UPLC-Q-TOF/MS结合化学计量学对不同产地香圆主要成分的研究

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)快速分析香圆化学成分的方法。利用UPLC-Q-TOF/MS联用技术,通过一级质谱精确质量数和高分辨二级碎片离子谱图库信息,参照标准品比对及相关文献对化合物结构信息进行鉴定;采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对不同产地香圆样品进行数据分析及质量评价。结果显示:经UPLC-Q-TOF/MS分析指认出29个成分;采自5个产地的25批香圆的PCA和OPLS-DA分析结果一致,样本群处于不同的空间聚落,可以较好地区分且被明显分成了5组,其中广西样品离散性较大,说明同一产地样品的内部差异性较大;安徽、四川、云南、浙江样品分布较为集中;进一步采用VIP值法进行分析,本实验筛选出VIP值>1的8个化学成分作为不同产地香圆差异性的主要化学标记物。所建立的香圆高分辨谱图方法稳定、可靠,可为其质量控制提供参考依据。

基于ICP-MS技术的六神曲中无机元素分析及其风险评估

对六神曲中无机元素进行分析并结合风险评估,为发酵类中药中有益元素的揭示、有害元素限量标准的制定提供依据。基于电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)技术,对不同来源六神曲中无机元素进行含量测定,结合多元统计分析,对无机元素的特征进行表征,并对其进行初步风险评估。结果表明:六神曲中无机元素整体趋势一致,对比相关标准产六神曲生品发现,Zn、Ba、Cu为主要差异元素;按部颁标准产六神曲生品与麸炒品差异明显,Zn、Tl、Cu为特征差异元素;Cu、Cr、As为按《浙江省中药炮制规范》产六神曲生品与炒焦品中主要差异元素。风险评估结果提示,六神曲中有害元素的风险较低。方法稳定可靠,不同制法、不同炮制品六神曲中元素分布特征呈现出一定的规律性与差异性,其中重金属及有害元素的风险基本可控。研究结果可为六神曲质量控制体系的完善及安全性评价提供参考。

桑白皮中21种无机元素的测定及其质量评价

为准确了解不同产区桑白皮中多种元素分布及含量情况,用65%硝酸溶液对其样品进行微波消解处理,后采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS/MS)法测定桑白皮样品中21种元素的含量。得到21种元素的线性关系良好,R^(2)>0.999,方法学考察实验的RSD均小于3%,加标回收率在91.3%~109%,RSD均小于4%;Al、Ga、Sr、Ba相比而言含量较高,且不同产区的特异性较明显;主成分分析中17批样品得到4个主成分,累计方差贡献率达87.380%,确定V、Co、Al、Li、As、Se、Pb、U、Zn、Cr、Cd、Ga、Ba、Cs、Ni等15种元素为桑白皮药材的特征元素;相关性分析可知,元素间的相关性较强,P≤0.05的元素与主成分分析的特征元素基本一致。参照2020年版《中国药典》中对中药材中有害元素的限量规定,发现桑白皮样品中Pb、Cd、As、Cu有害元素的含量均未超过限量要求。ICP-MS/MS能准确快速测定桑白皮中21种元素含量,这对评价不同产区桑白皮质量,完善桑白皮质量标准具有一定参考价值。

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定六神曲中4种烷基间苯二酚

建立固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定六神曲中5-十五烷基间苯二酚(AR-15)、5-十七烷基间苯二酚(AR-17)、5-十九烷基间苯二酚(AR-19)和5-二十一烷基间苯二酚(AR-21)4种烷基间苯二酚含量.分析采用Brownless Spp C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),流动相:A相为5 mmol/L乙酸铵溶液,B相为甲酸∶乙腈溶液(体积比为1∶1000),采用梯度洗脱方式,体积流速为0.5 mL/min.柱温为35℃,使用电喷雾离子源,负离子扫描,多反应监测模式.结合主成分分析与正交偏最小二乘法判别分析,寻找影响六神曲炮制前后质量的主要化学成分.结果表明,4种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9926),平均加样回收率在99.36%~101.36%之间,相对标准偏差(RSD)为0.85%~2.10%.通过化学模式识别分析发现造成主要差异的质量差异物是AR-21.方法简便可行,稳定可靠,可用于炮制不同六神曲的质量控制.

