人β防御素-2稳定表达细胞株的建立及其表达产物对耐药大肠埃希菌抗菌活性研究

目的建立稳定表达人β防御素2(hBD2)的COS-7细胞株,并检测其表达产物对耐药大肠埃希菌的抗菌活性。方法将重组hBD2真核表达载体pCMV-hBD2通过脂质体转染COS-7细胞,筛选稳定表达hBD2单克隆细胞株;经RT-PCR和Western blot检测稳定转染后目的基因在转录水平和蛋白水平的表达;用微量稀释法检测稳定转染后细胞培养上清液对耐药大肠埃希菌的抗菌作用。结果筛选出稳定表达hBD2的COS-7细胞株,检测到目的基因在转录水平和蛋白水平均有表达,且其表达产物使耐药大肠埃希菌存活率降至15%。结论建立了稳定表达hBD2的COS-7细胞株,其表达产物对耐药大肠埃希菌具有一定的抗菌活性。

心理干预对青少年恶性骨肿瘤患者情绪改善及生存质量意义的研究

研究心理干预对青少年骨肿瘤患者的焦虑及抑郁情绪改善及生存质量状况的影响,经心理干预后青少年骨肿瘤患者的焦虑及抑郁情绪状况得到改善,提高了生存质量。将60例在甘肃省肿瘤医院住院治疗的青少年骨肿瘤患者采用随机数字表分为观察组和对照组,观察组在给予手术治疗(保肢或截肢)联合常规化疗等治疗基础上给予心理干预,对照组给予手术治疗(保肢或截肢)联合常规化疗。两组患者分别进行《焦虑自评量表(SAS)》、《抑郁自评量表(SDS)》、《癌症病人生存质量测定量表》量表评定,分别在入院后0周、4周、8周、12周、24周进行评估。对照比较两组患者首末两次的评分,结果观察组给予心理干预后与对照组比较:患者的《焦虑自评量表(SAS)》、《抑郁自评量表(SDS)》评分明显减少,《癌症病人生存质量测定量表》评分明显提高,比较差异有统计学意义(P<0.05)。心理干预对青少年骨肿瘤患者的焦虑及抑郁情绪有明显的改善,对提高患者的生活质量有显著的效果,值得临床关注和推广。

萨提亚家庭治疗模式在精神分裂症患者认知康复中的疗效及相关研究

通过对精神分裂症患者运用萨提亚家庭治疗模式进行心理干预,探索自我效能感、家庭环境、医院环境在精神分裂症患者康复中的影响。对2016年5月-2017年5月在兰州市第三人民医院封闭式病区住院的精神分裂症患者66例,按随机数字表法分为研究组和对照组,在系统的抗精神病药药物治疗和常规护理基础上,研究组给予萨提亚家庭治疗模式干预,对照组给予普通心理干预。观察和比较两组患者在一般自我效能感量表(GSES)、自编医院环境认知问卷和家庭环境量表(FES)得分差异。干预后,研究组GSES总评分(t=-4.286,P<0.01)高于干预前,差异有统计学意义。研究组GSES总评分与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。家庭环境量表中独立性显著高于对照组,t=-2.095,p=0.040,差异有统计学意义(P<0.05)。萨提亚家庭治疗可以改善患者家庭环境,增加患者对医院环境的认知状况,提高患者一般自我效能感。

