分子生物学技术在SARS诊治中的应用价值

非典是由于SARS病毒的感染而引起的 ,因而可针对其基因序列 ,利用分子生物学技术对其进行诊治 ,还可利用重组DNA技术和转基因动植物技术来改造SARS病原体或有关收蛋白成分 。

甘肃泡型包虫病流行与人行为危险因素

目的 泡型包虫病的流行一般呈散发状态 ,甘肃省漳县、岷县局部地区泡球蚴病高度流行。对流行区人群进行影象学和血清流行病学调查的同时 ,进行当地人行为和生活方式的调查。探讨与疾病传播有关的因素。方法 对甘肃省漳县和岷县泡型包虫病 (AE)流行区 2 4 85人 ,经B超和泡球蚴抗原的血清流行病学调查 ,以血清学和影像学检查均为阳性者诊断为泡型包虫病感染者。并对所有对象进行 11项有关问题的询问调查。得出人群相应项目下包虫感染者和未感染人数之间构成比的组成 ,应用完全随机秩和H检验 ,由 χ2 界值表 ,确定与流行有关的因素。结果 确诊为泡型包虫病感染者有 86名 ,绝大部分是农民 ,经统计处理 ,发现AE流行与养狗、猎狐、接触狐皮、生食蔬菜、食用自产蔬菜等活动无关 (P >0 0 5 ) ;与用狗粪作肥料 ,和狗的密切接触有关 (P <0 0 5 )。与养狗的数量、时间 ,自由放养的方式高度相关 (P <0 0 1)。结论 多房棘球绦虫卵对环境污染是最主要的危险因素。少养狗或改变放养犬的不卫生习惯 ,应是防治当地泡型包虫病的重要措施。

汉防己甲素和阿苯达唑治疗小鼠继发性泡球蚴病的疗效观察

目的 通过中药单体汉防己甲素和阿苯达唑单独及联合用药对小鼠继发性泡球蚴病的疗效观察 ,以探讨中西药物结合治疗泡球蚴病的新途径。方法 通过体外培养原头节检测汉防己甲素杀灭原头节的效力 ;同时对小鼠继发性泡球蚴病进行药物治疗 90d后 ,检测各小鼠泡球蚴湿重、抑囊率 ;并对泡球蚴组织进行病理组织学和超微结构观察及病理分级。结果 汉防己甲素在体外能有效地杀灭原头节 ;汉防己甲素和阿苯达唑单独及联合用药均对小鼠泡球蚴有明显抑制作用 (抑制率分别为 4 4 5 5 %、6 3 39%和 80 82 % ) ,其中联合用药组明显优于单独用药组 (P <0 0 5 )。结论 汉防己甲素对小鼠泡球蚴的生长有一定的抑制作用 ,尤其联合阿苯达唑治疗效果较好 ,说明两种药物具有协同治疗作用。

汉防己甲素联合阿苯达唑对小鼠棘球蚴病的治疗试验

研究了中药汉防己甲素单独用药及联合阿苯达唑用药对小鼠继发性细粒棘球蚴的抑制作用 ,以探讨其作用机制并寻找药物治疗细粒棘球蚴病的新途径。试验小鼠分组治疗 90d后 ,检测各组小鼠棘球蚴囊湿重 ,并进行病理组织学和超微结构观察。结果显示 ,汉防己甲素单独用药及联合阿苯达唑用药对小鼠棘球蚴均有明显的抑制作用 ,汉防己甲素组、阿苯达唑组及联合用药组的抑囊率分别为 4 7.96 % ,6 4.86 %和 83.14 % ,联合用药的作用明显优于单独用药 (P <0 .0 5 )。病理组织及超微结构观察发现 。

