医学微生物学教学中的课程思政教育探索

将思想政治教育元素融入专业知识教学中是培养高校学生树立正确思想观念,提升思想道德水平的重要举措。本文通过认真梳理和总结医学微生物学教学中的知识点,融入思想政治教育元素,探索医学微生物学教学中开展课程思政和立德树人教育的方式方法,培养德才兼备的高素质医学人才。

提升医学生病原微生物实验室生物安全防范能力思考

病原微生物实验室存在可感染操作者的危险生物因子,重视医学生培养中的实验室生物安全问题是人才培养中师生安全的需要,同时,将在源头上提升今后医务工作者的生物安全防范能力,是长远之计。本科在校阶段是进行实验室生物安全教育的最佳时期。影响提升医学生病原微生物实验室生物安全防范能力的因素很多,主要包括以下几个关键环节:提升管理层的重视;加强师资队伍的实验室生物安全意识和技能培训;强化理论和实验教学,提升医学生生物安全防范意识;结合现代数字化技术,建设相关资料库,提升教学质量;加强实验室生物安全硬件和管理体系建设;重视培养医学生对意外生物安全事故的应急处理能力;关注其他医学学科领域的生物安全问题等。

《病原生物学》教材编写探索

病原生物学是由医学微生物学和人体寄生虫学整合而成的学科。根据学科发展和教学需求,需要编写《病原生物学》教材。项目组在该教材编写中进行了如下探索,包括:遵循"三基五性"原则,努力做好传承和创新;深度融合病原生物的共性特征,形成特色鲜明的总论;遵循学科特点、教学对象及传统习惯,调整各论内容;统一教材中的概念和内容;做好纠错、去旧和补新工作;融入数字资源新模块;密切联系临床。

苦豆子总碱及4种单体生物碱对幽门螺杆菌的体外抑菌作用研究

目的探讨苦豆子总碱、苦参碱、苦参素、槐定碱、槐果碱体外抑制幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)的作用。方法选用5种苦豆子生物碱,纸片扩散法粗测抑菌浓度范围;依据粗测范围,液体倍比稀释法测定5种生物碱的最小抑菌浓度(MIC)。结果苦豆子总碱的MIC为32mg/ml,在体外对Hp有一定的抑制作用。苦参碱、苦参素的MIC为64mg/ml,槐定碱的MIC为128mg/ml,体外抑菌活性微弱。槐果碱在体外对Hp无明显抑制作用。结论苦豆子总碱有可能成为替代抗生素的抗Hp候选药物。

兰州市不同毒力基因型志贺菌致病力研究

目的检测2007年兰州市分离的不同毒力基因型志贺菌株致病力情况,探讨毒力基因型与致病力的关系。方法选用不同毒力基因型的志贺菌,以腹腔注射为感染途径,测定其对昆明种小鼠的半数致死量(LD50)。结果7株不同毒力基因型(分别为virA+ipaH+setlA、virA+ial+ipaH+setlA+setlB+sen、virA+setlA、virA+ial+ipaH+setlA+sen、virA+ipaH+setlA+sen、virA+ipaH+setlA+setlB、virA+ial+ipaH+setlA+setlB)志贺菌LD50分别为:1.422×109cfu/mL、6.653×107cfu/mL、6.653×108cfu/mL、1.422×109cfu/mL、1.422×109cfu/mL、6.653×108cfu/mL、3.062×109cfu/mL;结果表明,不同毒力基因型的志贺菌之间存在致病力差异,其中以基因组合为virA+ial+ipaH+setlA+setlB+sen的福氏志贺菌Ⅳ菌株的LD50最小,致病力最强。结论志贺菌的毒力基因型与致病力密切相关。

医学生物安全教育分析和探讨

生物安全涉及医学、生物学、农学、军事科学等多学科的教学和科研领域。医学生物安全涉及医学人才培养、科学研究和临床实践的多个环节,本文通过总结这些环节中的危险生物因子防范问题,分析和探讨了医学生物安全的范畴、特征、内容和提升防范的方法,为进一步提升我国医学生物安全防范教育水平提供思路。