伴发抑郁情绪的骨肿瘤患者血清甲状腺素及皮质醇水平变化的相关研究

目的:探讨骨肿瘤患者血清甲状腺素及皮质醇水平变化与抑郁情绪相关性。方法:选择2016年1月至2017年1月在甘肃省肿瘤医院骨与软组织肿瘤科经病理诊断为骨肿瘤的住院患者64例,以汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评定结果分为两组:伴抑郁组(D+)HAMD≥8者29名,无抑郁组(D-)HAMD<8者35名。同时以33名健康体检者为正常对照组。于入院后0周、4周评定抑郁症状,并同步测定血清甲状腺素及血浆皮质醇水平。结果:抑郁组治疗前和对照组比较血清T3、T4偏低、TSH偏高水平,均在正常值范围内,差异无统计学意义(P>0.05);抑郁组皮质醇水平较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);抑郁组和非抑郁组治疗前后比较血清T3、T4、TSH水平差异无统计学意义(P>0.05);抑郁组和非抑郁组组内治疗前后比较皮质醇水平差异显著,有统计学意义(P<0.05);非抑郁组和对照组比较血清T3、T4、TSH水平差异无统计学意义(P>0.05);非抑郁组和对照组比较皮质醇水平较高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:骨肿瘤伴发抑郁患者存在下丘脑-垂体-甲状腺轴的改变,且与其他抑郁人群的变化一致。下丘脑-垂体-肾上腺轴的改变,血浆皮质醇水平可能对肿瘤患者伴发抑郁有提示作用。

藏药柳茶提取物对单纯性肥胖大鼠脂质代谢的影响

目的观察藏药柳茶对单纯性肥胖大鼠脂质代谢的影响,初步探讨其作用机制。方法:复制单纯性肥胖大鼠模型,藏药柳茶水提取物灌胃给药8周后,检测体重、体长,计算Lee’s指数,分离并称取肾周及睾周脂肪重量;生化法检测血糖(GLU)、血总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的含量;放射免疫法检测血清瘦素(LEP)和胰岛素(INS);琼脂糖凝胶电泳检测脂肪细胞凋亡状况。结果:柳茶治疗后动物血糖、血脂含量明显降低,血瘦素和胰岛素水平下降。但实验未见到明显促脂肪细胞凋亡的作用。结论:藏药柳茶可明显抑制大鼠体重增长,其作用机制可能与改善瘦素和胰岛素抵抗、加快脂肪代谢有关。

钩藤水煎剂对高脂性肥胖大鼠体质量、进食量、血糖、胰岛素及抗氧化能力的影响(英文)

背景:钩藤具有清热平肝、活血通经、息风止痉功效,主要用于治疗头晕目眩、惊痫抽搐和全身麻木等心脑血管和神经系统疾病。目的:观察钩藤水煎剂对高脂性肥胖大鼠体质量、进食量、摄入热量、血糖、胰岛素、抗氧化能力的影响。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:兰州大学基础医学院生理研究所材料:实验于2003-03/2003-05在兰州大学基础医学院生理研究所实验室完成。选用健康雄性SD大鼠27只,随机分为3组,每组9只,分别为正常对照组,高脂饮食组和钩藤组。方法:①正常对照组饲以基础饲料(蛋白质、脂肪、碳水化合物含量分别为18.2%,4.5%,55.2%),高脂饮食组及钩藤组均给予高脂饲料(蛋白质、脂肪、碳水化合物含量分别为23.7%,21.6%,39.0%)。②正常对照组及高脂饮食组每日正常自由饮水。钩藤组自实验第1天起自由饮服10g/L的钩藤水煎剂,后每天增加剂量至第1周末达到60g/L,并维持到第7周末。③每天称量各组大鼠的进食量,计算摄入热量,每周称量各组大鼠体质量,计算李氏指数犤体质量(g)1/3×103/体长(cm)犦。④在实验第7周末大鼠禁食12h后,取血,采用己糖激酶法测定空腹血糖、用放免法测定胰岛素,用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛,用比色法测定总抗氧化力及血清游离脂肪酸水平。⑤3组间计量资料差异性比较采用F检验,两两比较采用LSD法。主要观察指标:钩藤水煎剂对高脂性肥胖大鼠体质量、进食量、摄入热量、空腹血糖、血清胰岛素、游离脂肪酸、丙二醛、总抗氧化能力的影响。结果:进入结果分析大鼠27只,每组9只。①体质量:实验第3～7周末,高脂饮食组明显高于正常对照组(P<0.05～0.01),钩藤组明显低于高脂饮食组(P<0.05～0.01);实验第1～6周末,钩藤组与正常对照组相近(P>0.05),第7周高于正常对照组(P<0.01)。②李氏指数:实验第7周末,高脂饮食组明显高于正常对照组和钩藤组(P<0.01)。③摄食量:实验第1～7周末,钩藤组大鼠进食量均明显低于正常对照组(P<0.01);第3,5,6,7周末钩藤组明显低于高脂饮食组(P<0.05～0.01)。④摄入热量:钩藤组第1,2,4周末明显高于正常对照组(P<0.05～0.01)。第3,5,6,7周末钩藤组大鼠明显低于高脂饮食组(P<0.01)。⑤空腹血糖:3组大鼠相近。⑥血胰岛素和丙二醛水平:高脂饮食组明显高于正常对照组和钩藤组(P<0.01)。⑦游离脂肪酸水平:高脂饮食组明显高于正常对照组(P<0.05),与钩藤组相近。⑧总抗氧化力:高脂饮食组明显低于钩藤组(P<0.01)。结论:①饮用钩藤水煎剂可明显抑制高脂性肥胖大鼠的体质量、进食量。②可降低高脂性肥胖大鼠自由基和血清胰岛素水平,且血清胰岛素水平降低可能是由于游离脂肪酸水平降低所致。④饮用钩藤水煎剂可增加高脂性肥胖大鼠的总抗氧化能力。

