非吞噬细胞NAD(P)H氧化酶生成的活性氧参与基因表达和信号转导

以前认为,NAD(P)H氧化酶仅存在于吞噬细胞,负责吞噬细胞呼吸爆发时产生活性氧(ROS)以杀灭微生物。现在发现正常非吞噬细胞也有NAD(P)H氧化酶,称之为类NAD(P)H氧化酶。该酶在生长因子和细胞因子的刺激下,介导非吞噬细胞产生胞内或胞外的ROS,通过此途径产生的ROS对细胞增殖、分化和血管形成和缺氧反应等生理过程至关重要。这些新的发现,有力地证明了ROS作为细胞“信号分子”和“基因表达开关”的积极作用,改变了过去只把ROS看作有害物的误解。

FABP7基因真核表达载体的构建及其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的构建脑脂肪酸结合蛋白(BLBP/B-FABP,FABP7)基因的真核表达载体,并检测其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。方法采用逆转录方法从星型细胞瘤组织中扩增FABP7基因,双酶切后插入线性化的pcDNA3.1载体真核启动子下游,构建重组真核表达载体,转染人乳腺癌细胞MCF-7后,采用半定量RT-PCR检测FABP7基因mRNA的表达,MTT法检测细胞的增殖活性、流式细胞术检测细胞的周期变化情况,并对细胞进行计数。结果FABP7基因重组真核表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确,转染MCF-7细胞后48、72和96h,pcDNA3.1-FABP7组的细胞数和细胞的A490值均比pcDNA3.1空质粒组明显降低,G1期细胞百分含量均明显升高。结论已成功构建了FABP7基因的真核表达载体,该载体可抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖。

黄酮类化合物的抗肿瘤活性及其机制研究进展

天然黄酮类化合物是植物(Polyphenolic compounds)的内信号分子及代谢物,属于多酚类物质,具有种类繁多,结构复杂,广谱的药理活性以及较低毒性的特点,并且对于人类心血管,肿瘤等疾病的治疗和预防具有广泛意义。本文综述了黄酮的抗肿瘤活性及其机制的研究进展,为进一步开拓其应用提供一定的药理依据。

种间对比研究方法阐明解耦联蛋白与最大寿命的关系

活性氧作为氧自由基及其衍生物是体内最常见的自由基类物质,发挥着重要的生物作用。体内生成活性氧的源头是线粒体,线粒体活性氧产率与动物最大寿命负相关,线粒体解耦联蛋白（uncoupling protein,UCP）能降低线粒体活性氧产率。

七种天然二萜类化合物的体外细胞毒活性及其构效关系

应用SRB法测定七种二萜类化合物对人急性早幼粒白血病细胞系HL-60、人肝癌细胞系SMMC-7721和人宫颈癌细胞系HeLa的细胞毒活性。化合物1和6对三种细胞的GI卯值均小于4μg／mL，显示出很强的毒性；化合物2—4对三种细胞的GI50值介于2—33μg／mL之间；化合物5和7对三种细胞的G150值介于26～126μg／mL之间，毒性相对较弱。分析构效关系支持仪一亚甲基环戊酮结构为该类化合物毒性中心的观点。羟基在此类化合物的细胞毒作用中起抑制作用，羟基数越多，化合物的毒性越小，而羟基的位置变化对毒性影响比羟基数目的影响小。化合物1和6最具进一步研究的价值。

YKL-40基因真核表达载体的构建及对人胃癌SGC-7901细胞增殖作用的影响

目的:构建针对人类软骨糖蛋白-39(HCGP-39,YKL-40)的真核表达载体,观察其对肿瘤细胞增殖的影响.方法:采用逆转录方法从乳腺癌组织中获得基因YKL-40,双酶切后插入线性化的pcDNA3.1载体真核启动子下游,重组体经限制性内切酶及测序鉴定,将阳性克隆的载体转染胃癌细胞株SGC-7901,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖活性、细胞计数并观察细胞生长情况、半定量RT-PCR检测基因YKL-40 mRNA的表达、流式细胞术检测SGC-7901细胞的周期变化情况.结果:限制性内切酶及测序鉴定表明成功地构建了针对基因YKL-40的真核表达载体;将其转染胃癌细胞SGC-7901后,发现细胞增殖加快,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测基因YKL-40 mRNA的表达增加;流式细胞检测S期细胞增多.结论:成功地构建了针对基因YKL-40的真核表达载体,该载体可使胃癌细胞株SGC-7901增殖加快.

