驴皮低温酶解脱毛方法及其对阿胶质量的影响

[目的]开发一种适合阿胶产业化生产的高效驴皮脱毛方法。[方法]低温条件下(4℃),选用1%碱性蛋白酶和1%中性蛋白酶对醒发的干驴皮开展酶解脱毛试验,比较2种酶解方法处理下驴皮的脱毛时间、脱毛率,并对脱毛过程中驴皮的气味进行评价。以1%碱性蛋白酶和1%中性蛋白酶酶解处理驴皮以及机械脱毛鲜驴皮为材料熬制阿胶,比较不同原料熬制阿胶的出胶量、出胶率、外观、气味等;测定以2种蛋白酶酶解处理的驴皮为原料熬制的阿胶质量指标,包括水分、灰分、水不溶物以及4种氨基酸含量,并与《中国药典》2015版一部中提供的相应质量标准进行对比。[结果]低温条件下(4℃),利用1%碱性蛋白酶(pH值=10.5)或1%中性蛋白酶(pH值=7.5)酶解处理驴皮第2天表现出脱毛效果,处理第5天醒发的干驴皮脱毛率可达90%,有臭味产生但非驴皮腐败臭味,而是脱毛过程中产生的正常气味。以1%碱性蛋白酶、1%中性蛋白酶酶解脱毛后的驴皮以及机械脱毛鲜驴皮为原料熬制阿胶,出胶量分别为113.0、109.4、129.3 g,出胶率分别为13.8%、13.1%、13.2%;2种酶解处理驴皮熬制的阿胶色红、气味芳香,与鲜驴皮熬制的阿胶相比色泽更鲜亮。2种酶解处理驴皮熬制阿胶的水分、灰分、水不溶物均符合并优于《中国药典》2015版一部中的质量标准,L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸含量也远高于《中国药典》2015版一部中的质量标准。[结论]低温条件下(4℃),1%碱性蛋白酶和1%中性蛋白酶可对醒发干驴皮进行有效酶解脱毛,且脱毛后驴皮熬制的阿胶质量符合《中国药典》2015版一部标准。

驴骨胶原肽制备方法的初步建立及分子量检测

旨在建立驴骨胶原肽的制备方法,并对其分子量进行检测。以牛血清白蛋白为对照品,建立多肽含量和OD650 nm值的标准曲线方程;模拟人工胃液、肠液环境,以驴骨胶原肽一级、二级酶解产物多肽含量为评价指标,在筛选胃蛋白酶和胰蛋白酶最佳酶解时间和加酶量的基础上,采用二级生物酶解技术制备驴骨胶原肽;应用SDS-PAGE法对制备的驴骨胶原肽的分子量进行检测。结果表明,建立的多肽含量和OD650 nm值标准曲线方程为:y=0.1639x-0.1496,R2=0.9989;应用胃蛋白酶进行一级酶解驴骨胶原肽的最适反应条件为:pH值在2.5~3.0,加酶量2.0%、酶解时间2.0 h;应用胰蛋白酶进行二级酶解驴骨胶原肽的最适反应条件为:pH值在7.5~8.0,加酶量2.0%、酶解时间2.5 h;经SDS-PAGE法检测,根据上述最适反应条件制备的驴骨胶原肽的分子量在10 kDa左右。研究结果为开发适合人体吸收分子量的驴骨胶原肽原料以及后续产品的研发提供了技术参考。

阿胶历史沿革考

阿胶是我国特有的名贵中药,有"补血圣药"之称。该文通过系统查阅历代本草典籍和现代文献,对阿胶的名称、基原、加工炮制、功能主治、临床应用等历史沿革进行梳理与考证。阿胶的药用记载最早可追溯至《神农本草经》,其异名包括驴皮胶、盆覆胶、傅致胶等;随着朝代的更迭,阿胶的原料经历了以下几个阶段的演变:牛皮为主-牛皮、驴皮混用-驴皮为主-驴皮,阿胶的制作原料由最初的牛皮为主更迭为驴皮,探究驴皮胶取代牛皮胶的深层次原因主要有两方面,一是与各历史时期的社会因素密切相关;二是对牛皮胶与驴皮胶功效的认识发生了很大改变,进而影响到临床应用。阿胶的加工炮制方法同样经历了不断的演变和发展,阿胶在唐代以前主要采用炙和炒的方法,在此基础上发展了熬和蒸,以及炒时加用辅料的方法,如宋朝的"蛤粉炒"、清朝的"蒲黄炒"等,辅料的加入进一步丰富了阿胶的炮制理论和炮制方法,大大增强了其补血养血、疏肝调肝、益气清肺的功效。因此阿胶的应用也变得更加丰富,其临床应用的广泛性和有效性从历代医案尤其是清宫医案中,可以看到翔实的记录。