泡球蚴长期保存后生物活性的研究

目的继发性泡球蚴经液氮冻存后传代健康小鼠,观察其体内泡球蚴的生长情况并判定其生物活性,以探讨泡球蚴保种传代的新方法。方法将继发性感染泡球蚴的小鼠,液氮冻存7d后,常规复苏剖取包囊接种健康小鼠,生长两个月后颈椎脱臼处死,剖检并与常规接种方法相比较,从以下方面评价冻存效果:(1)大体观察及测量包囊湿重;(2)普通光学显微镜及透射电子显微镜观察组织学结构及超微结构;(3)检测包囊囊液中总蛋白含量、血清中特异性免疫球蛋白活动状态等免疫学指标;(4)检测血清碱性磷酸酶及囊液中钙离子含量等生化指标。结果液氮低温冻存后泡球蚴所接种试验组小鼠与常规接种组小鼠体内泡球蚴在包囊湿重、包囊组织结构、囊液蛋白及钙离子含量、血清碱性磷酸酶及特异性免疫球蛋白活动状态等方面均无显著差异(P>0.05)。结论液氮冻存后泡球蚴仍具有感染小鼠的能力,且接种后所生长泡球蚴组织与常规接种泡球蚴组织生物活性无显著差异。液氮冻存可以长期保存泡球蚴组织的活性。

放射线治疗包虫病的实验研究

目的通过观察不同剂量6MV X线照射对大鼠继发性棘球蚴活性的影响,探讨放射线治疗棘球蚴病的可行性及其机制。方法对从大鼠体内分离出的棘球蚴囊分别以10、20、30和40Gy的6MV X线进行照射后,观察棘球蚴囊的超微结构,测定囊液中总蛋白和钙离子含量,并通过草酸盐一焦锑酸盐细胞化学法(PPA)探讨放射线治疗包虫病的机理。结果与空白对照组相比,各实验组棘球蚴囊超微结构均可见不同程度的改变和破坏;囊液总蛋白含量明显降低而钙离子含量明显增高,且以高剂量组更为显著。PPA法显示实验组内质网与线粒体扩张且膜上可见黑色光滑的钙盐沉积。结论6MV X线对棘球蚴囊有一定破坏作用,且在一定的范围内存在量效关系。

复频高能聚焦超声治疗小鼠泡球蚴病的实验研究

目的研究复频高能聚焦超声治疗昆明小鼠皮下泡球蚴病灶的效果。方法将皮下接种泡球蚴的昆明小鼠随机分为3组,每组10只,分别用不同强度的复频聚焦超声照射小鼠的泡球蚴病灶。对照组(A组)未照射,其他实验组均一次性照射5 min。其中小功率联合照射组(B组)的3个换能器的照射功率为4 W+4 W+5 W,大功率联合照射组(C组)换能器的照射功率为10 W+11 W+10 W。治疗后用透射电镜观察泡球蚴组织的形态结构变化。用美兰染色法观察原头节存活率。用激光共聚焦显微镜观察泡球蚴组织中的线粒体含量。用考马斯亮蓝染色法检测泡球蚴的总蛋白含量。用琥珀酸脱氢酶试剂盒检测泡球蚴的琥珀酸脱氢酶活性。结果复频聚焦超声照射后,透射电镜观察显示,B组和C组泡球蚴生发层细胞减少,线粒体肿胀破裂,内质网扩张,核膜不清,微绒毛变短或消失,且C组较B组损伤更严重。原头节存活率,B组(70.50%)和C组(59.83%)与A组(82.33%)相比,差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间差异也有统计学意义(P<0.05)。总蛋白含量和琥珀酸脱氢酶活性,B组(3.07 mg/ml,2.15 U/mg)和C组(2.87 mg/ml,1.87 U/mg)与A组(3.83 mg/ml,3.50 U/mg)相比,差异均有统计学意义(P<0.05),但B、C组间的差异无统计学意义(P>0.05)。线粒体含量,B组(105.46 a.u./个)和C组(70.90 a.u./个)较A组(133.45 a.u./个)均下降,且C组与A、B组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),但A、B两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论复频高能聚焦超声可对小鼠皮下泡球蚴病灶造成损伤,对其有一定治疗效果。

布鲁氏菌BP26蛋白的表达纯化及其抗原性的研究

目的获得布鲁氏菌感染血清学诊断优势抗原BP26重组蛋白。方法应用PCR技术从布鲁氏菌减毒株(104M)中扩增出bp26目的基因片段,将其克隆于表达载体PET30a中,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,用亲和层析纯化BP26重组蛋白,然后分别用Western-blot,间接ELISA检测其抗原性。结果DNA测序及酶切鉴定证实PET-30a/bp26原核表达载体构建成功,并在大肠杆菌中高效表达,免疫印迹和间接ELISA实验证明BP26重组蛋白可与布鲁氏菌阳性血清产生特异性结合。结论成功获得了布鲁氏菌中序列全长为696bp,编码232个氨基酸的BP26蛋白,通过血清学反应证实,该蛋白为人和动物布鲁氏菌病临床诊断试剂盒的研发奠定了基础。

