Survivin-shRNA对A431皮肤鳞状细胞癌抑制作用的实验研究

目的观察Survivin-sh RNA对A431皮肤鳞状细胞癌的作用效果,探讨核因子κB(NF-κB)在Survivin-sh RNA对皮肤鳞状细胞癌(SCC)抑制作用中的分子生物学机制。方法构建Survivin-sh RNA腺病毒载体,筛选最佳干扰序列。将培养好的A431细胞混悬液皮下接种于裸鼠,复制A431裸鼠移植瘤模型,随机分为空白对照组、阴性对照组、Survivin-sh RNA转染组和Res阳性对照组,每组5只,瘤内注射相应试剂,第20天处死所有裸鼠,取瘤组织分别测量瘤体积、瘤重,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率;HE染色观察细胞形态;TUNEL检测细胞凋亡情况;Western blot法测定Survivin、IκB、P65、P53、Caspase-3蛋白的表达。结果Survivin-sh RNA转染组或Res阳性对照组的裸鼠移植瘤,瘤体积及瘤重降低,与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义(P <0.05);TUNEL检测结果示Survivin-shRNA转染组、Res阳性对照组的裸鼠移植瘤,细胞凋亡率增高,与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);Survivin-shRNA转染组及Res阳性对照组可见肿瘤细胞较少,分布稀疏,有变性的液化坏死灶,癌细胞皱缩变圆,胞核固缩;Survivinsh RNA转染组或Res阳性对照组裸鼠移植瘤,Survivin、P65蛋白的表达均降低,与空白组对照组及阴性对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05),IκB、P53、Caspase-3蛋白表达增高,与空白对照组及阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Survivin-shRNA可以抑制皮肤鳞状细胞癌裸鼠移植瘤的生长,其机制之一可能是通过抑制NF-κB信号通路,活化抑癌基因P53,进而促进肿瘤细胞凋亡,抑制SCC移植瘤的生长。