甘肃地区HCV血清分型与基因分型及干扰素抗体关系研究

目的(1)对甘肃地区198例慢性丙型肝炎(丙肝)患者进行血清分型和基因分型,并加以比较分析。(1)对36例应用哌罗欣治疗的慢性丙肝患者进行血清学分型和干扰素抗体的测定。方法血清学分型和干扰素抗体检测采用ELISA法;基因分型采用型特异性PCR法。结果(1)血清学分型率为53.03%(105/198),其中血清1型占48.57%(51/105),血清2型占36.19%(38/105),混合型血清(1+2)型占15.23%(16/105)。基因分型率46.46%(92/198),其中基因Ⅱ型占46.74%(43/92),基因Ⅲ型占36.96%(34/92),混合型基因(Ⅱ+Ⅱ)型占16.30%(15/92)。(2)22例接受哌罗欣治疗的慢性丙肝患者中,血清1型15例,占68.18%,血清2型3例,占13.64%,混合型血清(1+2),占18.18%。22例患者中有12例产生了干扰素抗体,占54.55%,其中血清1型7例(58.33%),血清2型3例(25.00%),混合型血清(1+2)2例(16.67%)。结论(1)甘肃地区丙型肝炎为血清1型,即基因Ⅱ型为主,其次为血清2型即基因型Ⅲ和血清(1+2)型即基因(Ⅱ+Ⅲ)型。(2)丙型肝炎血清学分型和基因分型具有良好的符合性,可以用于临床丙型肝炎分型。(3)丙型肝炎患者干扰素抗体的产生率为58.33%,对临床应用干扰素进行治疗的效果影响并不大。

HCV基因分型与血清分型相关性的研究

目的探讨HCV血清分型和基因分型的相关性及临床意义。方法HCV血清学分型应用ELISA法;HCV基因分型应用'型特异性'PCR法。结果1.血清学分型率为52.38%(88/168),其中血清1型阳性率为48.86%(43/88),血清2型阳性率为34.09%(30/88),血清(1+2)混合型阳性率为17.04%(15/88)。基因分型率为54.17%(91/168),其中基因Ⅱ型阳性率51.64%(47/91),基因Ⅲ型阳性率为31.86%(29/91),基因(Ⅱ+Ⅲ)混合型阳性率为16.48%(15/91)。结论兰州地区HCV以血清1型即基因Ⅱ型为主,其次是血清2型即基因Ⅲ型以及血清(1+2)型即基因(Ⅱ+Ⅲ)型。

慢性乙型肝炎HBV cccDNA的研究现状

HBV cccDNA一直是国内、外肝病界研究的热点,随着分子生物PCR技术的发展,对HBV cccDNA认识更加清晰。HBV cccDNA的产生是1个极其复杂的过程,合成受免疫细胞因子及其病毒包膜蛋白等一系列因素影响,对HBV cccDNA的形成尚未完全阐明。目前认为,它能够反映HBV抗病毒药物的应答情况,同时对抗病毒药物效果评价要优于其他指标,是衡量抗病毒疗效的主要指标,且能够评估慢性乙型肝炎预后。

