生物制品中支原体快速检测方法的建立

目的建立生物制品中污染原体的快速、准确的检测方法 ;方法通过比较目前国内支原体测方案 ,利用正交试验设计选择最优化培养和检测条件 ;结果更新了支原体培养基中某些成份 ,确定了各组份的含量 ,检测的灵敏度比现行规程方法有所提高。结论新确立的牛心消化液液体培养基方法能够快速检测绝大多数的支原体 ,改午后培养基灵敏度高 ,检测周期短 ,可以用于生物制品中支原体的快速检测。

生物制品分装过程中高效蓄冷剂保温效果验证

为了满足活疫苗及其他对温度敏感的制品在分装过程中半成品2～8℃放置的要求,按照2010年版《药典》三部中生物制品分装和冻干要求,以高效蓄冷剂保温半成品容器,以分装规格为0.5ml/瓶,分装量125ml/分钟的速度进行注射用水的分装,每间隔一定时间进行注射用水的温度检测,验证结果确认了该方法能满足分装生产的要求,同时为对有温度要求的分装生产提供了一套新的验证方法。

生物制品类厂房无菌条件的获得

要保持生物制品厂房无菌要求,是通过除菌和灭菌的不同方法获得。在进行对比分析后,得出臭氧熏蒸消毒灭菌法为最有效和简单易行的灭菌方法,是生物制品厂房无菌条件获得的最佳方法之一。

浅议工程造价的管理——以生物制品厂房建设为例

造价管理贯穿整个项目实施的各个阶段,工程前期阶段管理结果对整个工程造价影响约占75%,在生物制品厂房建设过程中更因注意GMP规范的变化趋势,对项目全生命周期内造价有着重大影响。因此坚持动态管理,充分利用和认真分析建设周期中的重要信息,是可以提高全生命周期建设资金的投资效益。

生物制品洁净厂房建筑设计与GMP

GMP对药品生产的要求,相应的对生物制品厂房的建筑设计提出了新的要求,本文从生物制品洁净厂房的总图设计和平面设计两个方面阐述了建筑设计中应考虑的主要问题,结合实例说明了建筑设计如何体现GMP的要求。

浅谈生物制品企业GMP实施质量

GMP是生物制品生产和质量管理的基本原则 ,生物制品企业都应把实施质量放在首位 ,确保生物制品生产万无一失。

灭菌器在生物制品GMP中的验证

验证检查是灭菌器中最重要的环节,没有验证的设备是无法保证产品质量的,所以,必须认真、准确的做好验证工作。

生物制品厂房具体实施GMP探论

本文从生物制品厂房的特点、重要性、设计现状出发 ,按照GMP原则性 ,针对本行业的具体特点 。

简论气蚀对生物制品的影响

气蚀就是在液体中由于动力作用而形成的空穴。空穴的形成及其随后的破裂而产生的高频率、高冲击力的液击 ,对材料及制品的破坏作用就称为气蚀。气蚀现象产生的破坏性将直接影响到生物制品的质量。

酪酸梭菌与婴儿双歧杆菌对艰难梭菌体外生物拮抗作用的研究

用酪酸梭菌 (Clostridium butyricum )和婴儿双歧杆菌 (Bifidobacterium infantis)单独或联合对艰难梭菌 (Clostridium difficile)进行试管内的生物拮抗作用。将酪酸梭菌、婴儿双歧杆菌单独或酪酸梭菌和婴儿双歧杆菌联合分别与艰难梭菌以一定的比例等量混合后 ,接种于 GAM液体培养基中进行厌氧培养。实验证明酪酸梭菌和婴儿双歧杆菌能明显抑制艰难梭菌的生长 。

海藻糖对冻干胸腺肽生物活性保护作用的研究

将胸腺肽原液与不同浓度的海藻糖 (Trehalose)同时冻干后分别在 4 ,2 2和 37℃下保存 0～ 2 4个月 ,并于不同时间进行 E-玫瑰花环结合率实验检测其稳定性 ,结果显示海藻糖对胸腺肽活性具有明显的保护作用 ,随着海藻糖浓度升高 (5 %～ 15 %) ,其保护性能逐渐加强 .15 %海藻糖在实验组中对胸腺肽活性保护性最强 .在各保存温度尤其在低温条件下 (2～ 8℃ ) ,海藻糖可极显著增强胸腺肽活性 ,延长有效活性保存时间 .

