超高效液相色谱质谱联用技术在发酵乳有机酸分析中的应用

利用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术,建立了发酵乳中乙酸,乳酸,琥珀酸的检测方法。色谱条件为:采用ACQUITY UPlC HSS T3色谱柱进行分离,乙腈-0.1%甲酸/1 mmol/L甲酸铵水溶液体系作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,柱温为30℃,进样量5μL。质谱采集选择ESI-负离子监测模式进行扫描,优化锥孔电压和碰撞能量等质谱条件,离子源温度100℃,脱溶剂气温度450℃,脱溶剂气流量600 L/h。通过绘制有机酸的标准曲线,得到乙酸、琥珀酸、乳酸的线性范围分别是0~100,0~80,0~600μg/mL;最低检出限分别为0.04,0.0025,0.0025μg/mL;最低定量限分别为0.2,0.01,0.01μg/mL;相关系数范围R2为0.9951~0.9997,回收率范围为93.5%~106.07%。该方法准确、快速,可用于检测发酵乳中有机酸的含量。

庆大霉素适应性菌株遗传稳定性研究

适应性进化是工业微生物遗传育种的重要技术手段之一。以庆大霉素连续进化1 200代的干酪乳杆菌Zhang为研究对象,将其在去掉选择压力的培养基中连续传1 000代,对其细胞形态、活菌数、浊度、耐药表型、基因型的变化进行跟踪监测。研究结果显示:适应性菌株在去掉选择压力环境中进化1 000代后,其细胞形态、活菌数、浊度及耐药表型趋于稳定;基因组仅检测到11个突变位点,包括4个同义突变位点和7个非同义突变位点。干酪乳杆菌Zhang庆大霉素适应性菌株具有良好的遗传稳定性。

新疆发酵乳中保加利亚乳杆菌的耐药性研究

以分离自新疆酸牛乳中的5株保加利亚乳杆菌为研究对象,采用肉汤稀释法测定保加利亚乳杆菌在15种常见抗生素条件下的耐药表型,并通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对菌株可能出现的耐药基因进行检测。结果表明,IMAU32330、IMAU32265和IMAU32166对环丙沙星耐药,对其他抗生素敏感;而IMAU32071、IMAU32276对所有抗生素均敏感。通过检测受试菌株的耐药基因,从5株菌中均检出erm(B),从部分受试菌株中检出了耐药基因vanX等。实验结果可以为人们安全使用抗生素和乳酸菌提供一定的参考。