丙肝患者病毒载量及危险因素与配偶感染关系

目的 研究慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血浆病毒载体量、危险因素与其配偶感染的关系。方法 应用酶免法(EIA)及FQ -PCR法检测12 2例CHC患者的血浆、尿液、泪液和精液及其配偶血浆抗丙型肝炎病毒(抗-HCV)及HCVRNA含量。结果 CHC患者血浆、尿液、泪液和精液及其配偶血浆抗-HCV检出率分别为94 . 2 6 %(115 / 12 2 ) ,4 2. 8% (2 1/ 4 9) ,11 .19% / (5 / 4 2 ) ,4 7 .2 2 % (17/ 35 )和2 2 . 5 0 % (2 7/ 12 0 ) ;HCVRNA的检出率分别为88 .15 % (6 7/ 12 2 ) ,5 5 . 10 % (2 7/ 4 9) ,19 .0 4 % (8/ 4 2 ) ,6 6 . 6 7% (2 4 / 36 )和2 5 . 83% (31/ 12 0 ) ,对照组均无抗-HCV及HCVRNA检出。男性配偶的抗-HCV、HCVRNA的检出率分别为15 .0 6 % (11/ 73) ,78. 0 8% (5 7/ 73) ;女性配偶的抗-HCV、HCVRNA的检出率分别为2 9. 78% (14 / 4 7)、89 .36 % (42 / 4 7)。当CHC患者外周血浆HCVRNA≥10 5copies/ml时,其配偶HCVRNA的检出率为2 9. 1% (2 1/ 6 9) ;当CHC患者外周血浆HCVRNA <10 5copies/ml时,其配偶HCVRNA的检出率为19 4. 7% (11/ 5 7)。配偶婚龄<10 ,11～2 0 ,2 1～30 ,31～5 4年的4个组HCVRNA的检出率分别为13 .33% (2 / 15 )、2 2 . 2 2 % (4/ 18)、32 . 0 0 % (8/ 2 5 )和5 5. 32 % (2 7/ 4 7)。

血清HCVRNA荧光定量与丙型肝炎诊断意义

目的探讨血清HCVRNA荧光定量在丙型肝炎诊断中的意义。方法采用ELISA法和荧光定量PCR法检测292例慢性丙肝患者抗-HCV和HCVRNA。结果抗-HCV及HCVRNA检出率分别为71.9%(210/292)和51.3%(150/292);抗HCV(+)组和抗-HCV(-)组HCVRNA的检出率分别为75.9%(82/108)和10.5%(4/83)。结论抗HCV(+)组HCVRNA检出率高于抗-HCV(-)组;血清HCVRNA荧光定量是临床诊断丙型肝炎的直接证据;抗-HCV诊断丙肝感染有漏诊现象。

乙型肝炎病毒基因型与临床病理分级分期的关系

目的了解甘肃省兰州市乙型肝炎病毒（HBV）感染者的基因型与临床和病理分级分期的关系。方法随机选择HBV DNA阳性88例各类慢性肝病患者，男68例，女20例，其中HBV携带者15例，慢性乙型肝炎39例，肝硬化（失代偿）20例，原发性肝癌14例。对以上患者进行基因分型，同时检测肝功能、HBV血清标志物、HBV DNA载量，对其中39例患者进行肝活组织检查并分级分期。结果88例血清标本中，C基因型60例（68．2％），B基因型17例（19．3％），B／C混合型8例（9．1％），非B／C型3例（3．4％）。C与B基因型在乙型肝炎病毒e抗原阳性组和阴性组的分布差异无统计学意义（P〉0．05），但C基因型患者的HBV DNA载量、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素均高于B基因型（P〈0．05）。肝组织病理检查中26例C基因型中表现中、重度炎症（G3～G4）20例（76．9％），11例B基因型中出现中、重度炎症（G3～G4）3例（27．3％（P〈0．05），C基因型在中、重度纤维化（S～S）与B基因型比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论甘肃省兰州市基因型以C、B型为主，以C基因型为优势。C基因型患者的肝脏病理损害较B基因型严重。

