传统酸马奶优势菌群互作及与风味物质的关联性

为研究酸马奶的优势菌群的互作以及菌群与特征风味的关系,对传统酸马奶中分离得到的4株乳酸菌和2株酵母菌进行单菌和混菌发酵,测定14组发酵组酸度,pH值,乳酸菌、酵母菌菌量变化,采用HS-SPME-GC-MS技术分析不同发酵组的挥发性风味物质的差异,并利用Lotka-Volterra模型和偏最小二乘法回归(PLSR)分析酸马奶中乳酸菌和酵母菌的相互作用系数以及优势菌群与特征风味物质形成的关联性。乳酸菌中干酪乳杆菌产酸速率最快,在发酵后期pH值达到3.89;酵母菌中,马克斯克鲁维酵母在发酵后期pH值降至4.16,混菌发酵组的产酸优于单菌发酵组。乳酸菌和单孢酿酒酵母混菌发酵促进单孢酿酒酵母的生长,其中植物乳杆菌、副干酪乳杆菌分别与单孢酿酒酵母混合发酵72 h后,酵母菌菌落数达到1.91×106CFU/mL和1.66×106CFU/mL;并能够促进辛酸、正癸酸等酸类风味物质的产生。而乳酸菌和马克斯克鲁维酵母混菌发酵形成竞争抑制,两者共发酵体系下对酯类物质辛酸乙酯、癸酸乙酯的产生有抑制作用,马克斯克鲁维酵母对产酸速率较快的干酪乳杆菌和副干酪乳杆菌的抑制作用强于瑞士乳杆菌和植物乳杆菌。

不同丛枝菌根真菌促进资阳香橙幼苗生长研究

【目的】筛选促进柑橘砧木资阳香橙盆栽幼苗生长的丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF),为柑橘菌根种苗应用提供参考,也为利用菌根柑橘种苗抑制柑橘黄龙病探索新途径。【方法】采用盆栽试验,利用资阳香橙幼苗接种从广西土壤分离纯化获得的15株AMF菌株,研究不同AMF对根系的侵染及对植株的促生效应。【结果】15株AMF均能与资阳香橙根系形成共生关系。其中,黄雷德克囊霉1(Redeckera fulvum 1)对植株根系的侵染率最高,达到81.27%;脆无梗囊霉(Acaulospora delicata)的侵染率最低,为8.57%;15株菌株的平均侵染率为50.97%。幼套近明球囊霉(Claroideoglomus etunicatum)和摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)可促进资阳香橙的生长,其株高、茎粗、叶片数和叶绿素SPAD值均显著高于对照(P<0.05)。【结论】幼套近明球囊霉和摩西斗管囊霉是促进资阳香橙生长的优势菌株。

无细胞蛋白质合成系统的研究进展

无细胞蛋白质合成系统是一种以外源mRNA或DNA为模板 ,通过在细胞抽提物的酶系中补充底物和能源物质来合成蛋白质的体外系统 .与传统的体内重组表达系统相比 ,体外无细胞合成系统具有多种优点 ,如可表达对细胞有毒害作用或含有非天然氨基酸 (如D 氨基酸 )的特殊蛋白质 ,能够直接以PCR产物作为模板同时平行合成多种蛋白质 ,开展高通量药物筛选和蛋白质组学的研究等 .本文综述了无细胞蛋白质合成系统的发展历史、系统中合成蛋白质所需的能量供应、遗传模板的稳定性和微型无细胞生物反应器等多方面的研究 ,并探讨了无细胞蛋白质合成系统中存在的难点。