酪酸梭菌与双歧杆菌对肠道致病菌的体外生物拮抗作用

目的 :探讨酪酸梭菌和婴儿型双歧杆菌对某些肠道致病菌的拮抗作用。方法 :将酪酸梭菌和婴儿型双歧杆菌单株菌及两株菌混合后分别与几株肠道致病菌混合接种于 GAM液体培养基中进行厌氧培养 ,通过平板菌落计数法计算肠道致病菌的菌数。结果 :经混合培养后肠道致病菌的菌数明显下降。结论 :酪酸梭菌 L CL16 6株和婴儿型双歧杆菌 L CL172株在体外能明显抑制几株肠道致病菌的生长繁殖。

重组人睫状神经营养因子突变体的构建、表达及生物活性分析

目的:通过对原始CNTF的突变改造,降低表达蛋白的免疫原性,同时增加其稳定性,以期能用于临床治疗肥胖症。方法:以原始CNTF为模板,去掉N端的12个氨基酸、C端的14个氨基酸,并将C端末2个氨基酸点突变为极性较强的赖氨酸,在大肠杆菌中表达,获得CNTF-T突变体。结果:基因序列分析与原设计吻合,目的蛋白表达量占全菌体的35%左右,表达蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性、DEAE-FF纯化,纯度可达95%以上,小鼠体内生物活性测定,能明显抑制小鼠体重增长,且CNTF-T的生物活性比原始序列CNTF的活性高。结论:突变的CNTF-T有望成为新一代的生物减肥制剂应用于临床。

单克隆抗体在中草药研究中的应用前景

单克隆抗体技术作为一项成熟的生物学技术,在医学和生物学领域应用普遍,但在中草药研究领域中的应用国内鲜有报道。对单克隆抗体应用于中草药研究的可行性进行分析认为,中草药中的许多有效成分都可以通过杂交瘤技术得到其单克隆抗体。利用免疫学技术,单克隆抗体以其灵敏、精确、迅速和简便等特点,可用于药物原材料的分析、中草药有效成分的纯化以及药物分析方法的建立等诸多方面,可望在中药研究和加速中药现代化的进程中起重要的作用。

藏药甘青乌头生物碱抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用

目的探讨藏药甘青乌头脂溶性生物碱（ALA）和水溶性生物碱（AWA）抗单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的作用和机制。方法四甲基偶氮唑蓝法测定细胞毒性,细胞病变作用法和蚀斑法测定甘青乌头生物碱体外抗HSV-2活性,以半数有效浓度和治疗指数为评价指标;荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和蚀斑法考察ALA和AWA体外抗HSV-2作用机制。用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对AWA体内抗HSV-2的活性进行评价。结果 ALA和AWA对Vero细胞的半数中毒浓度分别为3.57和7.87mg/mL。ALA和AWA半数有效质量浓度分别为4.99和2.81 mg/mL,治疗指数分别为0.72和2.80。ALA和AWA均能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性。ALA对吸附到非洲绿猴肾细胞的HSV-2没有抑制作用,能微弱抑制HSV-2大分子的增殖,对HSV-2 DNA的复制没有作用。AWA能够抑制HSV-2吸附,抑制HSV-2大分子的增殖,抑制HSV-2 DNA的合成,抑制倍数达10~2。AWA对小鼠的半数中毒质量浓度为0.28mg/kg。AWA延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率。结论 AWA抗HSV-2的活性大于ALA,ALA主要通过直接灭活HSV-2,AWA通过抑制HSV-2复制循环的各个环节起作用。

