浅谈医学院校实验室队伍建设中存在的问题及对策

实验技术队伍是高等学校教师队伍的重要组成部分。建设一支具有较高科研素质、较强动手能力,既熟悉实验设备性能,又能熟练操作实验设备,并能较好指导学生实验的实验队伍是搞好实验室建设和充分发挥仪器设备效益的重要保证。在对内蒙古自治区3所医学院校实验技术队伍建设情况调查的基础上,分析了该自治区医学院校实验技术队伍建设面临的主要问题,提出了加强实验技术队伍建设的对策。

2型糖尿病患者血清脂肪酸结合蛋白4、PPARγ表达变化及其与胰岛素抵抗的相关性

目的观察2型糖尿病(T2DM)患者血清脂肪酸结合蛋白4(FABP4)水平及过氧化物酶增殖受体γ(PPARγ)水平的变化,并探讨二者与胰岛素抵抗的关系。方法T2DM患者32例(研究组),均使用二甲双胍治疗,体检健康者34例(对照组)。分别于治疗前,治疗后1、2、3、7个月时采用ELISA法检测血清FABP4及PPARγ,并进行比较。采用Pearson相关方法进行各指标间的相关分析。采用多元逐步回归分析法分析胰岛素抵抗的独立影响因素。结果研究组治疗前FABP4、PPARγ、HOMA-IR分别为(22.92±7.53)ng/mL、(832.01±168.71)pg/mL、3.46±1.00,对照组分别为(13.68±3.37)ng/mL、(1347.4±204.84)pg/mL、1.82±0.25。两组各指标比较,P均<0.05。治疗后1、2、3、7个月,研究组FABP4均较治疗前降低(P均<0.01),PPARγ较治疗前升高(P均<0.01)。T2DM患者用药前后血清FABP4及血清PPARγ均呈负相关(r=-0.739、-0.606,P均<0.01)。血清FABP4及PPARγ均为HOMA-IR的独立影响因素(P均<0.05)。结论T2DM患者血清FABP4水平升高、PPARγ水平降低,病情好转时,血清FABP4水平降低、PPARγ水平升高;血清FABP4可能通过与PPARγ相关的负反馈回路引起胰岛素抵抗的发生。

伴微量白蛋白尿2型糖尿病患者血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白和4和第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物蛋白的研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)伴微量白蛋白尿患者血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)蛋白表达水平变化及两者在糖尿病肾病(DN)发生过程中的相互关系。方法收集T2DM患者120例,据尿白蛋白肌酐比值(UACR)进行分组,其中正常白蛋白尿组(D0)39例,微量白蛋白尿组(D1)81例。同时收集39例正常对照组(NC)。采用ELI-SA法检测受试者外周血清FABP4和PTEN蛋白表达的水平。结果 T2DM组血清FABP4和PTEN蛋白水平均显著高于正常对照组(P <0.001)。D1组血清FABP4和PTEN蛋白水平显著高于NC组及D0组(均P <0.05)。T2DM患者中,Log(FABP4)与PTEN蛋白(r=0.524,P <0.001)、Log(UACR)(r=0.202,P <0.05)均呈正相关。二分类Logistic回归分析显示,血清FABP4水平与T2DM患者尿微量白蛋白的出现独立相关(OR=1.147,95%CI∶1.042～1.263,P=0.005)。结论血清FABP4水平也许可作为DN患者的早期预测指标。FABP4和PTEN蛋白可能在DN的发生中存在着相互联系。

血液基因组DNA提取试剂盒提取条件的优化

目的针对两种实验室常用全血基因组提取DNA试剂盒(天根血液基因组DNA提取试剂盒、康为世纪血液基因组提取试剂盒)提取方法和DNA产量进行比较,建立方便、快捷、有效的外周血液基因组DNA的提取方法。方法采用500ul、800ul全血、裂解液1.5倍、2倍提取基因组DNA,利用分光光度计和凝胶电泳检测提取效果。结果两种试剂盒采用800ul全血与2倍裂解液时提取血液基因组DNA浓度最高,其中天根试剂盒提取的基因组DNA纯度和质量更优。结论利用商品化试剂盒提取血液基因组DNA时,针对实验目的,可采取增加全血用量和提高裂解液体积的方法提高基因组DNA的产量和纯度。

