Ⅰ型胶原水凝胶的物质通透性评价

目的为评价Ⅰ型胶原蛋白水凝胶的物质通透性,建立体外物质通透性评价实验方法。方法以BSA-FITC为指示物,组合PBS作为通透介质,借助转移小室(Transwell)建立体外物质通透性评价实验方法。结果本研究建立的BSA-FITC定量检测方法在100μg·mL^(-1)~0.781μg·mL^(-1)的浓度范围内,其标准曲线的R2大于0.99,其定量下限(LLOQ)为3.125μg·mL^(-1);RSD<5%;回收率在80%～120%范围内。结论本研究建立了水凝胶类样品的物质通透性体外评价方法。利用该方法评价I型胶原蛋白水凝胶物质在28小时后其BSA-FITC通透率为100%。

丹参注射液体外对原代人软骨细胞的生物效应实验研究

目的:通过对丹参注射液对体外培养的原代人软骨细胞的生物效应分析,探讨其治疗骨关节炎的作用机理。方法:以丹参注射液丹参生药(1.5 mg·mL^(-1))作为计算药物浓度。药物分组:对照组、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg·mL^(-1)。用MTT法评价原代人关节软骨细胞(第3代)增殖活性;用定量PCR法测定细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达量,评价软骨细胞的分化;用酶联免疫方法检测细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的含量;用糖胺多糖试剂盒法检测细胞总糖胺多糖的含量,评价软骨细胞的功能蛋白水平。结果:MTT实验结果显示,各浓度丹参注射液组的细胞相对活性均低于对照组,且降低趋势有量-效关系,提示丹参注射液对原代人关节软骨细胞有生长抑制效应。定量PCR结果显示,各浓度组细胞Ⅰ型胶原mRNA表达量均低于对照组,且有一定的量-效关系。Ⅰ型胶原蛋白检测结果显示,低剂量(≤2.0 mg·mL^(-1))组可显著抑制Ⅰ型胶原表达。结果提示低剂量的丹参注射液可能对原代人关节软骨细胞的脱分化有一定的抑制作用。同时,低剂量丹参注射液(≤4.0 mg·mL^(-1))能促进糖胺多糖的含量增加,提示低剂量丹参注射液有促进软骨形成的生物效应。结论:低剂量的丹参注射液可轻微抑制人第3代关节软骨细胞的增殖,抑制Ⅰ型胶原(脱分化指标)的形成和促进糖胺多糖的合成,提示其具有促进软骨形成的生物效应。

旋转式免疫磁珠细胞分离仪的研制

提出了一种新型免疫磁珠细胞分离方法,通过让装有细胞与磁珠悬浊液的试管在环形磁铁中旋转的方式,使磁珠在离心力的作用下向管壁的方向运动,由于越靠近环形磁铁管壁的地方磁场强度越高,磁珠就越容易被吸附.通过对比,旋转分离方法具有更高的分离效率.与此同时,基于该分离方法研制了一款细胞分离仪,将取枪头、脱枪头、移液、旋转试管等操作自动化,更方便临床使用.