EV71型病毒驯化与手足口病动物模型的研究进展

手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机制,而建立动物模型的关键是通过病毒驯化获得EV71的神经细胞适应毒株。本文简要综述EV71的病毒驯化及手足口病动物模型的最新进展,以期推动相关研究。

兰州市区健康体检人群幽门螺旋杆菌检测结果分析

目的调查兰州市健康体检人群中幽门螺旋杆菌(Hp)感染情况,旨在有针对性地进行健康指导。方法将7 987例进行健康体检的人员分别依据性别、年龄分组,采用^(13)C尿素呼气试验测定其Hp结果,用SPSS19.0软件进行统计学处理,分析各组Hp感染状况。结果 Hp阳性总检出率为41.61%,其中男、女阳性率分别为59.67%和40.33%。不同年龄段及性别间Hp阳性率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论兰州市区健康体检人群的Hp感染率接近于我国平均Hp感染率,不同年龄段人群Hp感染均较为常见,该结果可以对体检人群进行Hp感染的预防指导和流行病学调查提供帮助。

细粒棘球绦虫GAPDH蛋白的生物信息学分析及其重组表达纯化和酶活性检测

目的以生物信息学预测细粒棘球绦虫甘油醛3-磷酸脱氢酶(EgGAPDH)编码基因及其编码蛋白的结构和功能,利用大肠杆菌原核表达系统高效表达EgGAPDH重组蛋白,体外检测其酶活性。方法运用各软件对EgGAPDH的理化性质、保守功能域、系统发生树和二级结构、三级结构等方面进行分析后,将EgGAPDH基因亚克隆于表达载体pET30a(+),转化入E.coli BL21(DE3)感受态细菌,表达、纯化重组蛋白,并利用底物3-磷酸甘油醛测定重组蛋白EgGAPDH的酶催化活性。结果 EgGAPDH cDNA序列长度为1 011bp,编码一个336个氨基酸的蛋白。该GAPDH蛋白理论相对分子质量为36 128.3Da,等电点为8.44,具有GAPDH蛋白家族的两个功能结构域,富含6种类型的特定功能位点。成功构建的原核表达载体pET30a(+)-EgGAPDH在E.coli BL21(DE3)中高效表达,且发现表达产物主要以可溶形式分布于裂解上清,制备甘油醛3-磷酸脱氢酶纯品并通过酶活检测显示其具有高效酶活性。结论 EgGAPDH基因可在原核系统中获得有酶催化活性的高效表达,为进一步研究其在糖代谢中的功能奠定了基础。

2005-2013年陇南市汶川地震前后黑热病流行特点研究(英文)

目的调查甘肃陇南地区2005-2013年黑热病的发病情况,分析黑热病流行的原因及其受汶川地震的影响。方法收集2005-2012年黑热病的发病例数,计算发病率,分析地震前后黑热病流行病学特点。结果在2005-2013年期间,陇南地区黑热病总发病数为825例,年发病率为3.36/10万;黑热病年发病人数在2005-2008年期间有明显上升趋势,2010-2013年期间有明显下降趋势,2008-2010年期间发病人数明显高于其他年份(P<0.01)。结论黑热病是陇南地区最常见的人兽共患病,汶川地震所产生复杂的自然和社会环境有利于黑热病流行。因此,本研究充分证明,地震有利于黑热病流行,地震后黑热病应得到更加严格的防控。

结核分枝杆菌蛋白亚单位疫苗与疫苗诱导的T细胞免疫记忆研究进展

牛分枝杆菌减毒活疫苗——卡介苗(bacillus Calmette-Gurin,BCG)对预防严重的儿童结核病有效,但其免疫保护效率随儿童年龄增长而降低。BCG不能提供终身免疫保护可能与其诱导的记忆性T细胞主要是寿命较短的效应记忆性T细胞有关。新型结核分枝杆菌蛋白亚单位疫苗将有效的抗原有机组合起来,在适宜的疫苗佐剂辅助下诱导Th1型免疫应答。动物实验表明,增加抗原谱可有效提高亚单位疫苗的保护效率。更重要的是,亚单位疫苗在体内持续时间较短,可诱导寿命较长的中央记忆性T细胞,提供比BCG更持久的免疫保护力。记忆性T细胞的分化受抗原特性与剂量、细胞因子、转录因子及雷帕霉素等的调控。对亚单位疫苗及其诱导的免疫记忆进行研究将对新型结核分枝杆菌疫苗的设计与评价产生积极影响。

