同源重组敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞的构建

【目的】获得敲除肌肉生长抑制素(MSTN)基因的猪胎儿成纤维细胞。【方法】打靶载体的构建:以Neo为正筛选基因、HSV-tk为负筛选基因。在Neo的两侧分别插入同源长臂和同源短臂。同源长臂5382bp,包含MSTN基因的部分5′端,全部的exon1,intron1和exon2及大部分intron2;同源短臂844bp,包含部分exon3及3′端的部分序列。取35d胎龄的大白猪,用胰酶消化法,分离胎儿成纤维细胞并对其进行培养和建系。采用脂质体法将打靶载体导入胎儿成纤维细胞中,转染后的细胞采用250μg·ml-1G418筛选7d,再用200μg·ml-1G418+2μmol·L-1GANC维持筛选。用RT-PCR法检测转染前转染后细胞MSTN基因表达量。【结果】成功构建了对猪MSTN基因部分intron2和exon3区域进行敲除的替代型打靶载体。共得到5个具有药物抗性的细胞克隆,经PCR检测,其中一个细胞克隆发生了正确的同源重组。转染后细胞MSTN基因表达量明显降低。【结论】获得了敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞。

关于常见树皮浸提物的荧光光谱分析

近年来随着微量物证鉴定技术水平的提高,微量物证在各种案件的侦破过程中发挥出越来越重要的作用。树皮是在凶杀、盗窃、毁坏树木、交通事故案件中常见的一种微量物证。文章利用荧光光谱法、一阶导数荧光光谱法对常见树皮的浸提物进行了分析。结果表明,不同树种树皮浸提物的荧光光谱图呈现的峰数、峰位及峰形有一定的差异;一阶导数光谱图中正、负峰的峰数及振幅值的比值差异显著,从而确定了利用荧光光谱法鉴定树皮种类的依据。

92式9毫米与勃朗宁9毫米手枪射击弹痕研究

QSZ92式9毫米手枪和勃朗宁9毫米手枪是发射同一种枪弹的两种枪支,文章通过实验观察这两种枪支射击弹头上的进膛痕迹、拔弹痕迹、坡膛痕迹和线膛痕迹的形态特征,统计分析了痕迹出现的位置和长度及宽度,对这两种枪支的射击弹头痕迹作了比较研究。

缉毒犬搜索集装箱的训练方法探析

一、训练中的难点 1．货物密封性好，搜毒犬感知气味的条件难度高。2．货物品种繁多，不同种类的货物散发出不同的气味，在有限的空间增加了搜毒犬工作的干扰因素。3．集装箱内货物的立体堆放形式提高了搜毒犬准确定位的难度。4．集装箱的较大立体空间需要搜毒犬更长的工作时间和更细的工作状态。