前胡治疗“痰热壅肺”症的药效物质基础和作用机制的探讨

目的:采用血清药物化学与网络药理学的方法,探究前胡治疗“痰热壅肺”症的药效物质成分及作用机制。方法:将SD雄性大鼠分成空白组和给药组,给药组给予前胡水提物,腹主动脉取血,离心制备血清样品;利用超高效液相色谱-质谱技术对前胡水提物、大鼠空白血清和含药血清进行检测,依据相对保留时间、精确相对分子质量、二级质谱裂解碎片等二级质谱信息对化合物进行鉴定,筛选入血物质组成。基于中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、STITCH、Swiss Target Prediction等数据库,收集前胡入血成分作用靶点,同时参照《中医内科学》中有关“痰热壅肺”的辨证标准,通过SymMap数据库建立症候及其辨证条目靶点数据库。采用Cytoscape软件构建药物-入血成分-靶点网络图和蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,寻找关键靶点,利用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能与KEGG通路富集分析,以阐述其作用机制。结果:从前胡水提物及含药血清中共鉴定出705种次生代谢产物,从中筛选出入血成分15种,其中原型入血组分11种、代谢产物4种;入血成分共涉及464个靶点,以甲状腺素转运蛋白(TTR)、磷脂酰肌醇3-激酶(PIK3A)、酪氨酸激酶受体(KIT)、含缬酪肽蛋白(VCP)、磷酸肌醇3激酶调控亚基1(PIK3R1)、三碘甲状腺原氨酸的核激素受体β(THRB)等为PPI中的核心基因,通过调节Rap 1信号通路、癌症信号通路、PI3K-Akt信号通路和磷脂酶D信号通路等多种通路发挥对“痰热壅肺”症的治疗作用。结论:前胡中的香豆素、黄酮类等入血成分可能是前胡治疗“痰热壅肺”证的药效物质基础,可为其质量控制标准的深入研究提供参考。

当归、党参、黄芪和甘草中农药多组分残留检测技术的研究进展

近年来,中药中农药残留污染问题引起广泛关注。甘肃省是中国中药材的主产区之一,中药材的出口贸易快速增长,但是,近年来农药残留物超标问题阻碍了中药产品进入国际市场,严重影响了中药产业的发展。针对甘肃省大宗道地药材当归、党参、甘草和黄芪,本文综述了2009—2019年农药残留检测方法和国内标准的差距,并提出针对中药中农药多组分残留检测技术的研究方案,以期保证中药质量安全,促进中药产业发展。

HPLC法同时测定杏苏止咳糖浆中5种成分

目的建立HPLC法同时测定杏苏止咳糖浆(苦杏仁、紫苏叶、前胡等)中5种成分的含量。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用CAPCELL PAK C_(18) MG色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相水(含0.05%磷酸)⁃乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长210、237、321 nm。结果苦杏仁苷、甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素、白花前胡乙素在各自范围内线性关系良好(r>0.9900),平均加样回收率95.3%~101.2%,RSD 0.66%~2.57%。结论该方法稳定、准确、可靠,可用于杏苏止咳糖浆的质量控制。

通宣理肺丸HPLC指纹图谱建立及7种成分测定

目的建立通宣理肺丸(紫苏叶、前胡、桔梗等)HPLC指纹图谱,并测定甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、甘草酸、白花前胡甲素含量。方法该药物70%乙醇提取液的分析采用CAPCELL PAK-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相水(含0.1%甲酸)-80%乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长250 nm。结果 31批样品指纹图谱中有39个共有峰,相似度0.16~0.99。7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 7),平均加样回收率93.10%~113.3%,RSD 1.25%~3.86%。结论该方法准确可靠,重复性好,可用于通宣理肺丸的质量控制。

基于HPLC-Q-TOF-MS/MS技术的藏药熏倒牛化学成分分析

目的:利用高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS)在负离子模式下对藏药熏倒牛中的化学成分进行分析和鉴定。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C_(18)柱(3.0 mm×150 mm,1.8μm);以0.1%甲酸的乙腈(A)和0.1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱;流速为0.250 mL·min^(-1);进样体积:2μL;柱温为35℃;以电喷雾(ESI)离子源,负离子模式下采集数据,通过分析质谱数据和元素组成,结合文献数据对照,分析推测所含化合物。结果:通过分子离子峰和二级高分辨质谱数据结合文献数据鉴定了熏倒牛全草中的25个化合物,包括1个脂环族有机酸类、2个香豆素类、2个多酚类、1个蒽醌类及19个黄酮类化合物。结论:UPLC-Q-TOF-MS/MS技术为鉴别藏药熏倒牛药材中的化学成分提供快捷、准确的方法,其主要化学成分为黄酮醇类、异黄酮类、蒽醌类,并从该植物中首次鉴定出了14个黄酮类成分,可为熏倒牛药材的药效物质基础研究和质量控制提供参考。

