蓝舌病毒结构与组装机制研究进展

蓝舌病毒(Bluetongue virus,BTV)是一种以媒介昆虫为传播媒介侵染野生反刍动物和家畜的世界范围流行的病原微生物。BTV颗粒是由10个基因片段组成的双股RNA病毒,分别编码7个结构蛋白(VP1-VP7)和至少4个非结构蛋白(NS1、NS2、NS3/3a和NS4)组成的连续蛋白质层的复杂结构,BTV已被作为大型无囊膜dsRNA病毒研究的模型系统。近年来,通过反向遗传学(RG)、低温电子显微镜(Cryo-EM)、蛋白晶体结构解析等研究分析方法,为BTV病毒蛋白结构、病毒蛋白之间功能关系、病毒组装/拆卸等方面取得了相当大的研究进展,该文对BTV病毒衣壳蛋白结构、核心蛋白的组装、基因组RNA组装等方面机制进行了综述。

荣昌猪BMP15基因通过TGF-βRⅡ激活SMAD4信号分子机制研究

本研究旨在阐明荣昌猪BMP15基因在荣昌猪性成熟前不同发育期的表达特性及其与SMADs信号相关基因的表达关系。采集1月龄、3月龄及5月龄荣昌猪卵巢组织,利用qRT-PCR及石蜡切片免疫荧光染色法分析荣昌猪不同月龄卵巢组织内BMP15基因表达及细胞定位特征;利用5月龄卵巢活组织添加重组人BMP15蛋白及TGF-β受体抑制剂(LY215799和LY2109761),应用qRT-PCR及Western blot方法分析BMP15及SMADs信号通路相关基因SMAD2、SMAD3、SMAD4、SMAD7、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ表达特征及BMP15/SMADs信号通路。结果表明:从1月龄至5月龄,随着荣昌猪生长发育,卵巢组织内BMP15基因mRNA表达量呈上调表达(P<0.05);石蜡切片免疫荧光试验表明,5月龄卵巢组织卵母细胞周围颗粒细胞内存在BMP15蛋白荧光信号;从3月龄至5月龄的卵巢组织内BMP15、SMAD4、TGF-β1及TGF-βRⅡ基因在mRNA水平呈上调表达(P<0.05),而SMAD2、TGF-β2及TGF-βRⅠ呈下调表达(P<0.05);通过5月龄卵巢活组织添加重组人BMP15蛋白、TGF-βRⅠ/Ⅱ及TGF-βRⅠ受体抑制剂培养,发现TGF-βRⅠ/Ⅱ抑制剂(LY2109761)明显抑制TGF-βRⅡ受体蛋白的表达,TGF-βRⅠ抑制剂(LY2157299)不能抑制TGF-βRⅡ受体蛋白的表达。上述结果表明,荣昌猪BMP15基因在荣昌猪性成熟前的卵巢组织内呈上调表达,SMAD4、TGF-β1及TGF-βRⅡ也呈上调表达。本试验研究表明BMP15基因通过TGF-βRⅡ介导SMAD4信号分子调控下游基因的表达,为进一步研究荣昌猪BMP15基因在卵泡发育中发挥的作用提供理论依据。

伪结核棒状杆菌毒力因子的研究进展

人兽共患病原伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis)引起的慢性传染病干酪样淋巴结炎杆菌(Caseous lymphadenitis,CLA)呈全世界流行,极难防制。该病原感染致病的机理与其毒力因子密切相关,本文就伪结核棒状毒力因子研究情况进行综述,提出进一步鉴定和解析不同毒力因子在该病原感染致病中的作用及相互关系,对深入了解该病原的致病机制和候选疫苗研究具有重要的指导意义。

细胞自噬与疾病的研究进展

细胞自噬(Autophagy)是细胞将受损的细胞器、废弃细胞质和变性或衰老的蛋白质转运至溶酶体(Lysosome),并进行酶解的一个生物学过程。在真核生物中,细胞自噬是一个高度保守的过程,而自噬是细胞的一种自我保护机制,维持了细胞内稳态。自噬在细胞程序性死亡(Programmed cell death,PCD)、心血管疾病、肝脏疾病、神经性疾病、癌症与肿瘤以及自身免疫性疾病等多种疾病过程扮演了重要的角色。该文综述了细胞自噬与多种疾病的研究进展,提示了细胞自噬在免疫相关性疾病过程中发挥着重要的调控作用,从而阐明细胞自噬可能作为疾病治疗的新靶点和突破口,为治疗免疫相关性疾病做铺垫。