丛枝菌根真菌与胡萝卜毛状根双重培养体系研究

以发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)K599诱导胡萝卜产生毛状根,接种丛枝菌根(AM)真菌摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)建立双重培养体系,研究不同消毒方法、超声波、低温预处理和培养基pH对摩西斗管囊霉孢子萌发的影响及其与胡萝卜毛状根建立双重培养体系的最佳条件。研究结果表明:消毒方法3孢子萌发率最高,孢子污染率最低,15 d孢子萌发率达48.88%,而污染率仅为9.98%;超声波处理能降低孢子污染率11.17%~14.53%;低温预处理可有效提高孢子的萌发率,4℃低温处理10 d和15 d效果较好,其萌发率分别为70%和65%;AM真菌孢子在水琼脂培养基萌发最佳pH为6.5,萌发率达到48.50%,pH<5.5或pH>8.0均抑制孢子萌发,pH 5.5和pH 8.0的萌发率分别为15.43%和16.06%。消毒孢子先于水琼脂萌发后,再挑取萌发管多,菌丝较长的孢子并将菌丝生长方向正对毛状根方向进行转接,可以提高双重培养的成功率。MSR培养基为双重培养的最优培养基。胡萝卜毛状根与AM真菌双重培养可为菌根真菌繁殖及相关分子机理研究提供可行有效的途径。

水产品生物活性肽的研究进展

水产品种类繁多,所含氨基酸比例与人体氨基酸组成接近。与陆生动植物蛋白来源的生物活性肽相比,水产品生物活性肽具有自身优势,这引起了研究人员的广泛关注,成为近年来食品领域的研究热点。该文概括了水产品生物活性肽的基本概念、研究现状,制备方法及构效关系,并以鱼类、贝类、甲壳类动物为例,综合阐述了水产品抗氧化肽、降血压肽、抗菌肽等生物活性肽的研究进展。最后,对水产品生物活性肽当前发展中的共性问题进行了总结与展望,为水产品生物活性肽进一步开发利用提供参考。

大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统的初步研究

在近几年来被广泛研究和应用的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中,大肠杆菌抽提物的制备、底物浓度的配比以及能量再生体系的选择是最关键的几个因素.以绿色荧光蛋白(GFP)为报导基因,以缺失核酸酶I基因的大肠杆菌A19为实验菌株,通过对大肠杆菌无细胞抽提物制备过程中菌体收集时间、细胞破碎压力、后处理条件等参数的摸索和确定、无细胞蛋白质合成系统中底物浓度配比的正交实验优化以及系统中能量再生体系的比较和选择,制备得到了GFP表达量为154μg/mL的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统,与优化前相比产量提高了29倍.

牛膝蜕皮甾酮的加速溶剂提取法研究

目的采用加速溶剂提取法提取牛膝中的蜕皮甾酮,探讨其在中药质量控制中应用的可行性.方法以蜕皮甾酮为指标成分,采用RP-HPLC为检测方法,单因素考察法对影响加速溶剂提取牛膝中的蜕皮甾酮的因素进行考察.结果优选出了牛膝中蜕皮甾酮加速溶剂提取的最佳条件:以无水甲醇为溶剂,药材的粒径为0.3～0.45mm,提取温度为100℃,提取压力10.34 MPa,提取时间6 min,提取1次.结论加速溶剂提取技术能够快速高效地提取牛膝中的蜕皮甾酮.

针叶樱桃浓缩物及其配伍组合物的抗炎作用研究

目的研究针叶樱桃浓缩物及其各组合物的抗炎作用。方法雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药对照组、针叶樱桃浓缩物低、中、高剂量组,经二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验,研究不同剂量针叶樱桃浓缩物的抗炎作用,并选择具有抗炎效果剂量的针叶樱桃浓缩物,分别与接骨木莓+野樱莓、接骨木莓+葡萄糖酸锌配伍,考察其抗炎作用。结果与模型组相比,针叶樱桃浓缩物各剂量组小鼠耳廓肿胀度均显著降低,并呈剂量依赖性,低剂量组与中、高剂量组比较差异有统计学意义,血清中IL-1β含量显著降低;针叶樱桃浓缩物各剂量组均能有效抑制小鼠腹腔毛细血管通透性增高。选择针叶樱桃浓缩物低剂量组配伍制成2种组合物,对比模型组,组合物小鼠耳廓肿胀度、血清中IL-1β含量均显著降低,小鼠腹腔毛细血管通透性增高均得到显著抑制;组合物小鼠耳廓肿胀度较针叶樱桃浓缩物低剂量组显著降低。结论针叶樱桃浓缩物具有良好的抗炎作用;配伍接骨木莓与野樱莓或葡萄糖酸锌具有协同增效作用,其机制可能与抑制炎症因子的释放有关。

