血管成形术后血管外膜α-SMA、PCNA和OPN表达变化及意义

目的探讨大鼠胸主动脉血管成形术后血管平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、增殖细胞核抗原(PCNA)和骨桥蛋白(OPN)表达的变化与血管外膜增殖的关系。方法6周龄健康、清洁纯系雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠32只,体质量为(200±20)g;随机将其分为实验组和对照组,实验组大鼠用6 F人冠状动脉快速交换球囊扩张及剥脱胸腹主动脉内膜,对照组大鼠行胸腹主动脉假手术处理,术后第2周取胸主动脉,进行α-SMA、PCNA及OPN免疫组织化学检查;第6周取胸主动脉做组织形态学检查,并进行对比分析。结果对照组胸主动脉见α-SMA外膜和内膜极少量表达及中膜均匀表达;PCNA外膜和内膜极微量表达及外膜OPN阳性表达。实验组胸主动脉外膜和新生内膜α-SMA、PCNA及OPN阳性表达较对照组明显增强,而中膜α-SMA表达明显减弱。实验组胸主动脉外膜厚度和细胞数量及细胞增殖指数较对照组明显增加(P<0.05)。结论血管成形术后,血管外膜成纤维细胞被激活、增殖,向肌成纤维细胞表型转变,外膜OPN表达增多,外膜增厚,参与血管收缩性重塑。

羊脱细胞真皮基质在体内转归的动物实验研究

目的了解羊脱细胞真皮基质(ADM)在受体体内的转归情况。方法健康雄性绵羊活杀扒皮、拔毛,反削为断层皮片,经胰蛋白酶溶液消化、TritonX-100溶液振荡清洗制成符合组织学要求的ADM,一部分置于0.04%的戊二醛溶液中制成交联型ADM,另一部分不做交联。将40只大白鼠随机分为交联组与未交联组,各组20只。交联组每只大白鼠背脊位置设计切口、沿游离出的组织间隙包埋入交联型ADM,未交联组用同样的方法包埋入未交联型ADM。术后对比观察交联与未交联组术区的外观变化、埋植物及周围组织形态结构的变化。结果埋植羊交联和未交联型ADM后,大鼠埋植区均无明显的炎症反应,未出现明显的排斥反应,交联型和未交联型羊ADM被周围组织包裹,包裹组织血运正常,无异常分泌物,镜下交联型和未交联型羊ADM周围均被炎性细胞浸润,以单核细胞和中性粒细胞为主,羊ADM被周围组织吸收逐渐缩小直至消失。结论羊ADM在体内转归过程中无明显的排斥反应,显示了较低的免疫原性。

微孔化羊ADM复合hUCMSC促进创面修复的机制研究

目的探讨微孔化羊脱细胞真皮基质(ADM)复合人脐带间充质干细胞(hUCMSC)促进全层损伤皮肤创面愈合的治疗机制。方法将hUCMSC种植于微孔化羊ADM上共培养,形成复合生物敷料。选用72只裸鼠制作成皮肤全层损伤模型,按随机数字表法分为3组,每组24只,hUCMSC种植于微孔化羊ADM上治疗全层损伤创面组(hUCMSC+微孔化羊ADM组);羊ADM治疗全层损伤组(羊ADM组);碘伏纱布治疗全层损伤创面组(碘伏纱布组)。术后14、21、28 d检测各组裸鼠创面愈合率,运用qRT-PCR技术检测创面组织中Bax和Bcl-2的mRNA的表达,免疫组织化学染色检测创面愈合相关蛋白细胞胶原蛋白Ⅰ和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。数据比较采用单因素方差分析和t检验。结果术后14 d,hUCMSC+微孔化羊ADM组的愈合率为(65.34±14.72)%,明显高于碘伏纱布组[(37.54±10.21)%],也高于羊ADM组[(49.08±11.16)%],差异均有统计学意义(t=19.52、14.72,P<0.05)。随着损伤创面的逐步愈合,术后28 d,hUCMSC+微孔化羊ADM组的愈合率为(98.63±15.41)%,明显高于羊ADM组[(81.74±16.27)%]和碘伏纱布组[(63.47±14.80)%],差异均有统计意义(t=-16.42、20.35,P<0.05)。Bax在hUCMSC+微孔化羊ADM组的创面组织中的表达显著降低,尤其在术后21 d的表达量为0.25±0.06,明显低于碘伏纱布组(0.53±0.16)和羊ADM组(0.41±0.12),差异均有统计学意义(t=3.52、-2.83,P<0.05)。Bcl-2在hUCMSC+微孔化羊ADM组的表达显著高于其他2组,尤其是在术后21 d的表达量为0.63±0.19,明显高于碘伏纱布组(0.34±0.09)和羊ADM组(0.46±0.13),差异均有统计学意义(t=5.31、-6.07,P<0.05)。免疫组织化学技术检测发现hUCMSC+微孔化羊ADM组胶原蛋白Ⅰ和VEGF的表达深棕色细胞虽然比羊ADM组和碘伏纱布组稍微有所增多,但是效果并不显著。结论hUCMSC+微孔化羊ADM复合敷料,通过携带hUCMSC更能促进皮肤全层损伤的愈合并减少凋亡细胞的产生。