拉多犬低剂量性控冻精的人工授精效果,试验采用经流式细胞仪分离的拉布拉多犬X冻精和Y冻精,开展低剂量性控冻精的人工授精技术方法研究。结果表明:X冻精后代性别控制准确率为83.33%,Y冻精后代性别控制准确率为82.35%;自然交配母犬情期受胎率为84.00%,显著高于性控冻精母犬受胎率71.43%(P<0.05);平均窝产仔数、仔犬成活率差异均不显著(P>0.05);性控精液与自然交配所产后代初生、1月龄、2月龄、3月龄、4月龄的体重和1~4月龄的体尺差异不显著(P>0.05)。

H3N2亚型犬流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立及应用

为了快速诊断H3N2亚型犬流感病毒(CIV)感染,根据H3N2亚型CIV的M和HA基因序列,设计了3组LAMP引物,优化反应条件,建立了H3N2亚型CIV的RT-LAMP检测方法。结果表明,RT-LAMP方法能在63℃恒温条件下,在45min内完成扩增,通过反应管中预加的荧光染料颜色的变化实现目视化判定。该方法对犬的常见病原无交叉反应,具有较好特异性;灵敏度是常规RT-PCR方法的100倍。该方法操作简单、快速灵敏、特异性强,适合现场应用,对H3N2亚型CIV的检测具有实际的应用价值。

ASIC1基因SNP_(s)检测及其与史宾格犬胆量性状的关联分析

为了研究史宾格犬酸敏感离子通道1(acid-sensing ion channel 1,ASIC1)基因的多态性及其与胆量性状之间的关系,试验采用DNA测序技术,对166只史宾格犬ASIC1基因的多态性进行研究,并利用SPSS软件中的一般线性模型(general linear model,GLM)分析了ASIC1基因与胆量性状的关系。结果表明:在ASIC1基因外显子2、外显子4和外显子5上各发现了一个单核苷酸多态(single nucleotide polymorphic,SNP)位点,分别为9G>C、102A>C和20G>A;9G>C和20G>A位点属于中度多态,102A>C位点属于低度多态,且这3个位点均不符合Hardy-Weinberg平衡状态;102A>C与胆量评分显著相关(P<0.05),其中AC型和CC型胆量评分显著高于AA型(P<0.05),AC型和CC型之间差异不显著(P>0.05)。笔者发现了一个与史宾格犬胆量性状显著相关的SNP位点,其可作为史宾格犬早期胆量性状的分子标记,用于史宾格犬早期胆量性状的分子标记辅助选择。

基于混池测序的犬恐惧行为相关变异位点的初步筛选

为了初步筛选与犬恐惧行为相关的变异位点,对6~8月龄的犬进行严格的恐惧行为测试,根据测试结果选取恐惧行为极端差异的史宾格犬20头,分为高恐惧行为组(FBH)和低恐惧行为组(FBL),每组各10头,采用混池测序的方法检测史宾格犬全基因组的单核苷酸多态性位点(SNP)和插入缺失位点(InDel),筛选与史宾格犬恐惧行为相关的变异位点。结果显示:通过特定条件的筛选,FBH组和FBL组存在差异的SNPs共14个,InDels共2个,这16个位点位于9个基因上。研究表明,通过混池测序的方法可以初步筛选出与犬恐惧行为相关的变异位点,进一步分析确定与恐惧行为遗传效应相关的变异位点,可以为犬遗传育种改良提供理论依据。