铁筷子多糖联合阿苯达唑抑制小鼠细粒棘球蚴生长

目的研究中药铁筷子多糖单独及联合阿苯达唑用药对小鼠继发性感染细粒棘球蚴的抑制作用,探讨其作用的机制及寻找药物治疗细粒棘球蚴病的新途径。方法动物实验共分4组:阿苯达唑组;铁筷子多糖组;铁筷子多糖+阿苯达唑组;对照组。对小鼠继发性感染细粒棘球蚴病药物治疗90d后,检测各组小鼠棘球蚴囊湿重;并进行病理组织学和超微结构观察。结果铁筷子多糖、阿苯达唑及联合用药组均有抑制小鼠棘球蚴生长的作用(抑囊率分别为38.23%,64.86%和77.54%),其中联合用药组明显优于单独用药组(P<0.05)。病理组织及超微结构观察发现各治疗组中棘球蚴囊壁组织和细胞均有不同程度的改变或破坏。结论铁筷子多糖对小鼠棘球蚴生长有一定的抑制作用,与阿苯达唑联合治疗效果更佳,这可能与铁筷子多糖提高小鼠机体的免疫力有关。联合用药是提高阿苯达唑驱虫效果的有效途径之一。

柴黄片的抗炎、抗过敏、抗菌作用研究

目的 :研究柴黄片的抗炎、抗过敏、抗菌作用。方法 :用醋酸诱发腹腔毛细血管通透性增加小鼠模型研究抗炎作用 ,用小鼠耳异种被动皮肤过敏反应研究抗过敏作用 ,用血清药理学方法观察抗菌作用。结果 :柴黄片能减少醋酸诱发小鼠腹腔蛋白的渗出量 ,明显抑制小鼠I型超敏反应发生时的毛细胞血管通透性增加 ,抑制革兰氏阴性 (G )菌的生长。结论 :柴黄片有抗炎、抗过敏作用。

结核杆菌感染对人肺组织β-防御素的作用

目的 探讨结核杆菌对人肺组织 β -防御素 -1,2基因的表达调控。 方法 取肺结核病人病变部分的肺组织 ,提取RNA ,采用RT -PCR技术扩增人 β -防御素hBD -1cDNA ,hBD -2cDNA ,并重组到pGEM -TEasy载体 ,经限制性内切酶谱分析和DNA序列测定证实。结果 所克隆的cDNA片段分别为hBD -1,hBD -2的cDNA序列 ;肺结核病人肺组织hBD -诱导表达 ,hBD -1固有表达增强。结论 结核杆菌感染可正相调节人肺组织hBD -1,hBD

应用RT-PCR检测乳腺癌患者外周血CK-19mRNA的临床意义

目的:探索取材于乳腺癌患者外周血诊断微转移的方法。方法:66例乳腺癌和37例乳腺良性疾病患者的外周血,分离其有核细胞后进行细胞总RNA的抽提,运用RT-PCR技术进行CK-19 mRNA的检测。结果:以RT-PCR终产物出现460bp条带定为阳性。66例乳腺癌患者CK-19mRNA有24例表达,总阳性率为36.36％。37例乳腺良性疾病者CK-19mRNA无一例表达。两组有统计学意义(x2=17.54,P<0.001)。结论:RT-PCR检测CK-19 mRNA可以用于临床诊断乳腺癌患者外周血中微转移。

小学生幽门螺杆菌感染与胃肠道疾病的关系

目的 调查甘肃中部干旱山区会宁县小学生幽门螺杆菌 (Hp)的感染状况及与胃肠道疾病的关系。方法 采用间接ELISA法测定人群血清中的抗Hp抗体 ,用问卷法调查胃肠道疾病概况。结果 该地区 6～ 1 5岁儿童Hp抗体平均阳性率为 2 0 .3 % ,且有随年龄增长而上升的趋势 ,反复腹痛者抗体阳性率明显增高 (P <0 .0 5)。结论 儿童Hp感染与胃肠道疾病的发生有关 ,提示在治疗儿童胃肠道疾病时 。