柱前衍生化HPLC法测定藏药熏倒牛种子中15种氨基酸含量

目的:建立柱前衍生化HPLC法测定藏药熏倒牛种子中15种氨基酸的含量。方法:供试品在一定量6 moL·L^(-1)盐酸中110℃水解6 h,与异硫氰酸苯酯进行衍生化反应。采用CAPCELL PAK-C18(250 mm×46 mm,5μm)色谱柱,以80%乙腈溶液(A)-0056 moL·L^(-1)乙酸钠缓冲液(B)为流动相,梯度洗脱(0~15 min,5%A;15~20 min,5%A→20%A;20~35 min,20%A→36%A;35~45 min,36%A→70%A;45~50 min,70%→90%A;50~55 min,90%A;55~56 min,90%A→5%A;56~60 min,5%A),流速为10 mL·min^(-1),检测波长254 nm,色谱柱温度40℃。结果:15种氨基酸衍生物能够达到基线分离,在096~5856μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,r≥09991,精密度、重复性、稳定性试验的RSD值分别小于273%、285%、289%,加样回收率介于952%~1044%之间,RSD值均小于246%。经测定,3批熏倒牛种子中氨基酸总含量分别为164%、155%和108%。结论:此法简便易行,可用于藏药熏倒牛种子中15种氨基酸的含量测定。

窄叶鲜卑花与叶表皮组织构造相关的脂肪类成分分析

对窄叶鲜卑花与其叶表皮组织构造相关的脂肪类成分进行分析。在扫描电镜及光学显微镜下观察窄叶鲜卑花叶表皮组织构造;利用气相色谱-质谱联用仪对窄叶鲜卑花叶表面角质中的脂肪类成分进样分析。窄叶鲜卑花叶表皮细胞、气孔及角质等形态特征与其不饱和脂肪类成分的含量变化均表明该植物具备适应高海拔,高寒环境的特性。生长环境对窄叶鲜卑花叶表皮微形态及不饱和脂肪类成分的含量产生影响,这一发现为窄叶鲜卑花的鉴定及分类学研究提供一定的参考价值,也为合理开发这一藏药资源提供科学依据。

UPLC-MS/MS法同时测定桑白皮中11种成分的含量

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定桑白皮中绿原酸、桑皮苷A、二氢桑色素、氧化白藜芦醇、槲皮素、山柰酚、桑呋喃G、桑黄酮G、桑根酮C、桑根酮D、桑辛素的含量。方法分析采用Brownlee SPP C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm);流动相乙腈(含0.1%甲酸)-5 mmol/L乙酸铵,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。结果11种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)>0.9950),平均加样回收率94.53%~103.58%,RSD 2.51%~6.92%。18批药材中均未检测到山柰酚,氧化白藜芦醇、槲皮素、桑呋喃G、桑黄酮G、桑辛素主要存在于外粗皮中,不同产地药材中桑皮苷A含量存在明显差异。结论该方法稳定、快速、灵敏,可用于桑白皮质量控制。

UPLC-MS/MS法同时测定药用及观赏芍药中15个成分

目的:建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定芍药中15个成分含量。方法:采用Waters UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈(A)-5 mmol·L^(-1)乙酸铵+0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~1.0 min,10%A→15%A;1.0~6.0 min,15%A→30%A;6.0~10.0 min,30%A→90%A;10.0~12.0 min,90%A→10%A),流速0.30 mL·min^(-1),电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式下扫描,采用多重反应监测模式(MRM)。结果:15个成分在考察的浓度范围内呈良好的线性关系(r>0.995),检测下限范围为0.03908~25.45 mg·kg^(-1),定量下限范围为0.1303~84.83 mg·kg^(-1),回收率为90.6%~96.0%,RSD为2.7%~5.4%。结论:所建立方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,重复性、回收率良好,可用于芍药中多个成分的含量测定。