冷冻疗法对实验性大鼠关节炎镇痛效果的研究

目的:探讨冷疗对佐剂性关节炎消炎镇痛的效果。方法:采用弗氏完全佐剂建立实验性大鼠关节炎;应用超低温冷冻进行治疗。结果:注射佐剂后7 d进行冷疗,治疗组:①患肢足容积明显小于对照组(P<0.05);②患肢痛积分明显低于对照组(P<0.05);③PLT显著高于对照组和空白组(P<0.05);④HGB明显低于空白组和对照组(P<0.05);⑤血清钾含量高于对照组(P<0.05)。结论:冷疗在早期对实验性大鼠关节炎具有一定的疗效。

高原土生动物低氧适应机制研究进展

高原低氧适应是高原医学研究的核心,高原低氧适应的机制主要是围绕缺氧而建立起的一系列复杂的代偿。高原土生动物是研究高原低氧适应的理想模型,以藏猪、高原鼠兔、藏羚羊和蕨麻小型猪为例,研究者们多以其血液学特征、肺血管结构和功能及低氧适应相关基因等方面作为基础研究,但目前在细胞及分子水平研究不够深入,研究土生动物低氧适应机制,可以为高原实验动物的开发研究提供理论基础。

血清CEA,ProGRP,NSE和CYFRA21-1联合检测在肺癌诊断中的应用研究

目的研究血清癌胚抗原（CEA）、胃泌素释放前体（ProGRP）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和细胞角蛋白19片段（CYFRA21—1）联合检测在肺癌诊断中的应用。方法空腹取诊断明确的133例肺癌患者、67例肺部良性病变患者及同期66例体检健康者（对照组）的静脉血，用化学发光法检测血清CYFRA21-1，CEA，NSE和ProGRP水平，并计算敏感度、准确度和特异度。结果CYFRA21—1，CEA，NSE和ProGR水平，肺癌患者血清分别为6．31±1．04ng／ml，20．58±2．41ng／ml，32．74±3．24ng／ml和125．78±15．32pg／ml，肺良性病变患者血清分别为1．93±0．52ng／m1，2．93±0．82ng／ml，10．49±1．93ng／ml和48．32±6．72pg／ml，对照组血清分别为1．56±0．45ng／ml，2．67±0．74ng／ml，8．34±1．2ng／ml和35．78±4．2pg／ml，肺癌患者血清CEA，ProGRP，NSE，CYFRA21—1水平均高于肺良性病变患者（t=1．48～2．78，P=0．13～0．25）和对照组（t=1．981～2．371，P=0．21～0．41），差异均有统计学意义（P〈0．05）。CYFRA21—1，NSE，CEA和Pro—GRP单项检测肺癌的敏感度分别为61．65％，45．86％，52．63％和63．91％，准确度为72．36％，63．81％，67．34％和74．87％。联合两项、三项检测肺癌，敏感度为72％～89％，准确度为78．89％～89．44％。四项联合检测肺癌的敏感度（92．48％）、准确度（90．45％）最高。结论血清标志物能较好地诊断肺癌，联合多种血清学指标检测可提高肺癌诊断的敏感度、准确度。

不同海拔地区两种小型猪血液生理生化指标比较

本试验旨在比较高原蕨麻小型猪与平原巴马小型猪的血液生理生化指标差异,为高原蕨麻小型猪的实验动物化提供理论基础。试验分别在高原地区和西安市采集高原蕨麻小型猪与巴马小型猪血样,检测10项血液生理指标和14项血液生化指标,并对结果进行统计分析。结果显示,血液生理指标中高原蕨麻小型猪的红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCMH)均极显著高于巴马小型猪(P<0.01),血小板(PLT)、红细胞分布列宽变异系数(RDW-CV)和红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)与巴马小型猪相比差异显著(P<0.05);血液生化指标中高原蕨麻小型猪γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、葡萄糖(GLU)、肌酐(CRE)均极显著高于巴马小型猪(P<0.01),其余指标均无显著差异(P>0.05)。结果表明,高原蕨麻小型猪具有低氧适应的生理特征,与巴马小型猪相比有独特的高原适应性,具有开发成为高原疾病动物模型的潜力。