黄芪多糖对大鼠β-防御素基因表达的调节作用

目的 探讨黄芪多糖对大鼠呼吸系统防御素表达的调节作用。方法 将 6 0只健康Wistar大鼠随机分成对照组和实验组。实验组经黄芪多糖溶液灌胃 ;对照组以等量生理盐水 (NS)灌胃 ,分别于第 0h ,第 1,3,5 ,7d处死 ,提取其肺组织总RNA ,用RT -PCR法检测大鼠 β -防御素 - 2基因的表达变化。 结果 黄芪多糖实验组 β -防御素- 2mRNA的表达高于对照组 (P <0 0 5 ) ,有显著性差异 ;且实验组中 ,第 3dβ -防御素 - 2mRNA表达水平高于第 1,5 ,7d时的水平 (P <0 0 5 ) ,有显著性差异。结论 黄芪多糖可以上调大鼠肺组织rBD -

二十五味铜灰散治疗小鼠继发性棘球蚴病的实验研究

目的 通过应用藏药二十五味铜灰散治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效观察 ,探讨藏药治疗棘球蚴病的免疫机理 ,为临床应用药物治疗棘球蚴病奠定理论基础。方法 小鼠被随机分成 4组 (藏药两种浓度组、对照组和阿苯达唑组 ) ,给予药物治疗 90天后 ,解剖小鼠 ,检测各小鼠棘球蚴囊的湿重及血清IgE、IL - 2、IL - 1 0的含量 ;并对棘球蚴囊行病理组织学和超微结构观察。结果 从病理组织学切片上可以看到 ,棘球蚴囊壁有明显的损伤。超微结构观察发现 ,角皮层薄厚不均匀 ;皮层区微毛变短、稀疏、模糊不清 ;细胞核固缩、核间隙增大、核碎裂 ;用药组小鼠血清IL - 2、IgE含量与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,用药组IL - 1 0的含量与对照组比无明显差异 (P >0 .0 5 )。

人细小病毒B19与异常妊娠关系的研究

目的探讨异常妊娠与人细小病毒B19(HPVB19)的关系。方法用聚合酶连反应(PCR)检测异常妊娠和妊娠无异常妇女血清中的人细小病毒B19DNA。结果病例组:135例异常妊娠组的血清中HPVB19DNA有25例阳性,阳性率为18.52%(25/135);对照组:66例妊娠无异常孕妇HPVB19DNA有2例为阳性,阳性率为3.03%(2/66),χ2=9.14,P<0.01,两组有高度显著性差异。结论1.异常妊娠与HPVB19感染有关。2.兰州地区存在一定程度的HPVB19感染率。

人细小病毒B19与自然流产关系的研究

无菌留取 5 4例自然流产妇女和 43例妊娠无异常孕妇血清 ,用聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR)检测的人细小病毒B19(HumanParvovirusB19,B19)DNA ,在自然流产组中人细小病毒B19DNA有 15例阳性 ,阳性率为 2 7.78%。正常对照组中 ,人细小病毒B19DNA有 2例为阳性 ,阳性率为 4.65 % ,用x2 检验 ,x2 =8.86,P <0 .0 1,两组有非常显著性差异。由此总结 。

乳腺癌患者外周血RNA提取方法的探讨

目的 建立外周血RNA的提取方法 ,为用逆转录 -聚合酶链反应检测乳腺癌外周血中微转移打好基础。方法 从 30例乳腺癌患者的冰冻保存和新鲜全血标本 ,用两种不同方法分离外周血有核细胞 ,提取RNA ,测定RNA产量及RNA的完整性。结果 从冰冻保存和新鲜全血标本 ,提取的总RNA的OD值有显著性差异。从新鲜全血中提取RNA的产量高于从冰冻保存的全血中提取的RNA的产量。但是 ,电泳时均有 2 8S与 1 8S的条带。结论 用逆转录 -聚合酶链反应时 ,以从新鲜全血中提取RNA为宜 ,但为留取标本的方便 ,也可用冰冻保存的全血标本 。