佐剂性关节炎大鼠模型的实验研究

目的 :改进大鼠佐剂性关节炎 ( AA)模型制作的实验设计 ,提高造模成功率。方法 :选择影响造模成功率较大的因素 ,如弗氏完全佐剂 ( FCA)中的卡介苗 ( BCG)浓度、FCA注射量、FCA体内注射部位作为研究对象。结果 :不同 BCG浓度下的最高成功率为 78.5 % ;不同注射量最高成功率为 71.9% ;不同注射部位最高成功率为 70 .0 %。结论 :用含 2 0mg/ ml BCG浓度的 FCA 0 .1ml注射量 ,后肢足跖皮内注射能明显提高 AA大鼠造模的成功率。较以前文献报道的含 10mg/ ml BCG浓度的 FCA 0 .0 5 ml注射量 ,背部多点注射法等有较大的改进。

Survivin的表达和功能研究

利用RTPCR方法确认了Survivin基因在4周胎肝、胎脾、胎肾cDNA文库中,乳腺癌、胃癌、结肠癌组织中的表达,而在正常的肝组织中未见表达;利用分子克隆方法构建了重组表达质粒pBV220Survivin,并在DH5a菌株中成功表达了具有生物学活性的Survivin蛋白,体外检测到该重组蛋白与RhSmac具有良好的结合活性;经脂质体转染重组Survivin蛋白的L929细胞与对照相比具有更好的存活率。

瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠的作用研究

目的观察主流降脂药瑞舒伐他汀对载脂蛋白E(ApoE-/-)基因敲除动脉粥样硬化小鼠血管壁保护及斑块的稳定作用,探讨干预高脂血症、动脉粥样硬化,防治心血管疾病的可能机制。方法20只ApoE-/-小鼠随机分为模型组和瑞舒伐他汀组,每组各10只,另10只C57BL/6/J小鼠设为正常组。模型组和瑞舒伐他汀组小鼠于6周起西方膳食饲料饲养至20周龄,瑞舒伐他汀组自16周龄起每日予以瑞舒伐他汀(10 mg/kg)灌胃,并同时对正常组及模型组每日给予饮水灌胃,观察至20周龄取材。采用生化方法检测各组小鼠血脂及炎症指标变化,采用苏丹Ⅳ染色法以及Image J检测小鼠主动脉斑块沉积情况,通过小动物主动脉超声测得小鼠中膜厚度等结果,使用Von Kossa染色法检测主动脉弓钙化程度。结果与正常组比较,模型组小鼠的血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,瑞舒伐他汀组小鼠的血清TG水平下降,差异有统计学意义(P<0.01)。瑞舒伐他汀组小鼠的血清LDL、TC水平与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,模型组小鼠血清的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。瑞舒伐他汀组小鼠的血清TNF-α、ICAM-1、MCP-1水平与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组小鼠的主动脉斑块沉积面积平均值达39.66%,瑞舒伐他汀组小鼠的主动脉斑块沉积面积平均值达25.87%;瑞舒伐他汀组与模型组小鼠的主动脉斑块沉积面积比较,差异有统计学意义(P<0.01)。主动脉超声结果显示,各组小鼠的主动脉中膜厚度比较,差异无统计学意义(F=0.8965,P=0.4302)。与模型组比较,瑞舒伐他汀组的斑块易损指数降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,瑞舒伐他汀组的血管钙化面积降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论瑞舒伐他汀对ApoE-/-基因敲除动脉粥样硬化小鼠可改善其斑块易损性和血管钙化程度,并具有抗动脉粥样硬化斑块沉积作用。