高危型HPV E6、E7蛋白致宫颈癌的分子机制研究

对近年来高危型人乳头瘤病毒(HPV)E6、E7蛋白诱导宫颈癌发生的分子机制的研究进展进行了综述,为今后宫颈癌的防治提供思路。

幽门螺杆菌感染与多样性临床结局关系的研究

幽门螺杆菌（Hp）感染与胃炎、消化性溃疡、胃癌的发生相关[1]。全球50%以上的人群存在Hp感染,但大多数感染者并不出现或仅出现较轻的临床症状,仅20%左右的感染者会发展为消化性溃疡,极少数感染者最终发展为胃癌等严重疾病[2]。Hp感染后的多样性临床结局提示其具有复杂的致病机制,Hp菌株的定植黏附及毒力因子、宿主的易感性与反应性以及社会环境因素均与其相关[3]。

分枝杆菌脂质组分加强结核分枝杆菌亚单位疫苗效应的初步研究

分枝杆菌细胞壁含丰富的脂质组分,其中一些具有抗原性,或具有重要的免疫调节作用。为探讨这些脂质组分在结核分枝杆菌亚单位疫苗中的作用,研发有效疫苗,本研究对卡介苗(BCG)细胞壁总脂成分进行萃取,用硅胶柱色谱法将其分离为非极性脂、中间极性脂和极性脂,检测各类脂质组分在人群中的免疫原性,并将总脂和各类脂质组分分别与佐剂二甲基三十六烷基铵(DDA)和Poly(I∶C)混合,进一步与结核分枝杆菌融合蛋白LT70(ESAT6-Ag85B-MPT64<190-198>-Mtb8.4-Rv2626c)混合,构建含脂质的结核分枝杆菌亚单位疫苗。在小鼠BCG攻击模型中进行保护效率评价,包括BCG初免后含脂质亚单位疫苗的强化免疫保护效率评价。结果显示,结核病患者脂质特异性抗体IgG高于健康人群(P<0.05)。在小鼠BCG攻击模型免疫保护效果评价中,含脂质亚单位疫苗LT70-总脂组小鼠肺部的荷菌数显著低于BCG组(P<0.05)。在BCG初免-含脂质亚单位疫苗加强免疫策略中,LT70-总脂和LT70-中间极性脂组小鼠肺部荷菌数均低于BCG组(P<0.01)和LT70组(P<0.05)。研究表明,分枝杆菌脂质成分具有较强的免疫原性,与亚单位疫苗联合使用能增强亚单位疫苗的抗结核分枝杆菌效果。其中,中间极性脂类强化作用明显,值得深入研究。

陇马陆配伍中药抑制幽门螺杆菌作用的实验研究

目的:探讨陇马陆分别与红芪、黄连、红景天、马齿苋、蒲公英配伍后的抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)作用以及药物间是否有协同效应。方法:采用水提法和醇提法提取上述药物配方及陇马陆、红景天和黄连单药的有效成分,应用纸片琼脂扩散法筛选上述配方对Hp的抑制作用;建立Hp液体培养模型,采用稀释法测定陇马陆、黄连、红景天单药及复方提取物的抗Hp最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并比较药物间配伍后的协同效应。结果:陇马陆与红芪、红景天、黄连、马齿苋、蒲公英药配伍后对Hp均有抑制作用,以与黄连配伍后抑制作用最强;陇马陆、黄连、红景天、陇马陆-黄连、陇马陆-红景天对Hp的MIC分别为20~40、0.63~1.25、1.25~2.50、1.25~2.50、10~20 mg/m L;与陇马陆配伍后,黄连和红景天的抗Hp MIC仅为单药的1/2倍。结论:陇马陆分别与红芪、红景天、黄连、马齿苋、蒲公英配伍对Hp均有一定的抑菌作用;陇马陆与黄连、红景天配伍后可产生抗Hp的协同效应;Hp液体培养稀释法可以有效判断中药的抗Hp效能。

结核病重组蛋白亚单位疫苗研究进展

卡介苗是唯一应用于临床的结核病疫苗,但是其对成人结核病的保护效果仍存在不确定性。重组蛋白亚单位疫苗可提供长期的免疫保护效果,且成分明确、安全性好,因而具有较好的应用开发前景。作者对结核病重组蛋白亚单位疫苗的组分(结核分枝杆菌保护性抗原和免疫佐剂)、临床研究现况、应用策略及研究所面临的挑战等方面的进展进行了综述。