外周血粒细胞CD55,CD59和FLAER检测在贫血及PNH诊断中的意义

目的探讨CD55,CD59和嗜水气单胞菌毒素变异体(FLAER)检测在各类贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者诊断中的临床意义。方法选取2009年1月~2017年3月期间收集的30例健康对照,22例PNH,33例再生障碍性贫血(AA),37例缺铁性贫血(IDA),45例巨幼细胞性贫血(MA),30例溶血性贫血(HA)和31例骨髓增生异常综合征(MDS)患者,用多参数流式细胞仪同时检测外周血粒细胞CD55,CD59和FLAER阴性细胞比例,代表检出的PNH克隆数。结果 PNH,AA和MDS组FLAER检出率均高于CD55和CD59,但只有AA患者差异有统计学意义(X^2=7.759,5.518,P=0.005,0.019<0.05)。PNH和AA组CD55,CD59和FLAER阴性细胞比例均显著高于正常对照组及其他贫血组(t=2.163~17.890,P=0.000~0.038<0.05)。PNH组FLAER阴性细胞比例高于CD59,CD59高于CD55,差异均具有统计学意义(t=2.503~6.308,P=0.000~0.016<0.05)。结论 CD55,CD59和FLAER在PNH诊断及与其他贫血性疾病鉴别诊断中具有重要价值,尤其是存在微小PNH克隆的MDS和AA患者,FLAER优于CD59,CD59优于CD55。

癫大鼠血清、海马组织中神经元特异性烯醇化酶和S-100β蛋白的变化及其临床意义

目的探讨红藻氨酸(KA)诱导癫疒间大鼠血清及海马组织中神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S100β蛋白(S100β)的变化及其临床意义。方法180只Wistar大鼠随机分为对照组、KA组和卡马西平(CBZ)组,后两组再按癫疒间发作后1h、4h、12h、24h、48h和72h不同时点分为6个亚组。以放射免疫法(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定大鼠血清和海马匀浆液中NSE和S100β的变化。结果癫疒间发作72h内,血清和海马匀浆液中NSE和S100β的含量是一个动态变化过程,且呈同步变化的趋势,在12h时均达到峰值。在4～48h时,KA组和CBZ组的二者含量均明显高于对照组(P<0.05～0.01)。结论癫疒间发作后NSE和S100β的含量升高,二者可作为癫疒间发作后脑组织损伤的一个参考指标。

血必净治疗高原多器官功能障碍综合征猪模型的疗效及治疗前后肺组织中 NF －κB mRNA 的表达变化

目的：观察血必净治疗巴马小香猪高原多器官功能障碍综合征（ H－MODS）模型的疗效及治疗前后肺组织中NF－κB mRNA的表达，进一步揭示血必净对H－MODS的防治作用。方法24只巴马小香猪麻醉后随机抽取8只作为空白对照组（ A组），其余16只采用内毒素（ LPS）制作H－MODS模型后，随机分为模型组（ B组）、血必净治疗组（ C组），每组8只。血必净治疗组给予血必净注射液3 mL／kg，2次／d；对照组及模型组给予等体积生理盐水，2次／d；共治疗3 d。于不同时间段观察巴马小香猪血白细胞的变化趋势。采用RT－PCR法测定肺组织NF－κB mRNA表达量变化。结果①模型组、血必净治疗组动物死亡率分别为33．3％、16．6％。②与对照组比较，24 h模型组肺泡腔内可见弥散性瘀血，巨噬细胞增多，且有大量红细胞渗出及少量中性粒细胞浸润，肺泡间隔增宽，毛细血管扩张充血，24 h血必净治疗组肺泡腔内出血较少，肺泡壁模糊，有少量红细胞渗出，肺泡间隔仍有增厚。③模型组及血必净治疗组血白细胞（ WBC）呈“勺型”变化。模型组48 h WBC变化幅度较治疗组更明显（ P＜0．05）。④与对照组比较，模型组、治疗组24 h NF－κB mRNA表达量均显著上升（P＜0．01）；与模型组比较，治疗组24 h NF－κB mRNA表达量升高幅度较低（ P＜0．05）；模型组、治疗组72 h NF－κB mRNA表达量仍高于对照组，以模型组升高最明显（ P＜0．05）。结论血必净可明显减轻内毒素所诱导的H－MODS模型动物死亡率，减轻内毒素所致的炎症反应，下调肺组织NF－κB mRNA的表达量，提高H－MODS的救治成功率。