TRIM21蛋白结构及其应答病原感染的研究进展

TRIM(Tripartite motif)蛋白家族是一系列细胞内具有广泛生物学活性的蛋白,约有80多种。其中TRIM21蛋白在各种类型细胞,特别是某些免疫细胞如T细胞、巨噬细胞和树突状细胞中广泛表达[1]。TRIM21最先作为自身抗原被发现,又称为Ro52/SS-A,常引起干燥综合征、系统性红斑狼疮和系统性硬化症等自身免疫病[2]。随着对TRIM21蛋白结构和功能的深入研究发现TRIM21蛋白具有E3泛素连接酶活性,并在固有免疫和适应性免疫的调控中发挥重要作用。TRIM21蛋白是目前在哺乳动物体内发现的唯一一个细胞浆内IgG受体[3],其介导的抗体依赖的细胞内中和反应(Antibody-dependent intracellular neutralization,ADIN)拓宽了人们对中和反应的认识。此外,TRIM21蛋白还在固有免疫中调控多种细胞因子的分泌。

沙棘籽多酚超声耦合真空提取工艺的研究

以沙棘籽多酚得率为指标,通过超声波耦合真空提取法确定沙棘籽多酚的最佳提取工艺。采用单因素和响应面设计相结合的方法,以液固比、超声温度、功率、提取时间为考察因素,优化沙棘籽多酚提取工艺。结果表明,超声耦合真空法提取沙棘籽多酚的最佳工艺条件为:超声功率260 W,液固比20∶1,超声时间30 min,超声温度52℃,在此条件下多酚得率为(11.394±0.083)%。经验证,与模型预测值(11.422%)相比较无显著差异(P>0.05)。运用超声波耦合真空法提取沙棘籽多酚稳定可靠,节能省时,具有实用价值,可用于工业化大规模生产。

胃排空检测方法的研究及展望

胃排空是衡量消化道功能的一个重要指标,在探讨消化道疾病病因学、药物动力学以及疾病的诊断和治疗方面有着不可或缺的作用。近年来,一系列成熟的检测方法已经被用来测量人体胃排空,包括插管法、实时超声、放射性显像及呼吸试验等,但这些检测方法在实验动物及动物临床医学的应用还相对较少,正确评估实验动物胃排空能力的技术对于药物药理学、生物利用度和胃肠疾病诊断等的研究非常重要。本文就常用的几个胃排空检测方法做一阐述,希望这些方法能为动物胃排空检测提供新思路。

miR-183的调控功能及在畜禽动物上的研究进展

MicroRNA-183(miR-183)是miR-183簇(miR-183 Cluster,miR-183C)包括定位于人7号染色体(7q31~34)上的miR-183、miR-182以及miR-96的一员,在物种进化上高度保守[1]。近年来,miR-183的功能研究主要有:(1)miR-183的异常表达介导了肿瘤的发生发展及诸多癌症如肺癌[2]等调控其增殖、转移以及入侵等,起着肿瘤抑制剂或促癌的作用,可作为其潜在的诊疗靶标;(2)miR-183参与其他疾病比如白血病[3]等的调控;(3)miR-183参与了感觉器官和神经系统的发育及部分功能的调控;(4)miR-183在动物的应激反应及代谢调控中发挥重要作用。本文就miR-183的功能及在畜禽动物身上的研究进行综述,为畜禽miRNA的深入研究提供理论参考。

髓样分化蛋白-2研究进展

髓样分化蛋白-2(Myeloid differentiation protein-2,MD-2)是一种分子量为20~30 kD的分泌蛋白,它结合在Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)胞外区,能与TLR4组成复合体(MD-2/TLR4),在细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的识别及其信号转导中发挥重要作用,MD-2也是目前炎症、感染、免疫等病理过程研究的热点之一。本文对MD-2基因结构、基因表达及MD-2与机体天然免疫等方面研究结果进行综述,以期阐释MD-2的基因与天然免疫的关系,为揭示MD-2基因的功能提供技术参考。