17β-雌二醇诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中信号转导的初步研究

研究了 17β -雌二醇 ( 17β - E2 )诱导的小鼠细胞凋亡与第二信使分子 Ca2 +/Ca M的关系 .17β - E2 能诱导胸腺细胞凋亡 ,用 EGTA螯合胞外 Ca2 +时 ,17β - E2 所诱导的细胞凋亡则受到抑制 ;17β- E2 能导致胸腺细胞内游离 Ca2 +的浓度迅速而持久地升高 ;相对正常对照组而言 ,17β- E2处理组胞内 Ca M含量显著下降 .结果表明 :17β - E2 诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中 ,可能是通过Ca2 +/Ca M这个信号转导途径发挥作用 .

绿脓杆菌外毒素A与Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白嵌合表达质粒的构建及其免疫原性的研究

构建外毒素结构域Ia基(EPA103)与Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白(HSV-2-gD)嵌合蛋白表达载体(pET-EgD),得到嵌合表达蛋白.利用外毒素结构域Ia基因表达蛋白的佐剂效应,以pET-EgD表达嵌合蛋白免疫Balb/c小鼠.结果显示:嵌合表达蛋白(pET-EgD)免疫小鼠,可在小鼠体内诱导产生抗HSV-2特异性抗体.嵌合表达蛋白(pET-EgD)具有较强的免疫原性,为开发研究Ⅱ型单纯疱疹核酸疫苗奠定了基础.

幽门螺杆菌空泡毒素及其单克隆抗体的研究进展

人幽门螺杆菌（H.pylori）是慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因，并与胃癌的发生密切相关。幽门螺杆菌的致病机理与其致病性和宿主免疫应答有关，尤以幽门螺杆菌的毒性占主导地位。最新研究表明，约60%的幽门螺杆菌分离株具有分泌空泡毒素（VacA）的能力，并且血清中其相应抗体的出现与消化性溃疡的发生高度平行。综述了VacA的制备和纯化，理化特性，蛋白质结构，编码基因，致病机理及其单克隆抗体等方面的研究进展。

安瓿包装的液体制品密封完整性检查

目的:研究安瓿包装的液体制品密封性检查方法。方法:对液体安瓿制品和已有标准孔径的破裂制品在选择合适的检漏程序后进行负压、注色水、正压、清洗及排水工艺后,对检漏前、后的液体制品进行目检和质量检定,分析检漏程序前、后制品的质量指标,同时,观察有标准孔径的破裂制品状况。结果:有色水进入安瓿的为破裂制品,经过检漏程序后制品未发生改变,符合质量标准。最小标准孔径￠0.1mm的破裂制品有色水进入。结论:对于安瓿包装的液体制品采取负压、正压检漏法能解决安瓿包装液体的密封完整性检查,对产品质量无影响。进一步验证了现有技术能制作￠0.1mm破裂标准孔径的制品,利用该方法可以被有效的检查其密封性。

粘膜免疫戊型肝炎试验性疫苗的研究

采用原核表达的戊型肝炎病毒结构区基因(HEVORF2)编码蛋白,与新型人用疫苗佐剂类MF59配制成试验性疫苗,通过粘膜免疫途径免疫实验小鼠,研究其产生粘膜免疫和体液免疫的效果。结果表明,通过滴鼻和灌胃两种粘膜免疫途径免疫BALB/c小鼠,均能诱导小鼠产生针对HEVORF2试验性疫苗的血清IgG和IgA,血清IgG的抗体滴度为1∶800～1∶1600,血清IgA抗体滴度为1∶100～1∶200。对免疫小鼠血清中IgG的动态观察表明,血清抗体可持续存在至少6个月以上。比较类MF59佐剂和传统铝盐佐剂经注射免疫所诱导产生的血清IgG抗体滴度,发现类MF59佐剂可有效增强HEVORF2重组蛋白的免疫原性4倍左右。类MF59佐剂可诱导粘膜免疫反应,在肠道粘膜部位产生SIgA,滴度为1∶100。这些结果为新型戊型肝炎病毒基因工程重组疫苗的研制提供了一条新的思路。