模拟不同海拔低氧对大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴及肺组织VEGF和HIF-1表达的影响

目的探讨不同海拔梯度低氧环境下下丘脑-垂体-甲状腺(hypothalamic-pituitary-thyroid,HPT)轴的功能变化、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平及与高原肺水肿的相关性。方法将96只大鼠随机分为4组,即海拔1 500 m组(对照组)、3 500 m组、5 000 m组、6 000 m组,各组进一步分为缺氧12 h、24 h、48 h,每组8只,共12组。对照组置于我院动物实验科(1 500 m,兰州海拔)饲养,各缺氧组大鼠分别置于模拟不同海拔低压氧舱内,分别放置12 h、24 h、48 h后取出;分离肺组织,干湿重质量法测定大鼠肺含水量,HE染色观察大鼠肺组织改变;ELISA法测定血清促甲状腺激素释放激素(thyrotropin-releasing hormone,TRH)、促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)含量;RT-PCR法测定缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)m RNA、VEGF m RNA。结果高原缺氧模型组大鼠肺组织出现不同程度水肿;大鼠肺含水量增加;HPT轴分泌的TSH、T3、T4含量随着海拔高度呈现出下降趋势,TRH含量随海拔高度上升而升高(P<0.05);HIF-1 m RNA、VEGF m RNA随海拔高度升高呈上升趋势(P<0.05)。结论随着海拔梯度的升高,HPT轴功能受到抑制,VEGF水平升高,并与肺组织水肿密切相关,提示HPT轴的应激调节机制在高原肺水肿的发病中发挥着重要作用。

CD4^+CD25^+调节性T细胞在多脏器功能障碍综合征中的变化及药物干预

目的探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)在多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠外周血中的变化及乌司他丁和血必净的干预效果。方法以内毒素(LPS)建立MODS模型,并以乌司他丁和血必净注射液干预。应用流式细胞仪检测Treg水平变化。结果模型组、乌司他丁组和血必净组CD4^+CD25^+Treg的百分比明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);乌司他丁组和血必净组的水平又明显高于模型组(P<0.05或P<0.01),但二组相比无统计学差异(P>0.05)。结论 CD4^+CD25^+Treg在大鼠MODS中的百分比升高,并参与了MODS的病情调节;乌司他丁和血必净能调升CD4^+CD25^+Treg的相对含量。

凋亡相关基因bcl-2和Bax在大鼠应激性溃疡中的表达及作用

目的探讨凋亡相关基因bcl-2和Bax在应激性溃疡中表达的变化及中药组方应激宁对其变化的影响。方法Wistar大鼠水浸-束缚应激(WRS)4h,用免疫组织化学方法检测胃黏膜组织bcl-2和Bax蛋白的表达。结果bcl-2和Bax在正常大鼠胃黏膜组织中有散在的表达;应激宁组bcl-2阳性细胞数目较应激组增多,两者具有明显的差异(P<0.05);应激组Bax阳性细胞数目较应激宁组增多,两者也具有明显的差异(P<0.05);在应激组和应激宁组中,Bax阳性细胞数目均比bcl-2增加(P<0.05)。结论WRS后胃黏膜组织bcl-2和Bax的表达差异很可能参与了胃黏膜损伤和修复过程,应激宁对胃黏膜的损伤具有一定的保护作用。