畜牧兽医行政管理学课程教学改革

从培养学生全面掌握畜牧兽医领域相关的法律、法规、条例、国际法典等知识的角度,探讨畜牧兽医行政管理学的课程定位、内容设计及其在畜牧兽医领域的重要性,并阐释了畜牧兽医事务法制案例在畜牧兽医行政管理学课程教学改革中的创新实践与应用。

肥胖犬猫麻醉的研究进展

随着社会的不断进步和人们生活条件的不断提升,犬猫在家庭中所占的比重越来越大。宠物犬猫的不科学饲养、缺乏运动、绝育以及患有肾上腺皮质机能亢进、甲状腺机能减退等疾病因素,常会导致其肥胖症的发生。肥胖不仅会影响犬猫心脏、肝脏、膀胱、骨骼等多个器官和系统的功能,还会在犬猫麻醉时对麻醉剂的作用效果产生不良影响。本文主要综述了肥胖与麻醉剂之间的相互作用,并对肥胖犬猫的麻醉提出了相关建议。

西南部分地区中兽医验方收集分析与典型案例

中兽医是我国优秀的传统文化遗产,但随着近几年畜牧行业的发展和壮大,中兽医传统经方验方传承面临困境。为了改善这种困境,使中兽医更好应用于临床,服务于社会,传承并发扬中兽医学。研究选用问卷调查法,交流访谈法及文献资料法对西南片区中兽医验方进行收集,并对其进行归纳整理、分析,分析了验方来源地分布情况、验方使用时间情况、验方治疗病症情况及验方临床应用典型案例,可为中兽医发展及兽医临床医学提供参考。

蓝舌病病毒非结构蛋白研究进展

蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)感染动物宿主细胞后,病毒非结构蛋白进行表达而参与病毒基因的复制、基因组的组装及病毒粒子的释放。BTV基因组至少编码NSP1、NSP2、NSP3/NS3a和NSP44种非结构蛋白(non-structural proteins,NSPs),这些NSPs在BTV基因组的复制、组装及拮抗宿主细胞干扰素免疫应答等方面发挥重要的作用。本文就BTV主要结构蛋白、非结构蛋白最新的研究进展进行了综述,为BTV新型疫苗的研发、病毒诊断及病毒基因组复制及组装机制提供基础。

山羊慢性酒糟中毒血液代谢物分析及乙醇中毒通路关键基因mRNA转录水平变化

本试验旨在揭示慢性酒糟中毒对山羊血液代谢物及其显著性代谢通路——乙醇中毒代谢通路的影响,筛选潜在性诊断生物标志物,为该病神经系统紊乱发生机制及早期诊断提供参考资料。试验选取4月龄健康大足黑山羊与波尔山羊的杂交后代15只,随机分为3组,65%白酒糟组、75%白酒糟组、基础日粮对照组。每隔15 d,进行肝肾、钙磷及蛋白质代谢指标检测,结合临床症状判断山羊慢性酒糟中毒建模成功。采集血样,利用超高效液相色谱—四极杆飞行时间质谱联用技术进行差异代谢物分析并筛选差异代谢物代谢富集通路,研究差异代谢通路中关键基因的表达变化。代谢组学结果表明,慢性酒糟中毒引起山羊体内多巴胺(DA)和2-呋喃酰甘氨酸(2-FG)上调,前列腺素I 2(PGI_(2))下调;突触小泡周期、多巴胺能突触、乙醇中毒、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、组氨酸代谢、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、三羧酸循环、鞘脂信号通路、cAMP信号通路等代谢通路均差异显著(P<0.05)。其中,乙醇中毒代谢途径变化显著,且影响因子>0.2;乙醇中毒代谢通路中,75%白酒糟组TH、DAT表达量显著降低(P<0.05),DDC、MAOA表达量呈降低趋势(P>0.05)。综上所述,慢性酒糟中毒可引起山羊血液中有机酸类、氨基酸类、脂质与类脂分子类、胺类、醇类、脂肪酸类及类固醇类代谢物的显著性改变,DA、2-FG、PGI_(2)可作为慢性酒糟中毒病的潜在性诊断生物标志物。差异代谢物富集的共同通路为乙醇中毒代谢途径,途径中DAT、TH mRNA表达下降,使机体DA浓度升高,进而引起中毒山羊的神经功能紊乱。

