普通PCR与TD-PCR在临床医学科研中应用价值的比较

目的比较普通聚合酶链反应(PCR)与降落聚合酶链反应(Touchdown PCR,TD-PCR)在临床医学科研中的价值。方法以人类外周血基因组DNA为模板,设计VHL基因3个外显子的3对引物,根据普通PCR及TD-PCR原理设计包括3个外显子片段在内的PCR程序,通过试验选择PCR最佳反应条件,在同一程序中分别对3个片段进行扩增,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,纯化后PCR产物测序分析两种试验方法的差别。结果电泳检测及纯化后DNA产物测序分析均显示TD-PCR扩增产物条带特异性、效率较普通PCR扩增产物高。结论成功建立了TD-PCR方法,TD-PCR方法较普通PCR更为高效实用,为临床基因突变筛查研究提供了快速可靠的手段。

兰州地区NGU患者864株支原体药敏检测结果分析

目的:了解兰州地区2005年～2008年泌尿生殖道分泌物中分离的解脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)的药物敏感情况。方法:应用支原体药敏试剂盒对Uu和Mh进行检测,并对10种抗菌药物的药敏试验进行分析。结果:2420例可疑泌尿生殖道感染患者中检出支原体864株,其中72例检测浓度低于1×104/ml,不能区别Uu和Mh,获得明确的结果792例患者中Uu阳性722例(91.2%),Mh阳性51例(6.4%),Uu和Mh同时阳性19例(2.4%)。864株支原体对10种抗生素的敏感程度依次为:克林霉素、强力霉素、壮观霉素、美满霉素、阿奇霉素、交沙霉素、司帕沙星、罗红霉素、氧氟沙星、环丙沙星。结论:兰州地区泌尿生殖道感染的支原体对克林霉素,强力霉素的敏感性明显高于其他药物,可作为治疗支原体感染的一线药物,同时提示药物敏感试验是指导临床用药的主要依据。

兰州市农民工子女教育问题及对策研究

随着大量农村剩余劳动力进城务工就业,农民工子女教育问题日趋突出。有学者认为,在城市街头的失学农民工子女,他们耽误的不仅是自己的前途,还会成为未来社会的“定时炸弹”。本文采取抽样调查、随机谈话的方法,调查了兰州市农民工子女教育情况,分析了存在的问题及其原因,并提出了相应的对策。

对综合性大学医学教育有关问题的思考

分析医学院校与综合性大学合并后产生的许多问题,介绍兰州医学院并入兰州大学以来,理顺医学教育教学管理体制,协调各方面关系的措施。

多发性骨髓瘤患者特异骨代谢标志物检测及临床应用

目的了解特异骨代谢标志物骨钙素N端中分子(OCN-Mid)、β-胶原特殊序列(β-CTx)在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的含量变化,探讨OCN-Mid和β-CTx检测的临床应用价值。方法用电化学发光法检测34例初次确诊为MM的患者及34名健康对照者血清OCN-Mid、β-CTx水平。同时分别采用2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)缓冲液法、偶氮胂Ⅲ法和钼酸铵法测定血清碱性磷酸酶(ALP)、钙和磷水平。结果MM组血清OCN-Mid水平明显低于对照组(P<0.05),β-CTx含量高于对照组(P<0.05),而血清ALP、钙、磷与对照组差异无统计学意义(P>0.05);不同分期MM患者分析结果表明,分期越晚,OCN-Mid水平越低,β-CTx水平越高。结论OCN-Mid和β-CTx是反映骨形成和骨吸收的简便、快速、有效的特异指标,可以辅助临床了解MM骨损害程度和评价病情,具有重要的临床应用价值。

甘肃省金昌市农村地区胃癌流行状况调查

目的调查甘肃省金昌市农村地区胃癌发生状况及其相关因素,探索甘肃河西走廊地区胃癌高发的原因。方法采用随机抽样的方法,确定金昌市的8个乡镇35个行政村长期在当地居住的人群为调查对象。设计问卷,问卷内容包括调查对象的生活饮食习惯、生活及劳动环境状况、胃癌的发病及死亡状况、对胃癌相关知识的认知程度等,采用无记名方法问卷调查。发放问卷2100份,收回有效问卷2071份,涉及住户2071家10040人。结果1990～2006年胃癌年均粗发病率为102.71/100 000,年均粗死亡率95.87/100000,其中男性为147.18/100000.女性为38.30/100000,男女胃癌死亡率之比为3.84:1。调查结果显示食用油炸食品和腌制的酸菜与胃癌发生无关;因经常滥用药物、大量吸烟和饮酒而引发胃癌的危险度为未滥用药物、未吸烟和未饮酒的2.306倍、36.192倍和15.51倍。OR95%可信区间分别为1.565～3.396、4.63～282.895和4.11～58.537;人群对胃癌相关知识的认知程度低。结论甘肃省金昌市农村地区胃癌发病率高于全国平均水平,为胃癌高发区。当地人群胃癌高发可能与滥用药物、长期吸烟和饮酒、饮食等因素有关。