应用^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2) SPECT显像验证不同注射部位对胶原诱导型类风湿大鼠模型成模影响的研究

目的通过分子探针^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2) SPECT在体观察药物注射于大鼠不同部位后显像剂摄取变化,探究不同注射部位对胶原诱导型类风湿性关节炎大鼠模型的影响,建立在体评估的类风湿关节炎大鼠模型评估体系。方法取20只雌性SD大鼠(6~7周龄),随机抽样法分为实验组(A组、B组、C组)及对照组。实验组注射牛II型胶原乳剂(1.0 ml/只,1 g/L),A组注射于鼠尾根部,B组注射于背部皮下,C组注射于腹腔。1周后剂量减半,相同部位再次免疫注射。以两次皮下注射生理盐水为对照组。4周后进行视觉评估、^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2) SPECT显像及病理学分析,对比统计分析。结果CIA(胶原诱导性关节炎)组成功造模7只(A组3只,B组2只,C组2只),成模率为47%。CIA各组T/NT比值差异无统计学意义(P>0.05),与空白对照组比较有统计学意义(F=25.668,P<0.05)。CIA各组关节病理滑膜细胞增生指数也明显高于空白对照组(H=9.218,P<0.05)。结论3种不同注射方式均可建立CIA大鼠模型,但背部及腹腔注射可能造成明显炎症反应,且^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2)有助于为CIA模型的构建提供活体可视化依据。

HLA-C基因分型试验中PCR反应体系的优化

为了选择适合HLA-C基因分型的最佳PCR温度反应条件,试验采用PCR-SBT方法对HLA-C基因进行高分辨率分型。结果表明：在52~64℃范围内,64℃可以作为PCR最适合温度。通过反应条件的优化,摸索建立特异性强、重复性好、可用于HLA-C高分辨率基因分型的最佳反应体系,温度条件以64℃为最佳。

糖调节受损及初发2型糖尿病患者外周血脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白4及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物水平变化及与胰岛素抵抗的相关性

目的 比较糖调节受损（IGR）及初发2型糖尿病（T2DM）患者与健康人外周血脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白4（FABP4）及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）的蛋白表达,探讨两者可否作为糖代谢紊乱早期的生化指标.方法 2013年1月至12月,收集初发T2DM（分为肥胖组34例及非肥胖组31例）患者共65例、IGR患者32例及健康对照组30例.IGR及T2DM组中男48例,女49例,年龄（47± 11）岁.对照组中男14例,女16例,年龄（41±11）岁.采用酶联免疫吸附法检测受试者外周血浆中FABP4与PTEN的蛋白表达水平,同时检测血糖、血脂等指标.多组间变量比较采用单因素方差分析,两变量间相关分析采用Pearson相关分析,多元逐步回归分析方法用于确定胰岛素抵抗的独立影响因子.结果 （1）对照组、IGR组、非肥胖糖尿病组和肥胖糖尿病组FABP4浓度分别为（3l±4）、（34±5）、（34±4）、（34±5） ng/L.与对照组比较,IGR组、非肥胖糖尿病组和肥胖糖尿病组的FABP4浓度升高（t=2.057、2.369、3.094,均P＜0.05）.（2）对照组、IGR组、非肥胖糖尿病组和肥胖糖尿病组PTEN浓度分别为（2.9±0.5）、（3.8±0.6）、（3.7±0.7）、（3.8±0.5）μg/L.与对照组比较,IGR组、非肥胖糖尿病组和肥胖糖尿病组的PTEN浓度升高（t=6.049、5.509、5.798,均P＜0.05）.（3）相关分析显示FABP4与PTEN呈正相关（r=0.361,P＜0.01）;经多元逐步回归分析发现,甘油三酯、体质指数、FABP4 、PTEN是HOMA-IR的独立相关因素.结论 FABP4及PTEN有可能作为糖代谢紊乱的早期生化检测指标,并与T2DM患者胰岛素抵抗可能相关.