阿德福韦酯联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎病毒耐药分析

目的通过研究乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布特点及耐药位点的分布,了解拉米夫定联合阿德福韦酯治疗慢性HBV耐药情况的发生,以探讨其临床意义。方法选取在我院门诊和住院部就诊的曾经单用过拉米夫定或阿德福韦酯治疗失败的患者,再次使用拉米夫定联合阿德福韦酯治疗2年以上的慢性乙型肝炎患者73例,应用实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法检测HBV DNA分型情况,用连接酶检测反应(LDR)方法检测位点变异情况。结果 73例中14例未能检测出基因型,基因型检出率80.8%(59/73);其余59例标本检测到了基因型,其中B型11例(18.6%)、C型43例(72.9%)、非B非C型5例(8.5%)。治疗1年的59例标本中有9例患者检测到了耐药位点,耐药发生率为15.3%,其中B基因型中检出2例(18.2%),C基因型中检出7例(16.3%),非B非C型基因型中未检出;各基因型中变异位点的检出率差异无统计学意义(χ2=1.286,P>0.05)。治疗2年的59例患者中有24例患者检测到了耐药位点,耐药发生率40.7%,其中B基因型中检出4例(36.4%),C基因型中检出18例(41.9%),非B非C型基因型中检出2例(3.3%);各基因型中变异位点的检出率差异亦无统计学意义(χ2=6.578,P>0.05)。治疗2年后在24例耐药患者中发生相关阿德福韦酯耐药率33.3%(8/24),发生相关拉米夫定耐药率58.3%(14/24),发生联合耐药率8.3%(2/24)。结论兰州地区HBV基因型主要以C基因型分布为主,其次是B型,还有其他基因型存在;不同基因型耐药发生概率相近,突变概率与基因型无关。对单用拉米夫定或阿德福韦酯治疗失败后的患者再次使用两者联合治疗,亦有较高的耐药风险。

丙型肝炎患者精液中丙型肝炎病毒检出报告

目的通过研究慢性丙型肝炎患者精液中丙型肝炎病毒感染,探讨丙型肝炎病毒是否经夫妻性生活途径传播。方法用酶联免疫吸附法和荧光定量PCR法,检测56例男性慢性丙型肝炎患者血清、精液及其54例配偶血清抗-HCV、HCVRNA,健康对照组为23对体检健康者夫妇。结果男性慢性丙型肝炎患者血清中抗-HCV、HCVRNA的阳性率分别为91.07%(51/56)、85.71%(48/56),精液中抗-HCV、HCVRNA的阳性率分别为39.28%(22/56)、62.50%(35/56),结果与健康对照组比较均有统计学意义,P<0.05;男性慢性丙型肝炎患者配偶的血清抗-HCV及HCVRNA的阳性率为22.22%(12/54)、24.07%(13/54),与健康对照组相比较,经χ2检验有统计学意义,P<0.05。结论慢性丙型肝炎患者精液可感染HCV;HCV可经夫妻性生活途径传播。

中国慢性丙型肝炎患者合并甲状腺功能异常的影响因素调查

目的探讨中国未经治疗的慢性丙型肝炎(CHC)患者合并甲状腺功能异常(TD)的影响因素,为临床个体化治疗提供依据。方法收集2012年5月-2013年1月全国范围内1012例未经治疗的CHC患者,检测其甲状腺功能,并对地域、年龄、性别、HCV RNA复制水平等指标进行调查,分析CHC合并TD患者与上述指标的关系。计数资料组间比较采用χ2检验和Fisher精确检验。结果 CHC合并TD类型存在地域差异,华北、西北地区TD患病率最高,分别为28.2%和26.5%;各TD类型中,亚临床甲状腺功能减退最常见,占总TD的58.8%;中年患者在CHC合并TD中最常见(44.0%),其甲状腺功能减退的患病率明显高于其他年龄组患者(χ2值分别为10.10、6.17,P值分别为0.001、0.013);女性CHC患者合并TD的患病率高于男性(58.9%vs 41.1%,χ2=13.1,P=0.00);HCV RNA高复制在我国CHC中最为常见,但对TD影响不大。结论在中国CHC合并TD受地域分布、性别、年龄因素影响,但与HCV RNA复制水平相关性不大。