甘肃部分三甲医院医务人员科研能力调查分析

目的分析甘肃省部分三甲医院医务人员科研能力现状,为提升医务人员科研能力提供合理化建议,为提高医务人员科研能力奠定基础。方法2019年5月—2019年6月采用自主设计的问卷,随机对甘肃省4家三甲医院200名医务人员进行实地问卷调查,并对调查结果进行分析。结果医务人员学历层次分布不均,高学历人才少;科研项目主持数量与医务人员职称密切相关;晋升职称成为课题申报的主要动因;工作压力大缺少足够科研时间是开展科研的主要障碍。结论医院应加大科研投入,提供学习交流平台掌握科研方法,激励年轻的医务人员积极投入科研,提高医务人员的科研能力,推动医院科研发展。

低分子肝素钙与复方丹参治疗慢性肺源性心脏病急性加重期的临床观察

目的观察低分子肝素钙与复方丹参对慢性肺源性心脏病急性加重期患者的治疗效果。方法选择60例慢性肺源性心脏病急性加重期患者,随机分为治疗组和对照组,治疗组在常规治疗的基础上加用低分子肝素钙与复方丹参治疗,对照组采用常规治疗,两组均进行治疗前后血气分析和血液流变学检验。结果治疗组显效率为53．3％,总有效率为83．3％,对照组显效率为30％,总有效率为56．7％,两组在临床疗效上有统计学显著性差异;治疗组不良反应轻微,发生率为6．7％。结论治疗组方法能有效地降低血液黏滞度,明显改善慢性肺源性心脏病急性加重期患者的临床症状。

p57^(KIP2) mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

选取石蜡包埋的44例非小细胞肺癌(N SCLC)患者及12例癌旁肺正常组织的标本制作组织芯片,用地高辛标记的探针、原位杂交法检测p57K IP2mRNA的表达情况。发现p57K IP2mRNA在癌旁肺正常组织和N SCLC组织中的表达无显著差异(P>0.05),鳞癌中阳性表达率明显高于腺癌(P<0.01),N SCLC中无淋巴结转移者阳性表达率明显高于有淋巴结转移者(P<0.01)。p57K IP2mRNA的表达有望成为监测N SCLC患者病情发展及评价预后的有用指标。

曲美他嗪治疗2型糖尿病合并冠心病患者前后血清SOD,MDA含量的变化及临床意义

目的评价曲美他嗪(TMZ)与传统药物相结合对2型糖尿病合并冠心病患者抗心绞痛的疗效及耐受性,并测定治疗前后患者血清超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)含量的变化,分析其临床意义。方法49例冠心病稳定性心绞痛合并2型糖尿病的患者随机分为两组,其中曲美他嗪治疗组(TMZ组)24例与对照组25例。两组均常规给予倍他乐克、长效硝酸酯类药物或钙离子拮抗剂治疗;TMZ组加服TMZ20mg,每日3次,治疗8周。结果治疗8周后,两组患者临床症状均有改善,心绞痛发作次数显著减少,消心痛片消耗量明显降低,与试验前相比,两组患者运动耐量均显著提高,至心绞痛发作时间及ST段下降1mm的时间均显著延长,与对照组相比,TMZ组更显著(P<0.05)。而对血压,心率的影响无统计学意义(P>0.05)。实验室检查示SOD含量上升,MDA含量下降,但相对对照组,TMZ组SOD含量上升幅度明显(P<0.05)。在试验的8周内,药物不良反应较少,只有1例有上腹部不适主诉。讨论曲美他嗪能抑制脂肪酸氧化并刺激葡萄糖氧化,显著改善心肌缺血症状,亦可能与其抑制2型糖尿病合并冠心病患者体内的氧自由基生成及抑制脂质过氧化进程的作用相关。

葡萄糖激酶调节蛋白P446L基因多态性与甘肃回族2型糖尿病的关系

目的探讨葡萄糖激酶调节蛋白(GCKR)基因P446L多态性与甘肃回族2型糖尿病(T2DM)的相关性及其对糖脂代谢的影响。方法 T2DM患者178例和正常对照者207例,应用PCR-RFLP检测GCKR-P446L基因型,采用氧化酶法或放免法测定血糖、胰岛素及血脂水平。结果①GCKR基因P446L多态性位点的基因型分布和等位基因频率在T2DM组和正常对照组中的分布存在显著差异,且对照组L446等位基因频率明显高于T2DM组,有显著性差异(基因型:χ2=10.598,P=0.001;等位基因:χ2=6.715,P=0.010)。②L446与P446等位基因携带者相比空腹血糖浓度及胰岛素抵抗指数低而三酰甘油浓度高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GCKR-P446L基因多态性与T2DM、胰岛素抵抗及血脂水平相关,L446等位基因可能是T2DM发生的保护因素之一。

