独一味总环烯醚萜苷分离纯化工艺的优化

目的优化独一味总环烯醚萜苷的制备工艺,获取纯度相对较高的总环烯醚萜苷。方法以甲醇-水为流动相,梯度洗脱方式建立分离分析独一味总环烯醚萜苷的高效液相色谱方法,实现各组分的最佳分离,统计、记录其三维吸收图谱,并结合紫外全波长扫描,对前期制备的独一味总环烯醚萜苷中影响纯度的杂质特征进行分析,根据杂质特性优化大孔树脂结合聚酰胺柱制备过程,紫外实时监测,剔除杂质,产品溶液经冷冻干燥获得冻干粉,并以HPLC对比前后制备工艺产品成分差异。结果工艺优化前产品中环烯醚萜苷含量为69.06%,优化后含量为90.60%,含量提升21.54%;本次制备总产率为16.70%(以水提取物的质量为参照),总环烯醚萜苷转移率为74.72%(相对于水提取物中总环烯醚萜苷的质量)。结论优化过程简单,操作步骤可控,易于实现,纯化效果显著。

绿原酸对缺氧环境下PC12细胞活性及缺氧诱导因子1α表达的影响

目的:研究绿原酸对缺氧环境下PC12细胞活性及缺氧诱导因子-1α表达的影响。方法:用三气培养箱建立PC12细胞缺氧模型,观察绿原酸对缺氧环境下培养的PC12细胞形态、细胞活力、LDH活性的影响、实时荧光定量PCR检测HIF-1α的基因表达。结果:与缺氧模型组比较,绿原酸可显著提高缺氧PC12细胞存活率、降低LDH活性、改变细胞周期、提高HIF-1α基因的表达水平。结论:绿原酸能提高缺氧PC12细胞的活性并影响缺氧诱导因子1α的表达。

藏紫菀醇提物的抗氧化与抗缺氧作用研究

目的:对藏紫菀乙醇提取物(EEAS)的体外抗氧化及抗缺氧作用进行研究。方法:采用DPPH·、羟自由基、超氧阴离子清除和还原力检测方法考察EEAS的抗氧化作用,并对其总黄酮和总多酚含量进行测定;利用缺氧PC12细胞模型对其抗缺氧作用进行评价。结果:EEAS富含黄酮和多酚化合物,对3种自由基均表现出一定的清除活性,其中对超氧阴离子的清除活性优于VC,同时表现出一定的Fe3+还原能力。EEAS能显著增加缺氧PC12细胞的活力,降低缺氧PC12细胞LDH活性和MDA含量,提高SOD、CAT、GSH-Px及T-AOC活性。结论:EEAS是一种活性优异的天然抗氧化剂,同时对缺氧导致的PC12细胞氧化损伤具有明显的保护作用。

HPLC结合PDA、MS分离制备独一味中9种环烯醚萜苷

目的:建立系统分离制备独一味中9种环烯醚萜苷类化合物单体的色谱方法,并结合PDA与质谱法对目标化合物进行定性鉴定。方法:采用甲醇-水梯度洗脱方式进行系统分离分析,根据色谱图收集流出液,流出液氮气吹干得到目标化合物,采用RP-HPLC测定相应化合物的质量分数,PDA、MS定性鉴定。结果:经RP-HPLC分析,部分目标化合物质量分数高于90%,PDA、MS最终确定9种环烯醚萜苷类化合物分别为:Phlorigidoside C(1)、Schismoside(2)、Sesamoside(3)、Shanzhiside methylester(4)、6-O-Acetyl shanzhiside methylester(5)、PhloyosideⅡ(6)、Penstemoside(7)、Loganin(8)、8-O-Acetyl shanzhiside methylester(9)。结论:该方法对各组分分离分析效果好,简单易行,可用于独一味中9种环烯醚萜苷类化合物的定性分析和制备。