红藻氨酸致痫大鼠海马区神经元凋亡的动态变化

目的探讨红藻氨酸(kainicacid,KA)诱导的大鼠癫痫状态海马神经元的形态学变化、凋亡情况及抗痫药物的神经保护作用。方法90只Wistar大鼠随机分为对照组、KA组和卡马西平(CBZ)组,后两组再按癫痫发作后1h、4h、12h、24h、48h和72h不同时点分为6个亚组。KA注射后,观察大鼠癫痫发作后的行为学变化;采用HE染色法观察大鼠癫痫状态海马CA1、CA3区神经元形态学改变;采用原位细胞凋亡检测法观察癫痫状态海马CA1、CA3区神经元凋亡情况。结果KA注射后,大鼠出现严重的惊厥;在癫痫发作后12h,海马CA1区、CA3区开始出现凋亡细胞[CA1区:KA组(6.53±1.36)个,CBZ组(5.85±1.68)个;CA3区:KA组(9.58±1.63)个,CBZ组(7.36±1.27)个],48h凋亡细胞达到峰值(P<0.01)[CA1区:KA组(42.263±3.28)个,CBZ组(35.39±2.36)个;CA3区:KA组(57.64±12.76)个,CBZ组(38.37±13.65)个]。经CBZ干预后凋亡细胞明显减少(P<0.05)。结论癫痫发作后的迟发性神经元死亡很可能是由凋亡引起的,CBZ可抑制癫痫状态海马神经元凋亡。

中国西北高原汉族人群HLA-A*/-B*-DRB1*基因多态性与再生障碍性贫血相关性研究

目的:探讨HLA基因与再生障碍性贫血(AA)发病之间的相关性,以期寻找AA易感基因。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)分型技术,对西北高原汉族人群50例再生障碍性贫血患者和183名健康无血缘关系对照者进行HLA-A*/-B*-DRB1*基因多态性检测,并对HLA基因分布频率和优势比(OR)进行分析研究。结果:与正常对照组相比,AA患者组基因频率HLA-A*0201(45.0%vs 33.1%)、B*1501(11.0%vs5.5%)、B*5501(9.0%vs 4.1%)和DRB1*0901(19.0%vs 10.8%)显著增高,优势比(OR)为1.657、2.138、2.314和1.932,x2为4.882、3.876、3.863和4.473(P<0.05)。AA组A*0301基因频率显著低于正常对照组(4.0%vs 10.7%),其OR为0.349,x2为4.154(P<0.05),HLA-A*0201男性基因频率低于女性(38.2%vs 59.4%),且差异具有显著性(P<0.05)。结论:HLA-A*0201、B*1501、B*5501和DRB1*0901基因和AA存在正相关,A*0301和AA存在负相关,其中HLA-A*0201还具有性别差异性。

乌司他丁对羊多脏器功能障碍综合征的防护作用

目的探讨乌司他丁(UTI)对多脏器功能障碍综合征(MODS)的防治作用。方法 21只杜泊绵羊随机分为对照组、模型组、UTI治疗Ⅰ组和治疗Ⅱ组。模型组、治疗Ⅰ组和Ⅱ组静脉注射内毒素(6μg/kg),治疗Ⅰ组静脉注射UTI(30000U/kg),1次/d,连续3d,治疗Ⅱ组静脉注射UTI(30 000U/kg),2次/d,连续3d。各组分别于0,1,2,3,6和12h时间点测定动脉氧分压;于0,3,6,12,24,48和72h测定脏器生化指标天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、肌酐(Cr)和血常规指标。结果与模型组比较,UTI治疗组的氧分压下降幅度小;治疗组AST,ALT,TBIL和Cr的升高明显低于模型组(P<0.05),治疗Ⅰ组和Ⅱ组之间各项指标改善无统计学差异;模型组、治疗Ⅰ组和Ⅱ组绵羊的死亡率分别为66.6%、50.0%和33.3%。结论预防性应用UTI能降低内毒素诱导的MODS模型绵羊的死亡率,提高动脉氧分压,减轻内毒素所致的肺、肝和肾等脏器的损伤,具有保护作用。