甘肃汉族人群白细胞介素1α启动子(-889C/T)基因型与冠心病的关系

目的探讨白细胞介素-1α（IL-1α）启动子-889C/T基因型与冠心病（CHD）的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测98例CHD和131名健康者IL-1α-889C/T位点基因型。结果IL-1α-889位点在该人群中的基因型频率分布CC为183/229（79.9%）,CT为45/229（19.70%）,TT为1/229（0.04%）,等位基因C为411/458（89.70%）,T为47/458（10.30%）。CHD组CT基因型与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。心肌梗死组CT型与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,而心绞痛组中CT型与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,CHD组中CT型基因患心肌梗死的危险度是患心绞痛的2.02倍[比值比（OR）=2.02,95%可信区间（CI）：1.05-3.89,P〈0.05]。结论IL-1α启动子-889C/T位点存在基因多态性,T等位基因可能是甘肃汉族人群心肌梗死的易感基因。

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏表达血管紧张素Ⅱ、内皮素-1的影响

目的通过观察姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾组织血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)、内皮素-1(ET-1)的影响,以进一步揭示姜黄素抑制肾纤维化的机制。方法SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组(作为正常对照组)、UUO组、治疗组(UUO+姜黄素),造模后10d,用放射免疫法分析测定各组肾脏中Ang-Ⅱ、ET-1的表达。结果造模后第10天UUO组血浆、肾组织Ang-Ⅱ、ET-1的表达明显升高;姜黄素治疗组较UUO组血浆、肾组织Ang-Ⅱ、ET-1的表达明显下调(P<0.05)。结论在梗阻性肾病中,姜黄素可通过降低肾组织内Ang-Ⅱ、ET-1的表达,一方面改善肾组织的缺血、缺氧状态;另一方面其可能是姜黄素下调TGF-β1的原因。

HIF-1α、PTEN和P53在大肠癌中的表达和意义及其相关性的研究

目的探讨HIF-1α在大肠癌发生、发展中的作用以及抑癌基因PTEN、P53与HIF-1α的相关性。方法采用RT-PCR技术检测42例大肠癌组织标本和相应的癌旁正常黏膜组织中HIF-1αmRNA,PTENmRNA,P53mRNA的表达,并分析其相互关系。结果HIF-1αmRNA在大肠癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织中的表达水平(t=12.47,P=0.00);HIF-1αmRNA的表达水平与肿瘤部位(t=0.05,P=0.96)性别无关(t=-0.37,P=0.72);而与Dukes分期呈正相关(t=6.43,P=0.00);PTENmRNA,P53mRNA在大肠癌组织中的表达水平低于癌旁正常组织;HIF-1α和抑癌基因PTEN、P53之间表现出一定程度的负相关。结论HIF-1α的过表达在大肠癌的发生发展及浸润转移过程中起着重要作用,大肠癌中抑癌基因PTEN、P53的缺失突变可致HIF-1α表达水平增高。

肺癌H460细胞与胚肺成纤维细胞相互作用对基质金属蛋白酶-2的表达影响

目的:研究肺癌H460细胞和胚肺成纤维细胞相互作用对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响.方法:在单层平面培养条件下,H460细胞和胚肺成纤维细胞条件培养基或胚肺成纤维细胞和H460细胞条件培养基共同培养,胚肺成纤维细胞分别按1∶1,1∶2,1∶4,1∶8与H460细胞共同培养.三维胶原立体培养条件下,H460细胞和胚肺成纤维细胞共同培养,72 h后明胶酶谱法测定培养基中MMP-2的表达.结果:胚肺成纤维细胞条件培养基不能促进H460细胞MMP-2酶原和活化酶的表达,但H460细胞条件培养基能促进胚肺成纤维细胞MMP-2酶原和活化酶的表达.胚肺成纤维细胞分别按1∶1,1∶2,1∶8与肺癌H460细胞时共同培养时,MMP-2酶原和活化酶的表达均增强;按1∶4与肺癌H460细胞共同培养时MMP-2酶原表达有所增加,但活化酶未见改变.三维胶原立体H460细胞和胚肺成纤维细胞共同培养时MMP-2酶原和活化酶的表达均增强且高于单层平面培养.结论:肺癌H460细胞与胚肺成纤维细胞相互作用能通过上调MMP-2的表达和活化影响肺癌侵袭和转移.