术芩总多糖对免疫低下小鼠脾淋巴细胞增殖与自噬的影响

探讨术芩总多糖对免疫低下小鼠脾淋巴细胞增殖与自噬的影响。采用CCK-8法筛选术芩总多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的最佳作用浓度及时间;试验分为空白组、3-MA(自噬抑制剂)组、3-MA+术芩总多糖组,Western blot测定术芩总多糖对小鼠脾淋巴细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3B表达的影响;试验分为空白组、环磷酰胺致免疫低下模型组、模型+术芩总多糖组,Western blot测定术芩总多糖对免疫低下小鼠脾淋巴细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3B表达的影响;试验结果:1)质量浓度为10^(-1)μg·mL^(-1)的术芩总多糖作用小鼠脾淋巴细胞12 h,细胞的增殖能力最强; 2)环磷酰胺免疫低下模型小鼠脾淋巴细胞增殖能力降低,术芩总多糖使淋巴细胞的增殖能力增强; 3)3-MA抑制小鼠脾淋巴细胞自噬时,自噬起始相关蛋白Beclin1的表达降低,术芩总多糖能使Beclin1的表达增加;当自噬相关蛋白LC3BⅡ/LC3BⅠ的表达升高时,术芩总多糖能降低LC3BⅡ/LC3BⅠ的表达; 4)免疫低下小鼠脾淋巴细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3BⅡ/LC3BⅠ的表达升高,术芩总多糖能降低Beclin1、LC3BⅡ/LC3BⅠ蛋白的表达。环磷酰胺降低小鼠免疫功能可能与其损伤脾淋巴细胞增殖发育,激活过度的自噬导致Ⅱ型程序性细胞死亡有关,术芩总多糖能抑制过高的自噬,增强淋巴细胞增殖能力,通过调控Beclin1、LC3BⅡ/LC3BⅠ蛋白的表达而调节机体的免疫功能。

重庆部分地区牛弓形虫血清流行病学调查及危险性因素分析

采用分析流行病学的"病例-对照研究"和弓形虫抗体ELISA检测方法,对重庆市牛弓形虫血清流行病学进行调查和危险性因素分析.从10个区县所采集的345份牛血清样本中,共检出弓形虫抗体阳性血清94份,平均阳性率为27.25%(94/345),其中公牛和母牛弓形虫感染的阳性率分别为19.25%(36/187),36.71%(58/158);1岁以上的成年牛和小于1岁幼年牛弓形虫的阳性感染率分别为31.06%(82/264),14.81%(12/81);无犬猫牛场弓形虫的感染率为23.40%(33/141),有犬猫牛弓形虫的感染率为29.90%(61/204).危险性因素分析显示,成年牛弓形虫感染率是幼年牛的2.59倍(OR=2.59,X^2=8.25,95%CI=1.33~1.5.04,p=0.004),表明重庆地区年龄因素对牛弓形虫病流行有中等程度的关联;母牛弓形虫感染率是公牛感染率的2.43倍(OR=2.43,X^2=13.17,95%CI=1.50~3.96,p=0),表明重庆地区性别因素对牛弓形虫病流行有中等程度的关联;有犬猫牛弓形虫的感染率是无犬猫的1.40倍(OR=1.40,X^2=1.77,95%CI=0.85~2.28,p=0.183),表明重庆地区有无犬猫对牛弓形虫病流行有较弱的关联.

化脓隐秘杆菌间接免疫荧光方法的建立及应用

通过制备兔抗化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)高免血清,筛选固定方法、封闭液、洗涤液、抗体稀释度、抗体孵育时间等应用条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌的间接免疫荧光方法。结果表明:用冷丙酮作固定剂,10%山羊血清作封闭液,0.05%Tween–20的0.01 mol/L pH 7.4 PBS(磷酸缓冲盐溶液)作洗涤液,兔抗化脓隐秘杆菌高免血清(一抗)1∶50稀释,37℃作用2 h,羊抗兔FITC(二抗)1∶100稀释,37℃作用2 h,草酸铵结晶紫衬染菌体3 min,对纯培养物化脓隐秘杆菌检测,可见清晰的特异性荧光,能区分溶血隐秘杆菌、伪结核棒状杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、猪链球菌;在人工感染化脓隐秘杆菌死亡小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及发病山羊临床病料中均能检出化脓隐秘杆菌。