慢性乙型肝炎患者TGF-β_1及肝纤维化4项指标与肝脏病理分级分期的关系

目的探讨肝病患者转化生长因子-β1(TGF-β1)水平、肝纤维化标志物(HA、LN、CIV、PⅢP)、HBV-DNA及丙氨酸氨基转移酶(ALT)与肝脏炎症分级和纤维化分期的关系。方法测定80例肝病患者血清TGF-β1、HA、LN、CIV、PⅢP、HBV-DNA、ALT,同时对30例慢性乙型肝炎患者行肝穿刺活检并进行病理分级分期,分析TGF-β1、HA、LN、CIV、PⅢP、HBV-DNA、ALT与肝脏病理分级分期的关系。结果乙型肝炎患者血清TGF-β1水平随肝纤维化程度加重而升高,各期之间有显著性差异,但其在肝脏炎症各级之间差异无统计学意义(P>0.05);肝纤维化各期和炎症各级之间HBV-DNA、ALT均无明显差异(P>0.05);TGF-β1变化趋势与HA、LN、CIV、PⅢP均呈正相关(P<0.05)。结论血清TGF-β1水平与乙型肝炎患者纤维化程度密切相关,且不受肝组织炎症程度的影响,血清TGF-β1水平测定有助于肝纤维化的早期诊断。

复方益气活血化瘀中药对大鼠肝纤维化组织中胶原和转化生长因子β1表达的影响

目的应用二甲基亚硝胺(DMN)建立肝纤维化大鼠模型,研究以黄芪、丹参、三七为主的益气活血化瘀复方中药抗肝纤维化的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药干预组。采用DMN腹腔内注射的方法建立肝纤维化大鼠模型;根据病理学检查评价各组动物肝纤维化程度;应用RT-PCR检测各组肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA水平;应用免疫组化检测各组肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1的表达。结果中药干预组大鼠肝纤维化程度、肝组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA水平,以及肝组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原和TGF-β1的阳性表达均分别较模型组显著减轻与下降。结论益气活血化瘀复方中药能明显减轻肝组织病理改变和肝纤维化程度,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1表达是其抗肝纤维化的部分机制。

917例肝病患者丙型肝炎病毒感染因素分析

目的探讨各种肝病患者血清抗一丙型肝炎病毒（HCV）感染状况，研究其感染因素。方法采用ELISA法检测917例各种肝病患者血清抗-HCV。结果917例肝病患者总抗-HCV阳性率为27．81％（255／917），阳性率依次为：丙型肝炎（63．36％）〉乙、丙型肝炎、急性无黄疸性肝炎（45．45％）〉重症肝炎（30．12％）〉肝硬化（29．85％）〉慢性活动性乙肝（26．88％）〉急性黄疸性肝炎（17．09％）〉慢性迁延性乙肝（17．14％）〉肝癌（15．78％）〉甲型肝炎（5．26％）；男性和女性肝病患者抗-HCV的阳性率分别为26．47％（171／646）、68．83％（171／271）；男性和女性肝病患者平均年龄分别为（35．5土2．O）岁、（32．3±1．5）岁。结论各型肝病患者均检出抗-HCV，尤以丙型肝炎检出率最高，其次是乙、丙型肝炎、急性无黄疸性肝炎及重症肝炎；女性肝病患者HCV的感染率高于男性；各种肝病患者男性和女性感染的平均年龄无差别。

健康人群乙肝免疫状况分析

目的为了解一般人群中乙型肝炎表面抗体(HBsAb)水平,控制HBV在人群中的传播提供预防对策。方法用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术。结果HBsAb 0——10 mIU/ml的15岁以下为45.98%,15岁以上为21.59%;10——100mIU/ml的15岁以下为24.41%,15岁以上为35.51%;100——1280mIU/ml的15岁以下为29.60%,15岁以上为42.90%;15岁以下HBsAb总阳性率为54.01%,15岁以上HBsAb总阳性率为78.41%;所有组别男女性别无统计学差异(P>0.05)。结论本次检测人群HBsAb阳性率偏低,不能有效抵抗HBV感染,应加强乙型肝炎疫苗的接种面,认真贯彻执行计划免疫,及时监测HBsAb的含量,以采取相应措施,提高人群的免疫力,有效预防HBV感染。