汉防己甲素和阿苯达唑体外抗细粒棘球蚴原头节作用的观察

通过比较汉防己甲素和阿苯达唑体外抗细粒棘球蚴原头节作用 ,以探讨中药单体汉防己甲素抗包虫病的作用 ,将汉防己甲素和阿苯达唑分别配成不同浓度 ,加入RPMI 164 0培养基中 ,体外培养细粒棘球蚴原头节 ,观察其每天的死亡率。结果显示各用药组原头节的死亡率分别与对照组相比 ,差异均有统计学意义 (P <0 .0 1) ;阿苯达唑和汉防己甲素联合组与阿苯达唑组 ,汉防己甲素低、中浓度组相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,而与汉防己甲素高浓度组相比 ,差别无统计学意义 (P >0 .0 5 )。表明汉防己甲素在体外有明显的抗原头节作用 ;汉防己甲素体外抗原头节作用与阿苯达唑相当 ;同时两药联合抗原头节效果明显优于单药组 。

汉防己甲素联合阿苯达唑抑制小鼠棘球蚴生长作用及其机制的研究

为研究中药汉防己甲素单独及联合阿苯达唑用药对小鼠继发性细粒棘球蚴的抑制作用 ,探讨其作用的机制及寻找药物治疗细粒棘球蚴病的新途径。将动物体内实验分成 5组 :阿苯达唑组、汉防己甲素组、汉防己甲素 +阿苯达唑组、对照组和空白组。对小鼠继发性细粒棘球蚴病药物治疗 90d后 ,检测各组小鼠棘球蚴囊湿重、血清IL 2 ,IL 4,IL 12和IgE的含量 ;实验结果显示汉防己甲素单独及联合阿苯达唑均有明显的抑制小鼠棘球蚴生长的作用 (抑囊率分别为 47. 96% ,64 . 86%和 83 . 14 % ) ,其中联合用药明显优于单独用药 (P <0 . 0 5 )。各治疗组中小鼠血清IL 2 ,IL 4,IL 12 ,IgE含量与对照组比较有显著性差异 (P <0 . 0 5 )。因此 ,汉防己甲素和阿苯达唑对小鼠棘球蚴生长均有一定的抑制作用 ,与阿苯达唑联合治疗效果更佳 ,这可能与汉防己甲素可逆转阿苯达唑的抗药性及提高小鼠机体的免疫力有关。联合用药是提高阿苯达唑驱虫效果的有效途径之一。

小鼠阴道疱疹感染与Fas蛋白粘膜上皮细胞中的表达

目的 探讨HSV 2小鼠阴道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,以及Fas蛋白的表达与细胞凋亡的相关关系,有助于阐明HSV 2感染后病毒与细胞相互作用的分子机理,为HSV 2病毒 感染疾病的诊断、治疗提供一定的实验和理论依据。方法将HSV 2接种于小鼠阴道,建立HSV 2阴道粘膜面直接感染动物模型,分不同天数处死,取其阴道固定于10%福尔马林。用HE染色、TUNEL染色研究HSV 2小鼠阴 道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,用免疫组化法研究Fas蛋白分子在阴道上皮细胞中 的表达水平,分析与细胞凋亡的相关关系。结果小鼠阴道HSV 2感染后的粘膜上皮细胞病理学改变为:22份标本 中同时伴有细胞坏死、炎症浸润及凋亡细胞阳性表达,标本中可达粘膜上皮的1/4区域。这些形态改变从实验感 染的第1天至第11天均可见到。小鼠阴道感染HSV 2后,Fas蛋白从感染第3天起可见到表达(22/24)。凋亡细 胞指数与Fas阳性细胞指数呈正相关(r=0.9660,P<0.05)。结论HSV 2直接感染小鼠阴道后可同时引起炎症、 细胞溶解性坏死及诱导阴道上皮细胞凋亡。HSV 2感染小鼠阴道后阴道上皮细胞Fas分子呈高表达,与凋亡细胞 指数呈正相关,提示Fas对HSV 2诱导的粘膜细胞凋亡起上调作用;可进一步研究作为阴?