藏药甘肃马先蒿有效成分提取工艺研究

目的:优化藏药甘肃马先蒿提取工艺并比较不同产地甘肃马先蒿中2种成分毛蕊花糖苷及异毛蕊花糖苷的含量差异。方法:以毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷及干膏得率为综合评价指标,通过单因素试验及正交试验对提取溶剂、溶剂量、提取时间及提取次数进行考察以优化提取工艺,并进行验证试验。比较甘肃、青海及四川3个产地的甘肃马先蒿中2种成分毛蕊花糖苷及异毛蕊花糖苷的含量。结果:最优提取工艺为加8倍量的50%乙醇提取3次,每次90 min。验证试验中毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷含量及干膏得率平均值分别为3.49%、1.26%、37.99%(RSD分别为1.28%、1.32%、1.97%,n=3)。以青海产甘肃马先蒿中毛蕊花糖苷及异毛蕊花糖苷含量相对较高。结论:优化的提取工艺合理、稳定、可行,不同产地的甘肃马先蒿中指标成分的含量存在一定的差异。本试验可为甘肃马先蒿提取物的开发利用、药材品质评价的深入研究提供依据。

甘肃马先蒿抗运动疲劳活性组分的筛选研究

目的:筛选甘肃马先蒿抗运动疲劳活性组分。方法:采用负重游泳致运动型疲劳模型,84只BALB/c小鼠随机分为空白组(生理盐水)、对照组(生理盐水)、红景天胶囊(0.5 g/kg)阳性对照组、甘肃马先蒿水提物(0.5g/kg)组、苯乙醇苷(0.5 g/kg)组、环烯醚萜苷(0.5 g/kg)组及甘肃马先蒿大极性成分(0.5 g/kg)组,灌胃给药,连续7 d。末次给药1 h后,通过负重游泳实验检测小鼠力竭游泳时间,并检测血清、肌肉组织中乳酸(LD)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的活性及肌肉与肝脏中糖元及ATP含量,确定抗运动疲劳活性组分。结果:甘肃马先蒿苯乙醇苷部位可延长小鼠力竭游泳时间(P<0.01),降低血清及肌肉LD含量,升高肌肉及肝脏糖元、ATP含量及血清及肌肉LDH及CK活性。结论:苯乙醇苷类成分可能是甘肃马先蒿的抗运动疲劳活性组分,其作用机制与减少不良代谢产物生成与堆积、增加能源物质储备、维持机体内环境的稳态有关。

褪黑素防治2型糖尿病的研究进展

目的:为褪黑素用于2型糖尿病的防治提供参考。方法:查阅2000-2013年国内外相关文献,总结褪黑素对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的调节作用及在改善葡萄糖稳态、胰岛素抵抗中的作用及其机制。结果与结论:褪黑素可以通过不同的作用机制改善2型糖尿病及并发症,具体机制包括:调节下丘脑-垂体-肾上腺轴;调节脂联素、瘦素和游离脂肪酸水平,改善胰岛素信号传导,进而改善胰岛素抵抗;减少胰岛素的过量分泌防止高胰岛素血症的发生;通过其抗氧化能力和抗糖脂毒性保护胰岛B细胞。提示褪黑素具有作为一种改善胰岛素抵抗、治疗2型糖尿病的新型有效药物的潜力。

HPLC测定人参固本胶囊中人参皂苷Rg1,Re的含量

目的：建立高效液相色谱（HPLC）测定人参固本胶囊中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法。方法：Hypersil ODS2 C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相乙腈-0.05%磷酸（19.3∶80.7）,检测波长203 nm,柱温室温,流速1.0 mL·min-1。结果：人参皂苷Rg1在0.216~5.400μg呈良好的线性关系（r=0.999 4）,平均回收率98.53%（RSD1.10%）,人参皂苷Re在0.212~5.300μg呈良好的线性关系（r=0.999 8）,平均回收率98.36%（RSD 1.35%）。结论：方法简便快速、专属性强、准确度高,可用于人参固本胶囊的质量控制。