人工肝支持疗法对重型乙肝患者病毒标志物清除的影响

目的观察人工肝支持疗法对重型乙肝患者病毒标志物及HBV-DNA水平的影响。方法采用荧光定量PCR法检测25例重型乙肝患者人工肝治疗前、后的HBV-DNA水平;采用时间分辨荧光免疫分析技术检测25例重型乙肝患者人工肝治疗前、后的三系统定量水平。结果治疗前、后HBV-DNA定量结果分别为1.30×108±3.37×108和1.20×108±1.721×108(t=0.93,P>0.05)。乙肝三系统定量结果分析分别为HBsAg111.32±95.74和79.13±91.69(t=1.015,P>0.05);HBsAb6.89±17.64和16.35±35.369(t=1.01,P>0.05);HBeAg0.13±0.33和0.128±0.36(t=0.03,P>0.05);HBeAb5.73±9.79和6.87±9.46(t=-0.347,P>0.05);HBcAb12.32±6.60和12.82±5.40(t=0.246,P>0.05)。结论人工肝支持疗法对重型乙肝血清HBV-DNA水平及乙肝三系统血清标志物没有明显的清除作用。

血清HCV RNA检测在慢性丙型肝炎诊断中的意义

目的探讨血清HCVRNA检测在慢性丙型肝炎临床诊断中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR(FQPCR)检测146例慢性丙型肝炎患者抗HCV和HCVRNA。结果抗HCV及HCVRNA检出率分别为73.9%(108/146)和52.1%(76/146);抗HCV(+)组和抗HCV(-)组HCVRNA的检出率分别为75.9%(82/108)和10.5%(4/38)。结论血清HCVRNA荧光定量是临床诊断丙型肝炎的直接证据,且可以弥补抗HCV对丙型肝炎的漏诊等不足。

人工肝技术治疗前后慢性重症乙肝患者血清IL-18、总胆红素的变化及其临床意义

目的:检测人工肝治疗前、后,重症乙型肝炎患者血清IL-18、总胆红素、γ-球蛋白(γG)水平的变化,分析人工肝技术清除病理性有害物质的功能。方法:34例慢性重症乙型肝炎患者分为两组,18例为人工肝治疗组,进行人工肝+内科综合治疗;16例为对照组,只进行内科综合治疗,血清IL-18、总胆红素及γG的水平,分别采用ELISA法、Beck-manCX4生化仪及Sebia电泳仪进行检测。结果:人工肝治疗组治疗前、后,血清IL-18的含量分别为(499.11±230.24)ng/L和(313.78±83.28)ng/L,差异显著(P<0.05);对照组治疗前、后血清IL-18的含量分别为(477.89±163.79)ng/L和(373.73±148.41)ng/L,差异无统计学意义(P>0.05)。人工肝治疗组治疗前、后,血清总胆红素含量的均值分别为(555.01±17.81)μmol/L和(305.92±62.19)μmol/L;差异显著(P<0.05)。血清γG均值分别为(23.8±12.41)g/L和(22.47±2.28)g/L,无统计学意义(P>0.05)。对照组治疗前、后血清总胆红素含量的均值分别为(543.12±21.77)μmol/L和(513.55±15.58)μmol/L;血清γG均值分别为(21.66±13.48)g/L和(21.96±5.88)g/L,均无统计学意义(P>0.05)。结论:人工肝技术可有效地清除重肝乙肝患者体内IL-18、总胆红素等病理性物质,提高患者的存活率,为肝移植的治疗争取了时间。

乙型和丙型肝炎后肝硬化与糖尿病的关系

乙型肝炎后肝硬化和丙型肝炎后肝硬化与糖尿病密切相关。一方面,乙型肝炎后肝硬化和丙型肝炎肝硬化会导致糖尿病,此类糖尿病为肝源性糖尿病。另一方面,糖尿病又会导致慢性乙型肝炎和慢性丙型肝炎进展为肝硬化,并使其进一步发生发展。且导致肝硬化并发症(感染、肝性脑病等)的发生率及病死率升高,同时糖尿病可能与乙型肝炎后肝硬化和丙型肝炎后肝硬化进展为肝癌密切相关。

