贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体的构建

为了构建凤冈野生天麻的抗真菌肽基因(gaf)的表达载体,经BamHI和HindIII酶切的pMD18-T-gaf和pET32a(+)质粒的纯化回收产物并进行连接,连接产物pET32a(+)-gaf转化大肠杆菌感受态细胞DH5α后,采用菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析。结果表明:构建的凤冈野生天麻抗真菌肽基因表达载体通过菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析,目的片段成功插入载体,目的片段与预期的gaf基因大小(545 bp)相符。试验成功构建了贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体,pET32a(+)-gaf可以用来制备抗真菌蛋白。

蛔虫抗原基因ALAg克隆及序列分析

为了确定蛔虫基因工程疫苗的候选基因,试验以蛔虫幼虫的RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增出ALAg基因,扩增产物克隆到pMD18-T载体,筛选阳性克隆测序并进行Blast分析。结果表明:该基因与GenBank公布的猪蛔虫As37抗原基因(AB078971)的同源性为95%,与西式贝蛔虫Ag3抗原基因(EU927450)的同源性为92%。说明ALAg基因是线虫特有的抗原基因。

蛔虫抗原基因ALAg表达载体的构建及其重组蛋白诱导小鼠的免疫保护研究

目的确定蛔虫基因工程疫苗候选基因。方法连接经BamHI和EcoRI酶切的pMD18-T-ALAg和pET-28a(+)质粒的纯化回收产物,将连接产物pET-28a(+)-ALAg表达载体转化表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达,并纯化重组蛋白(rALAg)。30只小鼠分成免疫组、佐剂组和对照组,每组10只,各组分别接种重组蛋白与弗氏完全佐剂(FCA)混合物、FCA以及磷酸盐缓冲液(PBS)后,采用蛔虫感染性虫卵进行攻击(3600个/只),观察各组小鼠体内虫体数,并采用间接ELISA法检测小鼠血清中抗体IgG。结果 rALAg能被兔抗蛔虫阳性血清所识别。免疫组小鼠的肝脏和肺脏中的蛔虫幼虫数量(25.30±4.55)比对照组(57.60±5.76)减少了69.26%,与对照组和佐剂组比较差异有统计学意义(P<0.01);免疫组IgG抗体水平检测血清吸光度值A45(00.858±0.003)与对照组(0.149±0.004)、佐剂组比较(0.134±0.004)差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ALAg基因可作为蛔虫基因工程疫苗的候选基因。

科学实验材料使用中的不良现象

科学课是实践性很强的课程，它由一个个活动组成的，老师需要带领和指导学生进行大量的观察实验、动手操作等活动进行科学探究。如果观察探究不够充分，那就是有形无实。要探究就得有材料，如果没有材料进行活动，那可谓是纸上谈兵。因此材料的准备成为一节科学课的必备条件。但是在实践教学中，笔者发现准备和使用材料的过程中存在一些不良现象，希望能够引起科学教师及有关实验室管理员的深思。

实验课要让学生的手“挥舞”起来

我们都知道，科学课程的学习要以探究为核心。科学教材中安排了很多活动，其中就有不少科学探究实验。科学课就是要让学生通过参加这一系列的活动来提高学生的观察能力、思维能力、实践能力和创新精神。所以，实验教学是小学科学教学的一个重要环节，通过科学实验可以培养学生学科学、用科学的本领，提高学生的动手操作能力。在科学课上可以做很多有趣的实验可以参加一个个的探究活动，所以近几年来学生越来越喜欢上科学课了。