褪黑素保护卵母细胞应对热应激损伤的研究

目的探讨褪黑素对热激条件下小鼠卵母细胞体外成熟的潜在影响。方法采用小鼠卵母细胞成熟的热激模型,将卵母细胞随机分成3组,分别是对照组、热激组和热激+褪黑素组,测定1×10-9 mol/L褪黑素对热激后卵母细胞质量的改善作用。结果与对照组相比,热激组小鼠卵母细胞成熟率显著下降[(33.00±0.07)%vs.(85.00±0.03)%,P<0.01],纺锤体组装异常,早期凋亡比率显著增加[(59.7±4.5)%vs.(22.0±3.5)%,P<0.01];热激+褪黑素组与热激组相比,卵母细胞成熟率显著上升[(70.00±0.05)%vs.(33.00±0.07)%,P<0.01],纺锤体异常比率显著下降,发生早期凋亡的卵母细胞比率亦显著下降[(37.3±6.1)%vs.(59.7±4.5)%,P<0.01]。热激+褪黑素组热休克蛋白70的表达水平与对照组和热激组相比显著上调(P<0.01)。结论褪黑素能通过调节热激后热休克蛋白70过表达来改善热激对卵母细胞造成的成熟率下降、纺锤体组装异常和早期凋亡比率的增加。

克罗米酚对多囊卵巢综合征患者血清中NO、IL-10及MMP-9的调节作用

目的探索克罗米酚(CC)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中的一氧化氮(NO)、白细胞介素-10(IL-10)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的调节作用。方法选取2017年1~12月在内蒙古包钢医院生殖医学中心就诊的141例PCOS女性患者为研究对象,对其进行口服CC诱导排卵(50mg/d,连续5d)治疗,然后在治疗前和CC治疗4周后采集静脉血运用酶联免疫吸附实验检测患者血清中IL-10、MMP-9和NO的水平。治疗后患者依据有无排卵分为排卵组和未排卵组,依据是否妊娠分为妊娠组和未妊娠组,比较CC治疗前后血清中各指标变化及各组间差异。结果CC处理后,患者血清中NO和IL-10水平显著上升,而MMP-9水平显著下降,与处理前相比差异均有统计学意义(P<0.05),且CC使PCOS患者的排卵率达到53.2%,临床妊娠率达到20.6%。组间比较时,治疗前3个指标均无显著性差异;治疗后排卵组的MMP-9水平显著低于未排卵组(P<0.01),妊娠组的MMP-9水平显著低于未妊娠组(P<0.01),IL-10和NO水平的水平无显著性差异(P>0.05)。结论用CC诱导的排卵能增加NO和IL-10的水平,并降低MMP-9的水平,对有排卵和妊娠患者MMP-9水平影响更为显著,同时也提高了PCOS不孕妇女的排卵率和临床妊娠率。

瘦素对人精子冻融后的保护作用

目的通过在人精子冷冻保护液中添加瘦素,探讨瘦素对冻融后精子质量和功能的作用。方法收集2017年1月至12月内蒙古医科大学第三附属医院生殖医学中心就诊患者的精液。前向运动精子比率≥32%且精子浓度≥15×10^6/ml为正常组,前向运动精子比率<32%且精子浓度<15×10^6/ml为少弱精组,2组标本各30例。液化后的精液样本分别与含有瘦素的冷冻保护液和不含有瘦素的冷冻保护液混匀。冷冻解冻复苏前后,进行精子活力、存活率以及DNA碎片指数(DFI)的检测,除此以外,检测精子的丙二醛含量及活性氧水平,采用单因素方差分析分析精子的活力、存活率、DFI、丙二醛含量和活性氧水平的差异,组间两两比较采用LSD-t检验。结果当添加浓度为10 ng/ml的瘦素后,精子冷冻复苏后总活力最高,达到(53.7±1.5)%。正常组精子在冻融后与新鲜精子相比总活力[(41.5±6.9)%vs(69.9±6.3)%]、存活率[(51.8±4.3)%vs(74.7±3.7)%]均显著下降、DFI[(12.9±3.4)%vs(10.3±3.8)%]上升,活性氧水平[(18.3±1.9)荧光强度vs(7.6±2.6)荧光强度]和丙二醛含量[(5.5±0.8)nmol/108个精子vs(2.6±0.3)nmol/108个精子]均显著上升,差异均具有统计学意义(t=15.7、22.0、2.9、18.2、19.1,P<0.001、<0.001、=0.006、<0.001、<0.001)。少弱精组精子在冻融后与新鲜精子相比总活力[(17.9±2.9)%vs(33.4±5.5)%]、存活率[(39.5±4.4)%vs(57.4±6.2)%]均显著下降、DFI[(35.2±3.6)%vs(21.3±4.1)%]显著上升,活性氧[(64.9±2.9)荧光强度vs(28.3±3.5)荧光强度]和丙二醛[(33.6±2.0)nmol/108个精子vs(12.1±2.3)nmol/108个精子]均显著上升,差异均具有统计学意义(t=13.6、12.9、13.9、44.4、38.7,P均<0.001)。当添加瘦素后,正常组精子在冷冻解冻后,与对照组相比总活力[(54.7±5.9)%vs(41.5±6.9)%]、存活率[(66.3±3.4)%vs(51.8±4.3)%]均显著上升,活性氧[(10.6±2.1)荧光强度vs(18.3±1.9)荧光强度]和丙二醛[(3.4±0.5)nmol/108个精子vs(5.5±0.8)nmol/108个精子]显著下降,差异均具有统计学意义(t=7.9、14.4、15.1、12.8,P均<0.001),但DFI比较,组间差异无统计学意义(P>0.05)。少弱精组精子在冷冻解冻后,与对照组相比总活力[(24.8±2.0)%vs(17.9±2.9)%]、存活率[(49.5±3.8)%vs(39.5±4.4)%]均显著上升,DFI[(26.7±2.7)%vs(35.2±3.6)%]、活性氧[(37.9±4.2)荧光强度vs(64.9±2.9)荧光强度]和丙二醛[(23.1±1.7)nmol/108个精子vs(33.6±2.0)nmol/108个精子]均显著下降,差异均具有统计学意义(t=10.5、9.4、10.2、28.5、21.9,P均<0.001)。结论添加瘦素能有效得减少精子因低温贮藏导致的活力与存活率的下降、DNA碎片及氧化损伤,从而改善精子质量和功能。