癌症 TCGA 数据库中乳腺癌预后数据的挖掘

近年来,乳腺癌发病率逐渐上升,并且呈现出年轻化趋势。使用TCGA数据库中已有的基因信息筛选鉴定出与乳腺癌预后相关的基因。为排除癌组织和正常组织取样时间不同造成的差异,我们选取了113对同时检测乳腺癌区和其相对应癌旁正常组织的样品,从TCGA数据库调取转录组数据,对这些数据通过DEseq进行差异表达分析,筛选出1428个差异表达基因。对差异表达基因进行基因本体GO,代谢通路KEGG,疾病本体DO和富集分析获得68个与乳腺癌相关的差异表达的关键基因;采用数据库中所用癌症的表达数据(共1097例)对这些乳腺癌相关基因进行总生存率分析,筛选出8个与乳腺癌预后相关的基因。结果显示在乳腺癌病人中PGLYRP2、SEMA3G、PROL1及SLC7A3的高表达伴随着乳腺癌病人的预后良好,而SKA1、BIRC5、RRM2和AURKA基因的高表达伴随着乳腺癌病人的预后不良。这8个基因有可能是乳腺癌预后相关的重要基因,这为乳腺癌病人的预后治疗提供了新的方向与思路,并可能通过调控基因水平来尽可能地控制预后。

硫化氢在炎症和自噬等病理中作用与机制的研究进展

硫化氢(H2S)是一种内源性气体信号分子,常常与一氧化碳和一氧化氮协同作用,在血管生成、神经活动、葡萄糖代谢、抗氧化和炎症反应等调节功能中发挥着重要作用。由于内源H 2S代谢异常与许多疾病如癌症、高血压、糖尿病和神经退行性疾病等有关,因此,调控内源H2S的量对于治疗H 2S相关的疾病以及临床上的研究具有重要意义。笔者重点综述了近年来H 2S供体来源和H 2S在炎症、自噬等相关病理方面的研究进展,以及内源H 2S量精确化潜在的研究方式,同时对H 2S研究前景和发展方向作了展望。

2种苯并呋喃衍生物对肝癌细胞的毒性及活性氧机制

目的:比较离舌橐吾Ligularia veitchiana(Hemsl.)Greenm的2种苯并呋喃衍生物5,6-二甲氧基-2-异丙基-苯并呋喃(5,6-dimethoxy-2-isopropenyl-benzofuran,化合物1),5-乙酰基-6-甲氧基-2-异丙基-苯并呋喃(5-acetyl-6-methoxy-2-isopropenyl-benzofuran,化合物2)对人肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02的毒性,并分析其可能机制。方法:用台盼蓝排染法检测化合物细胞毒性、用DCFH-DA荧光分光光度计法检测细胞活性氧含量、用钼酸铵比色法检测过氧化氢酶活性。结果:化合物1和2对L02的IC50分别为(171.2±3.3)mg·L-1和(79.0±4.1)mg·L-1,高于对HepG2的IC50(84.2±6.5)mg.L-1和(65.2±1.9)mg·L-1,表明肿瘤细胞比正常细胞对化合物更加敏感。用化合物1和2 IC50处理细胞48 h,测得HepG2细胞活性氧分别是对照组的1.6倍和3.2倍;L02细胞活性氧分别是对照组的1.2倍和1.8倍。化合物1和2处理后,HepG2细胞过氧化氢酶活力分别从对照组的(17.2±1.7)U·mg-1下降到(12.8±0.4)和(6.4±0.1)U·mg-1;L02细胞过氧化氢酶活力分别从对照组的(17.7±1.2)U·mg-1下降到(14.3±1.5)和(8.6±0.5)U·mg-1;HepG2过氧化氢酶活力降低幅度大于L02。结论:2个化合物对HepG2的毒性和活性氧的增幅均大于L02,同时HepG2过氧化氢酶活力降幅也大于L02。据此推测2个化合物细胞毒性与活性氧有关。

DNA瞬态损伤的快速修复阻断癌变最早事件的发展

DNA瞬态损伤(DNA自由基)引起DNA碱基对断裂和双螺旋结构下沉,导致基因失稳,可能是构成癌变的最早事件。基因失稳是癌的共同特征标志之一,而DNA修复可通过维持基因完整性来降低癌的发生。修复DNA的能力低下也是癌的共同特征标志之一。近年新发现了一种独特的修复机制,称为快速修复,专一地修复DNA瞬态损伤,只需几个微秒就能完成,比已知的酶性修复快十亿倍,修复速率常数达到109L.mol-1.s-1。还发现凡是具有快速修复能力的植物多酚类几乎都能不同程度地削弱癌的特征标志,包括使癌细胞形态正常化、抑制癌细胞增殖、促进癌细胞分化或凋亡、降低端粒酶活性、减少植瘤率、阻止细胞迁移和扩散、抑制血管生成、延长存活时间、降低患癌风险等。