细胞外信号调节激酶在局灶性脑缺血中的表达

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)在局灶性脑缺血再灌注海马神经元中的表达.方法:线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.大鼠随机分成假手术组(sham组)、脑缺血再灌注组(I/R组),每组根据再灌注时间不同再分为3,6,24,48和72h亚组,每亚组各6只鼠.在预定时间点进行HE染色观察组织学变化;TUNEL法检测CA1区细胞凋亡的动态变化规律;免疫组织化学方法研究ERK的表达特征.结果:MCAO后海马神经元存活数量较假手术组明显减少;凋亡细胞大量出现,以48h为高峰;MCAO后3h,磷酸化ERK在局灶性脑缺血大鼠脑组织中显著升高,6h达到最高峰,72h恢复到正常水平.结论:脑缺血再灌注损伤可能导致ERK活性上调,参与缺血后神经细胞凋亡过程.

金昌市学龄前儿童血铅水平与8种微量元素的相关性研究

目的探讨甘肃省金昌市学龄前儿童高铅血症现状及血铅水平与微量元素铜、锌、钒、铬、锰、钴、镓、锗间的相互关系。方法随机抽取金昌市部分幼儿园的256名儿童,用石墨炉原子吸收分光光度仪进行血铅、铜、锌、钒、铬、锰、钴、镓、锗含量的测定。结果①256名儿童血铅含量为28.30～268.00μg/L,平均(126.19±52.91)μg/L,其中>100μg/L者160名(占62.54%)。②钒、铜元素水平男高于女,差异有统计学意义(P<0.05、0.01);不同年龄组间锌、锗元素在6～7岁较2岁组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。③铜元素在高血铅组较低血铅组增高,锌、锰、钴元素在高血铅组较低血铅组降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。④多元线性回归分析显示血铅与血锌、钴元素呈负相关。结论金昌市学龄前儿童高铅血症发生率高,应加强环境污染的治理,儿童应定期复查血铅水平,给予针对性的健康教育和营养指导。儿童高铅血症可导致血锌、锰、钴元素水平下降,血铜元素升高。

ω-3多不饱和脂肪酸治疗急性肺损伤的Meta分析

目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)治疗急性肺损伤(ALI)病人的临床效果及其应用价值。方法:计算机检索PubMed、EMBASE、SCI、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、中文科技期刊全文数据库、中国期刊全文数据库和中华医学会数字化期刊,并辅助手工检索,收集采用ω-3PUFA治疗ALI的随机对照试验(RCT),检索至2012年10月截止。采用Jadad评分评价纳入研究质量,用RevMan 5.1软件进行Meta分析。结果:共纳入6个RCT,各试验间资料均有可比性。经Meta分析结果显示,试验组(ω-3PUFA治疗组)与对照组(常规治疗组)在ALI病人的动脉氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2)、入住ICU时间(LOS)和总蛋白(TP)等方面均有显著性差异,而撤离呼吸机时间(LOV)和不良反应则无显著性差异。结论:ω-3PUFA可有效地改善ALI病人的呼吸功能,促进病人呼吸功能的恢复和预后。但其长期疗效和不良反应仍需开展更多高质量的研究。

学龄期肥胖儿童肝X受体与脂代谢异常的相关性分析

目的：探讨学龄期肥胖儿童肝X受体（LXR）与血脂代谢异常的相关因素。方法自2011年6月至10月，在1~6年级学生（7~14岁）中，通过体格发育指标检测，筛选出80例肥胖儿童和51例年龄与性别匹配的正常对照儿童作为研究对象。取空腹静脉血进行天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆固醇（CHOL）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和LXR相对表达量检测。结果肥胖儿童LXR表达量为（9.14＆#177;1.15），高于正常对照儿童的（2.84＆#177;3.68），差异有统计学意义（t=4.55，P=0.000）；肥胖儿童中LXR＞1比例为80.0%（64/80），高于正常对照儿童的45.1%（23/51），差异有统计学意义（χ2=17.01，P=0.000）。肥胖儿童的AST、ALT、GGT、CHOL、TG、LDL-C较正常对照儿童高，而HDL-C较正常对照儿童低，差异均有统计学意义（P＆lt;0.05）。LXR表达与AST、ALT、CHOL、LDL-C和BMI水平均呈正相关（r=0.18~0.26，P均＆lt;0.05）。AST≥40 IU/L（OR=1.076），ALT≥40 IU/L（OR=1.036），CHOL≥5.20 mmol/L（OR=2.038），LDL-C≥3.36 mmol/L（OR=2.176）、BMI≥18.9 kg/m2（OR=1.131）均为LXR＞1的危险因素（P均＆lt;0.05）。结论学龄期儿童肥胖可能促使体内LXR的表达量上调，导致肝损伤和血脂紊乱。