蕨麻猪与巴马小型猪脏器指数及低氧相关基因的比较

目的研究蕨麻猪与巴马小型猪脏器指数及低氧相关基因表达量的差异。方法采用Taq Man探针实时定量PCR(real-time quantitative PCR)技术,检测蕨麻猪与巴马小型猪心、肝、脾、肺、肾低氧反应基因表达量的变化。结果蕨麻猪的肾脏、脾脏指数低于巴马小型猪,蕨麻猪的心脏、肺脏指数高于巴马小型猪。蕨麻猪血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)与低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1,HIF-1α)在肺、肾中的表达量明显比普通猪高(P<0.05或P<0.01);促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)只在肺中比巴马小型猪高(P<0.05)。结论不同物种脏器指数可能是物种对物质环境、能量环境、外界病原体、能量代谢需求等综合因素进化适应的结果。蕨麻猪低氧相关基因明显比巴马小型猪高,揭示在基因方面蕨麻猪具有较强的高原适应性。

乌司他丁联合血必净对内毒素致绵羊多脏器功能障碍综合征的防治研究

目的探讨乌司他丁(UTI)联合血必净(XBJ)对内毒素(LPS)致多脏器功能障碍综合征(MODS)的防治作用。方法将50只绵羊随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、乌司他丁组(C组)、血必净组(D组)和乌司他丁+血必净组(E组),每组10只。利用LPS建立MODS模型,并以UTI、XBJ和UTI+XBJ进行防治。观察各组的体征表现,测定不同时点各组的血气、血常规、血清生化指标的改变。结果 UTI+XBJ组绵羊的体征表现明显减轻、死亡率明显降低,PaO2、生化指标和白细胞数目得到了有效的控制。结论乌司他丁联合血必净较单独应用能明显改善LPS诱导的MODS动物体征表现、降低死亡率,对肺脏、肝脏和肾脏等多脏器损伤具有良好的防治作用。

内毒素致多脏器功能障碍综合征绵羊模型的建立

目的建立简单有效的内毒素(lipopolysaccharide,LPS)致多脏器功能障碍综合征(multiple orgendysfunction syndrome,MODS)绵羊模型,观察其血气、血常规和血清生化等的变化特点。方法绵羊全麻后,3μg/kg和6μg/kg LPS分别于30 min和60 min内静脉泵入实验I组和实验II组。以不同时点测定血气、血常规和血清生化的变化。结果 LPS静注后,实验I组和II组绵羊的死亡率分别为33.3%和50%;两实验组3 h内氧合指数明显降低(P<0.05或P<0.01);不同时点天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)和肌酐(CRE)明显升高(P<0.05或P<0.01);白细胞(WBC)数目在2 h明显降低,之后明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论两种剂量的LPS均能成功地建立绵羊MODS模型;血气、血常规和血清生化等均有明显的变化。

缺血缺氧脑损伤大鼠IL-6和TNF-α的变化及其临床意义

目的:探讨缺血缺氧脑损伤大鼠白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的动态变化及其临床意义。方法:90只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,再将实验组按造模后4h、8h、12h、24h和48h不同时点分为5个亚组。利用夹闭双侧颈总动脉,并进行缺氧的方法制备模型。以放射免疫分析(RIA)测定血清和脑组织中IL-6和TNF-α的变化。结果:造模后48h内,血清和脑组织中IL-6和TNF-α的水平呈动态变化。实验组中各亚组的两者含量均明显高于对照组(P<0.01或P<0.05)。血清和脑组织中两者分别在24h和12h时达到峰值。结论:缺血缺氧后不同时点IL-6和TNF-α的含量呈动态变化;两者可作为缺血缺氧后脑组织损伤程度及修复的临床指标。

