硫酸镍通过PI3K/Akt信号通路影响大鼠睾丸间质细胞睾酮合成分泌功能的研究

目的 研究PI3K/Akt信号通路调节蛋白表达与硫酸镍(NiSO_(4))诱导大鼠睾丸间质(Leydig)细胞睾酮合成障碍的联系。方法 使用清洁级8周龄雄性Wistar大鼠,采用胶原酶消化、Percoll密度梯度离心法,经体外差速贴壁培养获得纯化大鼠Leydig细胞。设立对照组[DMEM+1 IU/ml人绒毛膜促性腺激素(hCG)],低、中和高剂量NiSO_(4)组(250、500和1 000μmol/L NiSO_(4)+1 IU/ml hCG),处理Leydig细胞24 h,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测睾酮含量,Western blot法检测睾酮相关合成酶和PI3K/Akt信号通路相关蛋白水平,实时荧光定量PCR测定PI3K/Akt信号通路Pik3r1、Akt1 mRNA表达。结果 与对照组相比,NiSO_(4)组睾酮分泌量(F=56.518,P<0.05)、StAR(F=11.121,P<0.05)和Cyp11a1(F=9.084,P<0.05)降低,Pik3r1 mRNA表达上升(F=61.992,P<0.05),Akt1 mRNA表达量明显降低(F=8.538,P<0.05),NiSO_(4)组p-PI3K p85/PI3K p85磷酸化比率降低(F=5.926,P<0.05)。结论 NiSO_(4)可能通过抑制PI3K/Akt信号通路,降低Leydig细胞睾酮合成相关酶StAR、Cyp11a1的表达进而抑制睾酮分泌。