布鲁氏菌介导的mmu-miR-671-5p的靶基因预测与功能富集性分析

为进行布鲁氏菌介导的mmu-miR-671-5p的靶基因预测,本试验利用布鲁氏菌(Brucella)感染RAW264.7细胞后,分别运用miRanda和TargetScan软件进行差异表达的mmu-miR-671-5p靶基因的预测,预测的靶基因分别有11 953和9 252个,将预测结果取交集进行韦恩(Venn)分析,重叠部分的靶基因有3 681个;利用GO与KEGG进行功能富集性分析,再利用PicTar软件进一步对mmu-miR-671-5p的靶基因进行预测,将预测结果与Venn分析结果进一步取交集,结果显示,mmu-miR-671-5p的预测靶基因有7个;实时荧光定量PCR分别验证7个预测靶基因的相对表达量发现,Tnfrsf1b与Tnip 1基因相对表达量极显著降低(P<0.01);在RAW264.7细胞中转染mmu-miR-671-5p inhibitors,分别验证7个预测靶基因的相对表达量发现,Tnfrsf1b与Tnip 1基因的相对表达量极显著升高(P<0.01);对mmu-miR-671-5p与Tnfrsf1b和Tnip1的3′非翻译区(3′UTR)结合靶位点分别进行预测,结果初步表明,mmu-miR-671-5p的靶基因为Tnfrsf1b与Tnip 1,其预测结合靶位点均只有1个,分别位于Tnfrsf1b和Tnip1 3′UTR全长位置的91和305 bp。本研究结果为进一步揭示mmu-miR-671-5p在布鲁氏菌感染RAW264.7细胞过程中的功能提供科学依据。

均匀设计法优选抗雏鸡白痢翁苋颗粒

利用均匀设计法及回归分析优选抗雏鸡白痢的中药组方翁苋颗粒.结合中兽药组方原则,将白头翁、马齿苋、苍术、陈皮等中药进行组方配伍,采用均匀设计法及回归分析,以不同配比的翁苋颗粒对鸡白痢沙门氏菌的体外抑菌效果作为考察指标,运用中兽医整体观念及体外抑菌活性评价筛选最优处方.采用腹腔注射鸡白痢沙门氏菌菌液的方法复制雏鸡白痢的病理模型,通过在饲料中添加一定比例的翁苋颗粒,于试验后统计有效率、治愈率.翁苋方28的组分配比为最佳处方,最优处方配比的翁苋颗粒高剂量组对雏鸡白痢的治愈率、有效率均为91.7%.该试验筛选出的优化复方制备处方翁苋颗粒能够有效防治雏鸡白痢.

芪芩汤对新型呼肠孤病毒试验感染雏鸭治疗效果分析

为探讨芪芩汤对感染新型呼肠孤病毒(NDRV)雏鸭的临床治疗效果,本试验选取75只7日龄健康雏鸭随机分为5组,每组15只。试验分为芪芩汤高、中、低剂量、空白组、模型组。除空白组皮下注射生理盐水,其余4组雏鸭皮下注射NDRV人工染毒造模,同时芪芩汤高、中、低剂量组分别按照剂量为2 g/mL、1 g/mL、0.5 g/mL芪芩汤进行灌喂治疗,连续给药7 d;模型组和空白组不给予任何药物。在给药后第1、4、8天采集雏鸭血清测定IFN-α、IFN-β和IFN-γ含量,并比较各试验组雏鸭的存活率,观察雏鸭临床症状、剖检病变以及H.E.染色切片。结果显示,芪芩汤能有效减轻NDRV感染病鸭的临床症状及病理变化,显著提高感染雏鸭的存活率(P<0.05);与空白组相比,模型组雏鸭血清中IFN-α、IFN-γ含量极显著或显著(P<0.01或P<0.05)降低,IFN-β含量无显著性差异(P>0.05)。与模型组相比,芪芩汤高、中、低剂量组雏鸭血清中IFN-α、IFN-β、IFN-γ含量极显著或显著(P<0.01或P<0.05)升高。结果表明,芪芩汤对感染新型呼肠孤病毒雏鸭有一定的治疗作用,并能有效减轻新型呼肠孤病毒对雏鸭免疫器官的损伤,提高机体抗病毒的能力。