高原适应性训练期急性高山病相关心理应激因素分析

目的观察急进高原进行高原适应性训练军人急性高山病(AMS)的发病情况,并探讨心理应激因素对AMS的影响。方法采用自编问卷、Lake Louise AMS评分量表、症状自评量表(SCL-90)、特质应对方式问卷(TCSQ)和抑郁自评量表(SDS)对255名急进高原进行高原适应性训练的军人进行测评。结果调查问卷、量表有效回收率100%。SCL-90中的躯体化因子评分及TCSQ中的积极应对和消极应对因子评分均显著高于全国正常成人常模(P<0.01)。AMS评分阳性者与阴性者在文化程度、社会支持状况、对AMS的认知,SDS中的精神-情感、躯体症状评分,以及SCL-90中10个因子评分和总评分方面比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。多重线性回归分析结果显示:SCL-90总分、对高原反应应对措施的了解程度对预测AMS作用显著。结论心理应激因素对AMS的发生有显著影响,合理运用心理应激管理策略与心理干预技术,可降低部队官兵外训期AMS的发生率,增强高原作战部队的战斗力。

抑郁症中小胶质细胞对中枢神经系统调控作用的研究进展

抑郁症患者中枢神经系统发生一系列复杂变化,包括小胶质细胞的激活、神经炎症、神经递质失调和神经可塑性变化等。小胶质细胞在其中发挥关键作用,但与这些过程的关系仍不明确。本文总结了生理和抑郁状态下小胶质细胞对中枢神经系统的调控作用,重点介绍了抑郁状态下小胶质细胞的激活,以及小胶质细胞与神经炎症、下丘脑—垂体—肾上腺轴、神经递质失调和神经可塑性变化之间的相互作用,有助于系统地理解抑郁症相关生物学机制,并为寻找治疗抑郁症的新靶点提供参考。

