籽用西瓜种质资源SSR分析及初级核心种质库构建

采用SSR分子标记技术对50份不同来源的籽用西瓜材料进行遗传多样性研究,并基于SSR分子标记聚类分析采用最小距离逐步抽样法构建籽瓜初级核心种质库。研究表明：（1）从106对SSR随机引物中筛选出扩增条带清晰、多态性高的31对引物,共得到138条清晰可辨条带,其中多态性条带115条,占83.33%,平均Shannon’s信息指数（I）为0.419 3,平均Nei’s多样指数（h）为0.272 4,平均有效等位基因数（Ne）为1.458 0,平均等位基因数（Na）为1.981 4,说明50份籽瓜种质具有丰富的遗传多样性。（2）用NTsys2.10e软件对种质资源聚类分析表明,种质间的遗传相似系数介于0.57～0.91之间,其中来源地相同的个别种质间遗传相似系数却很小,而来源地不同的个别种质间的遗传相似系数却很高。（3）采用最小距离逐步抽样法,按70%、60%、50%、40%、30%、20%、10%的比例抽样后,各个核心子集遗传多样性指数总体上变化不明显,但各抽样比例相比,以抽样比例20%获得10份初选种质的Ne、h和I达到最高值,说明抽样20%构建的初级核心种质对原始种质具有很好的代表性。

山药种质资源的ISSR分析及初级核心种质库的构建

采用ISSR分子标记技术对中国不同产地的35份山药种质资源进行遗传多样性分析,并用最小遗传距离逐步抽样法构建核心种质库。结果表明：（1）筛选出12个有效引物共扩增出142个位点,多态性比率为97.18%,平均Shannon’s信息指数（I）为0.4230,平均Nei’s基因多样性指数（h）为0.269 4,平均有效等位基因数（Ne）为1.427 1,平均等位基因数（Na）为1.971 8,说明35份山药种质遗传多样性很丰富。（2）聚类分析表明,种质间的遗传相似系数介于0.54-0.97之间,其中来源地不同的个别种质间的遗传相似系数也很高。（3）经6次逐步抽样,随着抽取种质数目的减少,种质库遗传多样性参数变化不明显,而多态性比率在其中5次逐步抽样中呈现下降趋势;但抽样4在抽样数是抽样前的31%时,多态位点率仍可达到抽样前的97.8%,说明抽样4所构建的山药核心种质库最具代表性。

籽用西瓜SCoT-PCR反应体系优化及引物筛选

采用L_(25)(5~6)正交试验设计,对影响目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)的5个因素(Taq酶用量、Mg^(2+)浓度、模板DNA用量、dNTPs浓度和引物浓度)进行优化试验,建立了籽用西瓜SCoT-PCR反应体系:Mg^(2+)2.5mmol·L^(-1)、dNTPs 0.15mmol·L^(-1)、Taq酶1.5U、引物0.5μmol·L^(-1)、模板DNA 20ng,总体积20μL。比较各因素对扩增反应的结果,其中以Mg^(2+)浓度的影响最大,Taq酶用量的影响最小。应用22个籽用西瓜品种验证该体系稳定可靠,并从41个SCoT引物中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的22个引物,并逐一筛选出最适退火温度。该反应体系的建立为今后利用SCoT标记技术对籽用西瓜种质遗传多样性评价、指纹图谱构建、种质鉴定、分子标记辅助选择育种等研究提供了新的技术手段。

山药染色体制片技术的优化

山药(Dioscorea opposite Thunb.)为药食兼用的常见蔬菜,而其染色体的研究相对滞后。以根尖为试验材料,分别考察不同的取材方式、预处理试剂、预处理方法以及解离方式对山药染色体制片效果的影响,筛选优化制片的关键技术,以期为今后细胞学研究打下基础。结果表明:室内基质培养块茎(或零余子)的方式获取的根尖中中期分裂相个数最多,且染色体分散良好的中期分裂相占的比例最高;适合于山药核型分析的预处理试剂为8-羟基喹啉同秋水仙素的混合液、8-羟基喹啉溶液,其中8-羟基喹啉溶液预处理后染色体缢痕更清晰,为最好的预处理试剂;预处理方法以低温4℃下2 mmol/L的8-羟基喹啉预处理2 h最好;采用酸解加酶解的方式解离效果明显好于单用酸解的方式,并且得到的制片中染色体形态清晰,96.3%的中期细胞的染色体分布于同一个水平面上。

