逍遥散对卒中后抑郁大鼠的治疗机制研究

【目的】观察逍遥散对卒中后抑郁大鼠的治疗机制。【方法】将40只大鼠随机分为正常组,模型组,逍遥散低、中、高剂量组,每组10只。除正常组,其余各组大鼠采用四血管阻断法制作卒中模型,7 d后再采用社会隔离+慢性不可预见性温和应激(CUMS)方法制备卒中后抑郁模型。造模同时,逍遥散低、中、高剂量组给予4.5、9、18 g·kg^(-1)·d^(-1)(生药)逍遥散煎剂灌胃,正常组、模型组每天灌胃等体积的生理盐水,连续给药6周。给药结束后,Zea-Longa法评价大鼠神经功能损伤情况;苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠脑组织的病理形态学变化;尼氏染色法观察脑神经细胞凋亡情况;酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)及脑组织五羟色胺(5-HT)及其代谢物五羟吲哚丁酸(5-HIAA)的含量;聚合酶链反应(PCR)法检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)m RNA表达水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测海马谷氨酸转运体1(GLT-1)、脑源性神经营养因子(BDNF)、Caspase通路相关蛋白(Caspase-9、Caspase-3及其剪切体)表达水平。【结果】(1)与正常组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分升高(P<0.05);与模型组比较,逍遥散中、高剂量组神经功能缺损评分降低(P<0.05)。(2)模型组脑组织发生明显病理损伤,无尼氏小体,而逍遥散中、高剂量组脑组织形态结构及尼氏小体较模型组得到不同程度的改善。(3)与正常组比较,模型组大鼠血清iNOS、TNF-α、IL-10含量升高(P<0.05);与模型组比较,逍遥散中、高剂量组大鼠血清iNOS、TNF-α含量降低及IL-10含量升高(P<0.05)。(4)与正常组比较,模型组大鼠脑组织5-HT、5-HIAA含量降低(P<0.05);与模型组比较,逍遥散中、高剂量组大鼠脑组织5-HT、5-HIAA含量升高(P<0.05)。(5)与正常组比较,模型组大鼠脑组织GLT-1、BDNF表达水平降低(P<0.05),Caspase-9剪切蛋白、Caspase-3剪切蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,逍遥散中、高剂量组大鼠脑组织GLT-1、BDNF表达水平升高(P<0.05),Caspase-9剪切蛋白、Caspase-3剪切蛋白表达水平降低(P<0.05)。(5)与正常组比较,模型组大鼠脑组织SOD mRNA表达水平降低(P<0.05),MDA mRNA表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,逍遥散中、高剂量组大鼠脑组织SOD m RNA表达水平升高(P<0.05),MDA mRNA表达水平降低(P<0.05)。【结论】逍遥散可通过抑制卒中后抑郁大鼠神经细胞凋亡、改善免疫功能和氧化应激损伤发挥抗抑郁作用。