LKB1抑制人巨细胞肺癌细胞的增殖和迁移侵袭、mTOR磷酸化与VEGF和MMP9表达

目的分析肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)对人巨细胞肺癌(the people giant cell lung cancer,PGCL3)细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制。方法构建真核表达载体p CMV-LKB1,转染人巨细胞肺癌细胞。转染后48h,用免疫印迹法检测各组细胞LKB1蛋白表达水平,明确转染PGCL3效率。转染后每隔12h、连续72h检测LKB1对细胞增殖能力的影响;Transwell小室检测转染后各组细胞迁移、侵袭力。提取各组细胞蛋白检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平。结果 p CMV-LKB1经PCR、双酶切及DNA测序鉴定后,证实目的基因片段插入方向正确,核酸序列与NCBI公布的LKB1的核酸序列一致;免疫印迹分析显示,转染p CMV-LKB1的PGCL3细胞中LKB1表达水平明显增高,表明p CMV-LKB1构建成功。增殖曲线分析和5-乙炔基-2,脱氧嘧啶核苷(5-ethynyl-2,-deoxyuridine,Ed U)检测显示,转染p CMV-LKB1能显著抑制PGCL3细胞的增殖;Transwell小室检测显示,过表达LKB1可显著抑制PGCL3细胞的迁移与侵袭;免疫印迹分析显示,过表达LKB1的PGCL3细胞其LKB1下游分子中总m TOR表达量不变,磷酸化m TOR(p-m TOR)水平降低,m TOR下游分子VEGF表达量也显著降低,迁移侵袭相关蛋白MMP2表达无变化,但MMP9水平显著降低。结论 LKB1可能通过下调PGCL3细胞p-m TOR水平,降低VEGF表达,从而抑制巨细胞肺癌细胞增殖,并可能通过下调金属基质蛋白酶MMP9的表达,降低巨细胞肺癌细胞迁移侵袭能力。

肝硬化患者焦虑抑郁情绪及生活质量的调查与干预

目的调查肝硬化患者焦虑、抑郁水平及社会支持与生活质量状况,找到干预患者情绪状况、改善生活质量的有效途径。方法运用基本问卷、躯体状态、医用焦虑抑郁量表、社会支持量表、诺丁汉健康量表对175例肝硬化患者问卷调查。结果 HADS-A均值≥9分的170例(97.7%),HADS-D均值≥9分的155例(89.1%),患者普遍存在焦虑抑郁情绪。3组不同年龄段患者在主观支持(P=0.005)、疼痛(P=0.012)、社交(P=0.040)、活动(P=0.012)、诺丁汉健康量表总分(P=0.024)方面存在显著差异,抑郁、客观支持、并发症和、主观支持对预测诺丁汉健康量表总分作用显著。结论肝硬化患者年龄、抑郁情绪、病情严重情况、社会支持对患者的生活质量影响明显,在进行心理干预时,可从抑郁情绪、社会支持入手,对不同年龄阶段的患者给予有针对性的团体心理干预,提高患者的生活质量。

别嘌呤醇和维生素C对创伤后胃黏膜损伤的影响

目的:探讨别嘌呤醇和维生素C对严重创伤后胃黏膜损伤的防治作用及其机制。方法:选择严重创伤骨折合并失血性休克患者120例,按照随机数字表法将其分为对照组(C组)、别嘌呤醇组(ALO组)和维生素C组(VC组),每组40例。比较3组患者入院后6 h(T0)、2 d(T1)、4 d(T2)、7 d(T3)、14 d(T4)和术后2 d(T5)血清TXB2、PGE2、NO和MDA含量,观察记录胃黏膜损伤分级及临床归转、结局情况。结果:与C组比较,ALO组和VC组血清TXB2及MDA含量降低、PGE2及NO含量升高,与ALO组比较,T1、T2和T3时间点VC组血清TXB2和MDA含量降低、PGE2和NO含量升高(P<0.01和P<0.05);与C组比较,T2和T3时间点内镜下胃黏膜损伤0/1/2级患者例数增加、3/4级患者例数降低(P<0.01和P<0.05);与C组比较,ALO组未发生SU的比例于T3及T4时间点增加,发生SU比例于T3及T4时间点降低,VC组未发生SU比例于T2、T3、T4及T5时间点增加,发生SU比例于T2、T3、T4及T5时间点降低(P<0.05和P<0.01),ALO组与VC组未发生SU及发生SU患者的比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:别嘌呤醇和维生素C可通过抑制脂质过氧化、改善胃黏膜血流、保护血管内皮及胃黏膜细胞等机制,减轻或延缓氧化应激和缺血再灌注损伤引发的急性应激性胃黏膜损伤。维生素C抗胃黏膜氧化损伤的作用好于别嘌呤醇。