腹膜恶性间皮瘤延迟诊断一例分析

目的提高腹膜恶性间皮瘤(peritoneal malignant mesothelioma,PMM)的诊断水平。方法回顾性分析1例PMM的临床资料。结果本例以进行性腹胀为主诉,入院发现腹水,腹水检查提示性质介于渗出液和漏出液之间,多次腹水脱落细胞学检查未见恶性细胞,血清肿瘤标志物轻度异常,结合正电子发射型计算机断层扫描检查提示结核性腹膜炎,建议行腹腔镜探查,患者拒绝遂予诊断性抗结核治疗后出院。1个月后症状加重,腹水增多,经腹腔镜探查并大网膜活检病理证实为PMM,确诊后1月余因多脏器功能衰竭死亡。结论对不明原因腹水,尤其伴网膜弥漫性肿胀者应考虑PMM的可能;腹水脱落细胞学检查阴性时,应考虑腹腔镜下大网膜活检病理检查,以及早诊断。

血清cccDNA在阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎中的预测作用

目的探讨血清共价闭合环状DNA(cccDNA)在阿德福韦酯(ADV)治疗慢性乙型肝炎(CHB)中的临床价值。方法选取81例确诊为CHB的病例,检测其血清cccDNA;根据血清cccDNA的检测结果,将81例患者分为cccD-NA阳性组和cccDNA阴性组,给予阿德福韦酯治疗,并随访到96周,随访时对两组病毒学指标(HBV DNA、HBeAg、HBe-Ab)及丙氨酸转氨酶(ALT)进行比较。结果两组在年龄及性别上的比较差异无统计学意义(P>0.05)。cccDNA阳性组血清的cccDNA与HBV DNA、HBeA及ALT呈正相关性。随访24、48周时两组HBV DNA阴转率、HBeAg血清学转换率及ALT复常率比较均无统计学意义(P>0.05);72周时HBV DNA阴转率和HBeAg血清学转换率比较有统计学意义(P<0.05),ALT复常率无统计学意义(P>0.05);96周时HBV DNA阴转率、HBeAg转阴率、HBe-Ab阳转率及ALT复常率比较差异有统计学意义(P<0.05)。随着治疗时间的延长,cccDNA阴性组在病毒、血清及生化学应答上明显高于cccDNA阳性组。结论阿德福韦酯能够有效抑制病毒复制,血清cccDNA对阿德福韦酯的远期疗效有一定的预测意义。

人工肝治疗慢性重型乙型肝炎的临床研究

目的了解人工肝治疗前、后重型乙型肝炎患者血清IL-18、总胆红素、γ-球蛋白水平和病毒标志物的变化,分析人工肝技术清除病理性有害物质效果。方法20例慢性重型乙型肝炎患者为人工肝治疗组(人工肝+内科综合治疗),血清IL-18用ELISA法检测、血清总胆红素用BeckmanCX4生化仪检测、血清γ-球蛋白分析用Sebia电泳仪,血清HBVDNA用实时荧光定量PCR法;对照组为20例仅进行内科综合治疗的慢性重型乙型肝炎患者。结果人工肝治疗组治疗前、后血清IL-18含量分别为(501·22±211·35)pg/ml和(302·56±87·33)pg/ml,治疗前、后血清IL-18均值经t检验差异有统计学意义(t=3·302,P<0·05);对照组治疗前、后血清IL-18含量分别为(485·36±178·21)pg/ml和(381·25±152·65)pg/ml,差异无统计学意义(t=1·90,P>0·05);人工肝治疗组治疗前、后HBVDNA定量结果分别为5·70×107±1·48×107和5·60×107±1·50×107,差异无统计学意义(t=0·44,P>0·05);治疗前、后血清总胆红素均值分别为(562·33±16·25)μmol/L和(302·99±63·54)μmol/L,差异有统计学意义(t=1·98,P<0·05);治疗前、后血清γ-球蛋白均值分别为(24·01±2·05)g/L和(21·98±2·26)g/L,差异无统计学意义(t=1·69,P>0·05)。结论人工肝技术可有效清除重型肝炎患者体内IL-18、总胆红素等病理性物质,可提高重型肝炎患者的存活率,为肝移植治疗争取时间,但对血清病毒标志物没有明显的清除作用。