综合放血法所致血虚证小鼠模型的比较研究

目的通过比较不同造模参数的综合放血方法,确定血虚模型的最优造模参数,为该方法的可重复标准化提供数据支持。方法将100只ICR小鼠随机分为5组:正常对照组(n=20)、模型组A(每日游泳15 min+隔日放血0.3 ml,n=20)、模型组B(每日游泳10 min+隔日放血0.3 ml,n=20),模型组C(每日游泳15 min+隔日放血0.5 ml,n=20)以及模型组D(每日游泳10 min+隔日放血0.5 ml,n=20),造模9 d后取胸腺、脾脏以及血液,测定5组小鼠的体重、免疫器官指数、死亡率、血常规指标、血清免疫因子白细胞介素-6(IL-6)水平及红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性。结果模型组A、B、C、D小鼠造模9 d后的体重、免疫器官指数、血常规指标(红细胞、白细胞、血红蛋白和血小板)、血清IL-6水平和红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性均低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组B小鼠造模9 d后的死亡率低于模型组A、C和D,差异有统计学意义(P<0.05)。结论每日游泳10 min+隔日放血0.3 ml为较优的中医血虚证候模型的造模参数。

基于功能磁性材料和固相微萃取净化富集一体化的茶饮料中三唑类农药残留分析

构建了固相微萃取(SPME)富集与功能磁性材料净化相结合的一体化协同提取技术,并应用于茶饮料中三唑类杀菌剂的残留分析。以磁性材料四氧化三铁-N-丙基乙二胺(Fe3O4-PSA)为净化吸附剂,采用SPME萃取针富集样品溶液中的目标农药后直接进气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)进样口解吸附、分析,无需其他样品转移等操作,方法简便、灵敏。本研究系统优化了SPME条件(如萃取时间、萃取温度、氯化钠用量及pH值),并采用正交试验设计,探明了磁性材料用量与SPME条件的交互影响,以确定最佳试验条件。对优化的分析方法进行方法确证,结果表明:在0.002~0.2 mg/L范围内,19种三唑类农药在茶饮料中均表现出很好的线性关系,相关系数(r)均大于0.99,检出限(LOD)在0.00012~0.0089 mg/L之间,定量限(LOQ)均为0.002 mg/L。采用基质匹配标准溶液校正时,回收率在71%~98%之间,RSD不高于16%(n=3)。此方法较常规法简单、操作便捷、可靠,且环境友好,适用于茶饮料中三唑类农药残留的分析。

5种染色剂对枳砧纽荷尔脐橙根系AM真菌染色效果比较

以广西富川栽培的枳砧纽荷尔脐橙健康植株的根系为试验材料,探讨5种染色剂(苏丹红Ⅳ、酸性品红、苯胺蓝、台酚蓝和Quink牌纯黑墨水)对根系AM真菌染色效果的影响。结果表明,Quink牌纯黑墨水的染色效果最佳,根系AM真菌的菌丝、泡囊、丛枝等结构清晰可见,且不易褪色、操作简单、安全无毒,适用于根系AM真菌的染色和制片观察。研究也显示AM真菌在广西富川的枳砧纽荷尔脐橙根系上普遍存在。

复配酶法制备南极磷虾鲜味酶解液的工艺优化

以脱脂南极磷虾粉为原料,采用复配酶法制备鲜味酶解液。以感官评价、多肽得率、水解度等评价手段,进行外源酶的筛选及单因素实验。为进一步优化酶解液滋味,以呈鲜味的氨基酸总量为指标进行酶解工艺优化。结果表明:最佳酶解条件为:胰蛋白酶和胃蛋白酶复配比1:100,总加酶量为2800 U/g,料液比1:4 g·mL^(-1),酶解pH7.0,酶解温度40℃,酶解时间3 h,该条件下获得的酶解产物中鲜味游离氨基酸含量为331.79 mg/100 mL。除色氨酸外,其余八种必需氨基酸含量占总氨基酸的63.66%,游离苦味氨基酸占总氨基酸的27.83%,游离鲜甜味氨基酸占总氨基酸26.22%,与鲜味形成具有关键作用的游离谷氨酸和游离天冬氨酸共占总游离氨基酸的10.26%。本研究可为南极磷虾鲜味调味料等产品的开发提供理论基础和技术指导。