山药块茎生长期5种内源激素含量变化对块茎膨大的影响

【目的】探讨山药不同生长发育阶段主要内源激素含量的变化规律,以及不同山药品种形态指标与5种内源激素的相关性,为进一步研究山药生长发育的生理机制和指导山药的高产优质栽培奠定基础。【方法】以毕克齐山药和河北安平白山药7个不同生长发育时期块茎为材料,采用酶联免疫吸附法分别测定了脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、生长素(IAA)、茉莉酸(JA)、玉米素(ZR)等5种内源激素含量,并分析不同生长期内源激素含量的动态变化,以及山药形态指标与内源激素的相关性。【结果】在两个山药品种块茎膨大的生长发育过程中,内源激素IAA和ABA含量总体呈逐渐上升的趋势;内源激素ZR和GA3含量有变化,但比较稳定;内源激素JA含量,两个品种均呈下降趋势,尤其是河北安平白山药的JA含量与形态指标呈极显著的负相关,说明JA明显抑制了河北安平白山药块茎的周长增加、重量增加及伸长生长;内源激素IAA和JA在不同生长期的含量水平高低,两个品种表现出不同的变化趋势。【结论】内源激素ABA、GA3、IAA可促进2个山药品种块茎生长发育,其中ABA、IAA对毕克齐山药块茎伸长的促进作用更显著;而内源激素ZR、JA可促进河北安平白山药的块茎形成及初期块茎周长的增加。

山药多糖脱蛋白方法的研究

以蛋白脱除率和多糖保留率为指标,通过比较Sevage法、三氯乙酸(TCA)法、胰蛋白酶法、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、胰蛋白酶-TCA联用法、胰蛋白酶-Sevage联用法、胰蛋白酶-CTAB联用法,对山药块茎多糖进行脱蛋白研究。试验结果表明:胰蛋白酶-TCA法脱蛋白的效果最好,蛋白脱除率为87.25%,多糖保留率为92.48%,而且试验耗时短,操作简单。其最佳脱蛋白条件为:胰蛋白酶用量为0.4 mL,酶解时间为45 min,酶解pH为7.5,酶解温度为37℃,TCA浓度为6%。

山药粗多糖对果蝇寿命及繁殖力的影响

山药,薯蓣科（Dioscoreaceae）薯蓣属（Dioscorea L.）多年生宿根蔓性块茎类植物,是传统药食同源食材,有补脾养胃、生津益肺、抗肿瘤、清除自由基、延缓衰老等功效。山药中含有多糖、蛋白质、脂肪、维生素和微量元素等多种化学成分,其中多糖为山药重要的活性成分。

基于SCoT标记分析籽用南瓜的遗传多样性

利用SCoT分子标记对44份籽用南瓜品种进行遗传多样性分析。从62个引物中筛选出24个有多态性的引物来对44份籽用南瓜品种进行PCR扩增,得到了228个位点,其中具有多态性的位点有168个,占总位点数的73.68%。应用POPGENE 32分析得到,44个籽用南瓜品种的平均Nei’s基因多样性系数为0.3055,平均Shannon’s信息指数是0.4425。利用NTSYS Version2.1软件分析得,所有籽用南瓜品种的相似系数在0.522~0.934之间;进行非加权组平均法(UPGMA)聚类分析得出树状图,将44份籽用南瓜品种完全的区分开来,并在相似系数0.724处,分为8类。从得到的一系列遗传相关系数可说明,SCoT分子标记技术可以很好地应用于籽用南瓜材料的遗传多样性分析。

呼和浩特市大蒜不同地方品种筛选试验

针对内蒙古自治区呼和浩特地区目前大蒜无主栽品种,引进栽培品种单一、退化速度快、品质差、抗病性弱、产量低等问题,通过对呼市地区的4个主要地方品种进行栽培比较试验,调查出苗率、产量、农艺性状以及品质指标,结果表明,地方品种清水河大蒜在出苗率、壮苗指标、产量、品质等综合指标表现优于其它地方品种,可作为呼市地区规模化栽培的候选品种。且蒜瓣带皮播种优于剥皮播种模式。