脱壁酶液诱导植物细胞产生过氧化物酶抑制因子的研究

以烟草(+)天仙子杂交种愈伤组织、苜蓿和小麦愈伤组织为实验材料,用愈创木酚法测定过氧化物酶(EC.1.11.7 POD)活性,首次报道了用分离原生质体的脱壁酶液能够诱导植物细胞产生POD 抑制因子,所试材料经脱壁酶液处理后均测不出POD 活性,并且对POD活性具有抑制作用。此类POD 抑制因子是小分子物质,具有较强的热稳定性,一些迹象表明它们不是酚类物质。POD 抑制因子可能是通过影响POD 催化合成的初始反应产物的稳定性,来达到其抑制效能。不同种属来源植物细胞产生的POD 抑制因子在抑制作用上无明显差异。至于POD 抑制因子的稳定性,在原生质体培养难易程度不同的植物材料间有差异。文中讨论了POD 抑制因子的产生和清除对培养原生质体细胞壁的再生修复及对培养状况的影响。

正交设计在诱导植物体细胞胚胎发生中的应用

利用正交试验方法研究了培养基中主要成分，ＮＨ，ＮＯ，Ｃａ￣（２＋），Ｍｇ￣（２＋）对党参体细胞胚胎发生的影响。发现３０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ＋３０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ组合最有利于体细胞胚胎发生，其它依次为３０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ、３０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ、３０ｍｍｏｌ／Ｌ ＮＨ与０．５ｍｍｏｌ／ＬＣａ￣（２＋）、３０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ与７．０ｍｍｏｌ／ＬＣａ￣（２＋）、３．０ｍｍｏｌ／ＬＣａ￣（２＋）、１．５ｍｍｏｌ／ＬＭｇ￣（２＋）。通过分析得出优选培养基成分为３０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ、３０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ、１．０ｍｍｏｌ／ＬＣａ￣（２＋）和１．５ｍｍｏｌ／ＬＭｇ￣（２＋），其它成分均同ＭＳ培养基成分。用此培养基，党参体细胞胚胎发生比ＭＳ培养基提高２．５倍。

植物原生质体分离及培养早期阶段损伤和修复机理的研究

作者首次提出植物原生质体早期阶段培养的本质是遭受损伤的植物细胞完成其自身修复的过程。并从自由基代谢、次生物质(包括植物防御因子、丹宁、酚类物质等)的代谢、蛋白酶的合成和分解、及基因表达的调控等不同层次阐述植物原生质体培养早期阶段损伤和修复的过程。及其这些过程发生变化对植物原生质体培养产生的影响作用。作者展望。藉以这些方面研究的深入,可为建立针对性较强的培养技术和方法提供实验依据,这对增强植物原生质体培养技术实验的稳定性,发展和应用该技术进行作物和牧草的遗传改良,都具有重要的意义。

植物防御反应与原生质体培养技术的改进

介绍了脱壁酶分离原生质体操作过程中，植物细胞防御反应的发生及其对原生质体分离与早期阶段培养的影响；阐述了原生质作早期阶段培养的实质是遭受机械、生理损伤的植物细胞完成其自身修复的过程；并对改进原生质体培养技术进行了分析。

抗氧化剂对苜蓿原生质体早期培养的影响

研究发现,分离原生质体的酶解脱壁处理可以诱导苜蓿细胞产生活性氧。培养基中添加抗氧化剂,有助于提高培养原生质体的分裂频率,缓解褐化现象的出现。经紫外照射处理的培养基不利于苜蓿原生质体的生长和分裂,添加抗氧化剂后,紫外辐射所引起的不良效应则被抵消。因而,通过抗氧化剂对活性氧的清除,有助于早期原生质体的培养。

电场法介导植物基因的直接转移

本文简述了近几年迅速发展的电场转移基因法。通过一系列实验结果说明该法具有简便、高效、普遍适用的特点,有可能在作物的基因转移上做出贡献。另外还涉及了植物原生质体的电融合。