长春花接种丛枝菌根真菌对柑橘黄龙病菌的抑制效果

通过筛选获得具有显著促生和抗病能力的AM真菌菌株,为防治柑橘黄龙病提供理论依据和基础,并探索防治新途径。采用盆栽法,于长春花幼苗期分别接种17株AM真菌进行长春花农艺性状和对柑橘黄龙病的抗病性比较试验,研究不同丛枝菌根真菌菌株对长春花的促生效果及对柑橘黄龙病的抑制效果。结果表明,长春花接种AM真菌后,菌株GZ10、GZ5和JX70能显著促进植株生长,其中接种GZ10的株高和茎径分别比CK增加了23.1%和12.1%,接种GZ5的叶片数比CK增加了12.9%;接种菌株GZ1、BNMJ和PWJ有效提高了长春花对柑橘黄龙病的抗病和耐病能力,其相对防效分别为78.39%、66.87%和69.75%。

14种AM真菌对枳生长的影响

在盆栽条件下,以柑橘砧木枳(Fructus aurantii)幼苗为试验材料,在基质中接种从广西土壤中分离得到的不同丛枝菌根(AM)真菌菌株,探讨不同AM真菌对枳根系的侵染能力和植株生长的影响。结果表明:用于试验的14个AM真菌菌株均能与枳根系形成共生关系,平均侵染率为36.16%,其中侵染率最高的菌株是黄雷德克囊霉(Redeckera fulvum, Rf),侵染率高达92.83%,侵染率最低的菌株是副冠球囊霉(Glomus coronatum, Gc),侵染率仅为0.23%;接种黄雷德克囊霉、摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae, Fm2)和副冠球囊霉这3个菌株处理的枳植株的株高、茎粗、叶片数和叶柄长均高于CK,是枳的优势菌株,能促进枳的生长。

Vif基因体外表达载体构建及其在无细胞系统中的表达

随着-omics(组学)时代的到来,无细胞蛋白质合成系统以具有快速、方便、易于高通量等优点,正在被广泛地研究和应用。本文选取HIV病毒感染因子Vif作为目标蛋白,构建了适宜体外表达的Vif表达载体pIVEX2.4c-Vif,并将其在大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中进行表达,为下一步进行高通量药物筛选奠定了一定的基础。

养阴益气活血冲剂对沙土鼠脑缺血时去甲肾上腺素的影响

目的 :观察自制的养阴益气活血冲剂对沙土鼠脑缺血时儿茶酚胺水平的影响。方法 :沙土鼠灌服不同剂量的养阴益气活血冲剂 ,在水合氯醛麻醉下 ,结扎双侧颈总动脉 30 min造成脑缺血 ,取血后用高效液相色谱——电化学联合检测法测定各组动物血浆儿茶酚胺水平。结果 :缺血沙土鼠血浆中去甲肾上腺素浓度显著增加 (P<0 .0 1 ) ,给予中药后可拮抗去甲肾上腺素的升高 ,与脑缺血组比较差异显著 (P<0 .0 1 )。结论 :沙土鼠结扎双侧颈总动脉可致血中去甲肾上腺素增加 ,自制的养阴益气活血冲剂可阻止血浆去甲肾上腺素升高。

中药复方拮抗小鼠运动应激时血中儿茶酚胺升高

目的 观察人参、麦冬、葛根等提取物以及速效救心丸对小鼠运动应激时血中儿茶酚胺水平的影响。方法健康 ICR小鼠置跑步机上跑步 10 m in造成运动应激 ,用高效液相色谱 -电化学联合检测法测定运动应激动物血浆中儿茶酚胺水平。结果 运动应激小鼠血浆中去甲肾上腺素和肾上腺素浓度显著增加 (P<0 .0 1) ,小鼠 ig人参、麦冬、葛根等提取物以及速效救心丸 1h后再运动应激可拮抗血浆中去甲肾上腺素升高 (P<0 .0 1)。结论 小鼠运动应激可使交感神经激活 ,导致血中去甲肾上腺素释放增加 ,人参、麦冬、葛根提取物和速效救心丸可拮抗之。