调理素的研究进展

简述了补体、抗体、C-反应蛋白、血清淀粉样蛋白、甘露糖凝集素、表面活性蛋白、纤粘蛋白等七类调理素的研究,报道了新发现的调理素低密度脂蛋白和高密度脂蛋白,并对抗感染免疫学研究的新视角进行了展望。

四种分子伴侣促进牛支原体膜蛋白在大肠杆菌中可溶性表达研究

为研究分子伴侣是否可以促进牛支原体膜蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达及表达的蛋白是否具有活性,应用原核表达和Western blot方法进行检测,结果表明:1)牛支原体一个膜蛋白M1的截短片段在大肠杆菌表达系统中以包涵体形式表达,改变诱导时间、温度以及诱导剂浓度均未改变其表达形式;2)将4种分子伴侣pGKJE8、pGro7、pG-Tf2和pTf16分别与含有目的蛋白的重组质粒在表达工程菌(BL21)中共表达,当加入终浓度为1.0mmol/L IPTG以及0.5mg/mL L-阿拉伯糖或5.0ng/mL四环素的诱导剂,37℃诱导5h,发现分子伴侣pGTf2和pG-KJE8能显著提高M1截短片段的可溶性表达,其他2种分子伴侣未改变M1的表达形式;3)可溶性表达的M1截短片段与牛支原体阳性血清可以发生特异性反应。因此,研究发现2种分子伴侣可以使牛支原体膜蛋白在大肠杆菌表达系统中以可溶性形式表达,但未改变其生物活性,该研究结果可为建立牛支原体有效的血清学诊断方法及亚单位疫苗的研制奠定基础。

液质联用-同位素内标法测定赛马血液、尿液中茶碱残留

目的建立液质联用-同位素内标法测定赛马血液和尿液中茶碱残留的方法。方法采用6D-茶碱作为内标物,利用强阳离子固相萃取小柱提取茶碱。采用Poroshell 120 SB-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.7μm),0.1%甲酸水溶液(5 mmol·L^(-1)甲酸铵)-0.1%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱;流速为0.4 mL·min^(-1);电喷雾源(ESI)离子源;正离子模式;茶碱以181.1>124.1,96.0 m/z(内标物187.1>126.9,99.0 m/z)以多反应监测(MRM)扫描方式进行定性定量。结果使用Waters Oasis PRIME MCX 3CC/60 mg固相萃取小柱最优,血清和尿液茶碱浓度在1.00~100.00 ng·mL^(-1),2.50~100.00 ng·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(r^(2)分别为0.9999和0.9996),检测限为0.30,0.75 ng·mL^(-1),定量限为1.00,2.50 ng·mL^(-1),相对回收率分别为98.93%~114.49%、94.85%~116.25%,批内精密度≤3.81%,批间精密度≤15.53%,血清基质对茶碱有较强抑制作用,尿液抑制作用较弱。结论经方法学验证,该方法操作简单、快速、准确、灵敏度高,可适用于马兴奋剂中茶碱残留量的检测。