特异性小片段干扰RNA降低人源性长寿保障基因2/肿瘤转移抑制基因-1表达对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响

目的 观察人源性长寿保障基因2（LASS2）/肿瘤转移抑制基因-1（TMSG-1）对人前列腺癌细胞株侵袭转移能力的影响.方法 首先采用小片段RNA干扰技术沉默人前列腺癌细胞株PC-3M-2B4（低转移潜能）中LASS2/TMSG-1的表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术、免疫细胞化学法筛选干扰效率最高的小干扰RNA （siRNA）后,选取干扰效率最高的siRNA-2进行后续实验,通过体外侵袭实验、细胞划痕实验及黏附实验检测干扰LASS2/TMSG-1基因前后,PC-3M-2B4细胞侵袭转移能力的改变.结果 筛选出4条siRNA,以空白对照为1,siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及siRNA-4的LASS2/TMSG-1 mRNA表达量分别为1.557、0.155、0.369及0.193;siRNA-2转染组穿膜细胞数为（21.20±1.21）个,细胞的侵袭能力明显高于无关阴性对照组[（l0.07±1.39）个]和空白对照组[（11.00±1.97）个,P＜0.01];siRNA-2转染组细胞划痕修复率[（64.90±0.56）％]明显高于无关阴性对照组[（26.46±0.31）％]和空白对照组[（22.18±0.57）％],差异有统计学意义（P＜0.01）;细胞黏附30、60 min后,与无关阴性对照组[（29.83±0.15）％、（49.90±0.35）％]、空白对照组[（30.37±1.27）％、（50.20±0.06）％]比较,siRNA-2转染组细胞黏附率[（10.10±0.27）％、（30.37±0.30）％]明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 通过RNA干扰技术证实了LASS2/TMSG-1在肿瘤侵袭转移中的作用,证明它是一种肿瘤转移抑制基因.