远端缺血后处理防治胃粘膜损伤的实验观察

目的:探讨远端缺血后处理(RIP)对大鼠肢体缺血再灌注(IR)后胃粘膜损伤的保护作用及其机制。方法:采用大鼠肢体IR损伤模型,将雄性Wistar大鼠108只随机分为3组:对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、远端缺血后处理组(RIP组),每组36只。C组、IR组及RIP组再分为再灌注0 h(T 0)、l h(T 1)、3 h(T 2)、6 h(T 3)、12 h(T 4)及24 h(T 5)6个亚组,每组6只。测定6个时间点血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性、TNF-α及IL-10浓度;胃组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)、黄嘌呤氧化酶(XOD)活性;光镜下观察病理学改变和胃粘膜损伤评分。结果:与C组比较,IR和RIP组血清LDH、CK活性和TNF-α、IL-10浓度升高;胃组织SOD活性降低,MPO、XOD活性和MDA含量升高;光镜见胃粘膜组织损伤及评分升高(P<0.05)。与IR组比较,再灌注后6h RIP组血清LDH、CK活性和TNF-α浓度降低,IL-10浓度升高;胃组织SOD活性升高,XOD、MPO活性和MDA含量降低;胃粘膜组织损伤减轻及评分降低(P<0.05)。结论:远端缺血后处理可通过抗炎症、抗氧化作用,防止肢体IR诱发的胃粘膜损伤,发挥功能性保护效应。

甲状腺激素受体与肿瘤

研究表明，甲状腺激素受体（TR）在许多肿瘤的发生过程中伴有染色体杂合子丢失、基因启动子区甲基化及基因突变等，出现TR mRNA或蛋白质表达异常，且TR异常与某些神经系统肿瘤如星形细胞瘤和垂体瘤的分化程度相关。目前，关于TR的作用途径及机制主要包括：垂体瘤转化-1、β-连环蛋白等肿瘤相关因子和细胞外信号调节激酶、磷脂酰肌醇-3激酶信号传导通路等。

hBD1稳定表达细胞株的建立及其表达产物对多重耐药菌的活性检测

目的 构建人β防御素1（ hBD1）稳定表达细胞株并检测其对多种多重耐药菌的抗菌活性.方法 将重组质粒pCMV-hBD1通过阳离子脂质体转染于非洲绿猴SV40转化的肾细胞（COS-7细胞）,经过G418压力筛选后获得单克隆细胞株；提取细胞总RNA,用RT-PCR检测目的基因在转录水平的表达；收集细胞培养上清液,用Western blot检测hBD1基因蛋白的表达；将含有表达产物hBD1的细胞培养上清液分别同各耐药菌液混合,37℃孵育不同时间后涂布于LB平板,以各实验组和对照组的菌落数的比值作为该耐药菌的存活率.结果 经过G418压力筛选所得到的稳定表达细胞株,在转录水平和蛋白水平均检测到目的基因hBD1的表达,在表达产物hBD1的作用下,多重耐药鲍氏不动杆菌、多重耐药大肠埃希菌存活率和多重耐药肺炎克雷伯杆菌的存活率可以分别降至9%、22%和50%,多重耐药嗜麦芽窄食单胞菌的存活率同对照组没有明显差异.结论 成功获得hBD1稳定表达细胞株,目的基因hBD1的表达产物对多种多重耐药菌均具有抗菌活性.

基于依恋的团体干预对物质成瘾干预的假设模型

物质成瘾者心瘾治疗缺少有效的矫治措施,团体心理干预作为治疗物质成瘾的重要手段其作用机制尚不明确。早期依恋损伤会影响情感调节系统发育以及增加成瘾的风险。本文归纳了基于依恋的情感调节与物质成瘾相关神经系统改变的联系,并讨论了神经系统的可塑性在其中的作用。团体干预可通过建立安全的环境发展成员的情感调节能力,从而引发神经系统层面的改变。提出团体干预减少复吸的假设模型,为团体干预物质成瘾的开展提供理论依据。