缺血缺氧脑损伤大鼠NSE和S-100β蛋白的变化及其临床意义

目的探讨缺血缺氧脑损伤大鼠神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S-100β蛋白(S-100β)的变化及其临床意义。方法75只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,再将实验组按造模后4 h、8 h、12 h和24 h不同时点分为4个亚组。利用夹闭双侧颈总动脉,并进行缺氧的方法制备模型。以放射免疫法(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定血清和脑组织中NSE和S-100β蛋白的变化。结果造模后24 h内,血清和脑组织中NSE和S-100β的含量是一个动态变化过程,呈同步变化的趋势,在12 h时均达到峰值。而且,实验组中各亚组的二者含量明显高于对照组(P<0.01或P<0.05)。结论缺血缺氧后不同时点NSE和S-100β的含量呈动态变化;二者可作为缺血缺氧后脑组织损伤程度及修复的一个临床参考指标。

血必净对大鼠多脏器功能障碍综合征炎性因子的影响

目的探讨血必净(XBJ)对多脏器功能障碍综合征(MODS)炎性因子的影响。方法将90只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组与XBJ组。尾静脉注射内毒素(LPS)(15μg/kg)建立MODS模型。观察各组的体征表现,用ELISA方法检测TNF-α、IL-1α、IL-4和IL-10的表达水平。结果①对照组、模型组和XBJ组的死亡率分别为:0、37%和20%;②与模型组相比XBJ可促进了TNF-α的表达,同时抑制IL-1α的表达,且TNF-α和IL-1α高表达集中在6～24 h;③模型组与XBJ组IL-4的表达量在6～12 h与对照组相比明显升高(P<0.05);模型组IL-10在6～48 h与对照组相比明显升高(P<0.05);XBJ组IL-10的表达水平在6 h与对照组相比明显升高(P<0.05)。结论 XBJ能降低LPS介导的大鼠MODS的死亡率,可同时促进TNF-α释放和抑制IL-1α、IL-4和IL-10释放,有效改善MODS的反应状态。

高原多脏器功能障碍综合征蕨麻小型猪模型的建立及促肾上腺皮质激素与皮质酮的变化

目的研究高原多脏器功能障碍综合征（H－MODS）蕨麻小型猪模型的建立及促肾上腺皮质激素（ACTH）与皮质酮（CORT）的变化特点。方法选用3个剂量（低、中、高）内毒素（LPS）诱导高原土生蕨麻小型猪成功建立H．MODS模型（B、C、D组），生理盐水为对照组（A组）。检测不同时点血清生理生化指标及ACTH与CORT表达水平。结果各组蕨麻小型猪泵入LPS后肌酸激酶（CK）在3～24h升高，48h之后明显降低；天门冬氨酸转氨酶（AST）在6—24h升高；丙氨酸氨基转移酶（ALT）在12～24h的水平显著高于0h和A组；总胆红素（TBIL）在24—48h的水平显著升高：肌酐（CRE）在6h水平明显高于0h。白细胞数量在0～6h升高，6～24h降低。ACTH表达量在泵入LPS后开始上升，在12h后降低，在72h基本恢复到与对照组相同水平；CORT在泵入LPS后3h上升至最高，后又开始下降，24h后开始上升，在72h时基本恢复到正常。低、中、高剂量组的变化趋势基本相同。结论高原MODS形成时机体处于严重感染应激状态下，ACTH与CORT表达水平出现剧烈变化，下丘脑－垂体－肾上腺轴对机体调节的动态平衡被打破而出现紊乱。